1、 (江蘇生物，15)下列相關(guān)酶制備和應(yīng)用敘述，正確是()。 A酶解法和吸水漲破法慣用于制備微生物胞內(nèi)酶 B透析、電泳和酸解等辦法慣用于酶分離與純化 C棉織物不能使用添加纖維素酶洗衣粉進行洗滌 D多酶片中胃蛋白酶位于片劑關(guān)鍵層 解析利用酶解法和吸水漲破法使細胞解體，用于制備胞內(nèi)酶；酶純化 和分離辦法有透析法、離心沉降法和電泳法；纖維素酶能清除棉紡織品 表面浮毛，平整織物表面，故可用添加纖維素酶洗衣粉洗滌棉織物；多 酶片中胃蛋白酶位于片劑最外層，保持其它酶在胃中不被破壞。 答案A第2講酶應(yīng)用和生物技術(shù)在其它方面應(yīng)用一、理解能力1.第1頁第1頁2(廣東理綜，5)下列關(guān)于豬血紅蛋白提純描述，不正確是

2、()。 A洗滌紅細胞時，使用生理鹽水可預(yù)防紅細胞破裂 B豬成熟紅細胞中缺乏細胞器和細胞核，提純時雜蛋白較少 C血紅蛋白顏色可用于凝膠色譜法分離過程監(jiān)測 D在凝膠色譜法分離過程中，血紅蛋白比分子量較小雜蛋白移動慢 解析豬成熟紅細胞中缺乏細胞器和細胞核，提純時雜蛋白較少，是 提純血紅蛋白抱負材料。提純血紅蛋白分四步：紅細胞洗滌、血 紅蛋白釋放、分離血紅蛋白溶液、透析，其中洗滌紅細胞時，要用生 理鹽水重復(fù)洗滌，既要將紅細胞洗滌潔凈，又要不破壞紅細胞，然后再 用蒸餾水和甲苯使紅細胞破裂，釋放出血紅蛋白。分離提純血紅蛋白時 用凝膠色譜法，是依據(jù)相對分子質(zhì)量大小來分離蛋白質(zhì)，相對分子質(zhì) 量大蛋白質(zhì)移動速度

3、較快；血紅蛋白顏色可用于觀測紅色區(qū)帶移 動情況，并據(jù)此判斷分離效果。故D不正確。 答案D第2頁第2頁3(江蘇生物，19)在利用雞血進行“DNA粗提取與鑒定”試驗 中，相關(guān)敘述正確是()。 A用蒸餾水將NaCl溶液濃度調(diào)至0.14 mol/L，濾去析出物 B調(diào)整NaCl溶液濃度或加入木瓜蛋白酶，都能夠去除部分雜質(zhì) C將絲狀物溶解在2 mol/L NaCl溶液中，加入二苯胺試劑即呈藍色 D用菜花替換雞血作為試驗材料，其試驗操作步驟相同 解析用蒸餾水將NaCl溶液濃度調(diào)至0.14 mol/L時，濾取析出物；將 絲狀物溶解在0.015 mol/LNaCl中，加入二苯胺試劑，需沸水浴加 熱幾分鐘，才呈藍

4、色；用菜花替換雞血為試驗材料，需要對材料 細胞壁進行處理。調(diào)整NaCl溶液濃度改變不同物質(zhì)在其中溶解 度，加入木瓜蛋白酶分解蛋白質(zhì)都能夠去除部分雜質(zhì)，故B正確。 答案B第3頁第3頁4(江蘇生物，25)(多選)圖1表示制備固定化酵母細胞相關(guān)操 作，圖2是利用固定化酵母細胞進行酒精發(fā)酵示意圖，下列敘述正 確是 () A剛?cè)芑Ｔ逅徕c應(yīng)快速與活化酵母菌混合制備混合液 B圖1中X溶液為CaCl2溶液，其作用是使海藻酸鈉形成凝膠珠 C圖2發(fā)酵過程中攪拌目的是為了使培養(yǎng)液與酵母菌充足接觸 D圖1中制備凝膠珠用蒸餾水洗滌后再轉(zhuǎn)移到圖2裝置中二、獲取信息能力第4頁第4頁解析溶化海藻酸鈉應(yīng)冷卻至室溫后與活化酵母

5、菌混合，A項錯誤。海藻酸鈉與酵母菌混合液應(yīng)滴入CaCl2溶液中，以制備凝膠珠；凝膠珠用蒸餾水沖洗23次后，可轉(zhuǎn)移到發(fā)酵裝置中；攪拌可使酵母菌與培養(yǎng)液充足接觸，有助于發(fā)酵順利進行，故B、C、D三個選項正確。答案BCD第5頁第5頁5(江蘇生物，32)某生物興趣小組開展DNA粗提取相關(guān)探究活 動，詳細環(huán)節(jié)下列： 材料處理：稱取新鮮花菜、辣椒和蒜黃各2份，每份10 g。剪碎后 分成兩組，一組置于20 、另一組置于20 條件下保留24 h。 DNA粗提?。?第一步：將上述材料分別放入研缽中，各加入15 mL研磨液，充足研 磨。用兩層紗布過濾，取濾液備用。 第二步：先向6只小燒杯中分別注入10 mL濾液，

6、再加入20 mL體積分 數(shù)為95%冷酒精溶液，然后用玻璃棒緩緩地向一個方向攪拌，使絮 狀物纏繞在玻璃棒上。 第三步：取6支試管，分別加入等量2 mol/L NaCl溶液溶解上述絮 狀物。三、試驗與探究能力第6頁第6頁DNA檢測：在上述試管中各加入4 mL二苯胺試劑，混合均勻后，置于沸水中加熱5 min，待試管冷卻后比較溶液顏色深淺，結(jié)果下列表。 (注：“”越多表示藍色越深)分析上述試驗過程，回答下列問題：(1)該探究性試驗課題名稱是_。(2)第二步中“緩緩地”攪拌，這是為了減少_。(3)依據(jù)試驗結(jié)果，得出結(jié)論并分析。結(jié)論1：與20 相比，相同試驗材料在20 條件下保留，DNA提取量較多。結(jié)論2

7、：_。材料保留溫度花菜辣椒蒜黃20 20 第7頁第7頁針對結(jié)論1，請?zhí)岢龊侠斫忉專篲。(4)氯仿密度大于水，能使蛋白質(zhì)變性沉淀，與水和DNA均不相溶，且對DNA影響極小。為了深入提升DNA純度，依據(jù)氯仿特性，在DNA粗提取第三步基礎(chǔ)上繼續(xù)操作步驟是：_，然后用體積分數(shù)為95%冷酒精溶液使DNA析出。解析(1)該試驗中把不同材料在不同條件(溫度)下處理，目標是探究不同材料和不同保留溫度對DNA提取量影響。(2)“緩緩地”攪拌是為了降低DNA斷裂。(3)分析表格可得出結(jié)論：相同材料在20 條件下保留，DNA提取量較多。原因可能是低溫克制了DNA酶活性，DNA降解速度慢。等質(zhì)量不同試驗材料，在相同保

8、留溫度下，從蒜黃中提取DNA最多。(4)依據(jù)氯仿特性，可在第三步得到溶液中加入氯仿，使蛋白質(zhì)變性。答案(1)探究不同材料和不同保留溫度對DNA提取量影響(2)DNA斷裂(3)等質(zhì)量不同試驗材料，在相同保留溫度下，從蒜黃提取DNA量最多低溫克制了相關(guān)酶活性，DNA降解速度慢(4)將第三步取得溶液與等量氯仿充分混合，靜置一段時間，吸取上清液第8頁第8頁6(上海生物，(五)回答以下關(guān)于微生物和酶問題。 環(huán)境污染物多聚聯(lián)苯難以降解，研究發(fā)覺聯(lián)苯降解菌內(nèi)聯(lián)苯水解酶是催化多 聚聯(lián)苯降解關(guān)鍵酶。 以下培養(yǎng)基中能有效分離聯(lián)苯降解菌是_，原因是 _。 A培養(yǎng)基(g/L)：某生長因子2.0，(NH4)2SO4 2

9、.0，K2HPO4 3.0，MgSO4 1.0， pH7.4，多聚聯(lián)苯50 mL B培養(yǎng)基(g/L)：牛肉膏10.0，蛋白胨20.0，葡萄糖20.0，NaCl 5.0，pH 7.4 C培養(yǎng)基(g/L)：某生長因子2.0，淀粉20.0，NH4NO3 2.5，MgCl2 0.5， K2HPO43.0，多聚聯(lián)苯50 mL，pH 7.4 深入研究發(fā)覺，不同金屬離子對聯(lián)苯水解酶活性有一定影響，結(jié)果見下 表：四、綜合利用能力第9頁第9頁(1)依據(jù)表中結(jié)果，金屬離子_對該酶活性有一定增進作用。金屬離子對酶活性有增進或克制作用，也許原因是_ _。(2)通過酶工程可將聯(lián)苯水解酶用于生產(chǎn)實踐。酶工程通常包括酶生產(chǎn)

10、、_、酶固定化和酶應(yīng)用等方面。酶固定化好處是_ _。(3)下圖實線表示聯(lián)苯水解酶催化反應(yīng)速度與酶濃度關(guān)系，虛線表示在其它條件不變情況下，底物濃度增長一倍，反應(yīng)速度與酶濃度關(guān)系，能正確表示兩者關(guān)系是_。金屬離子/mmolL1相對活性/%對照組100Mn2123Co279Mg274第10頁第10頁(4)紅球菌和假單孢菌都能降解多聚聯(lián)苯，但研究發(fā)覺以每克菌體計算，兩種菌降解多聚聯(lián)苯能力有所不同，對此現(xiàn)象合理假設(shè)是_或_。解析(1)A培養(yǎng)基中只有多聚聯(lián)苯一個碳源，只有聯(lián)苯降解菌能夠利用這一個碳源而生存。因此，A培養(yǎng)基能夠作為分離聯(lián)苯降解菌選擇培養(yǎng)基。第11頁第11頁(2)依據(jù)表格數(shù)據(jù)，當培養(yǎng)基中添加M

11、n2時，能使聯(lián)苯水解酶活性升高。金屬離子是經(jīng)過與酶結(jié)合后，改變酶空間結(jié)構(gòu)來影響酶活性。(3)酶含有專一性、高效性，酶催化后，酶分子結(jié)構(gòu)不改變，假如能利用酶工程將酶固定下來，便能夠重復(fù)利用，使酶催化反應(yīng)連續(xù)進行。酶工程操作包含酶生產(chǎn)、酶分離純化、酶固定化和酶應(yīng)用等幾個方面。(4)影響酶促反應(yīng)速度原因有酶濃度、底物濃度和溫度、pH等反應(yīng)條件。在反應(yīng)條件適宜，酶量不足情況下，增加底物量，酶促反應(yīng)速度不增加，此時酶促反應(yīng)速度限制因子是酶濃度。伴隨酶濃度增加，當酶濃度不是酶促反應(yīng)速度限制因子時，底物量增加，酶促反應(yīng)速度增加。(5)紅球菌和假單孢菌降解多聚聯(lián)苯能力不同原因可能是兩種菌內(nèi)酶量不同，或者是兩種

12、菌內(nèi)酶結(jié)構(gòu)不同致使酶活性不同。答案A該培養(yǎng)基中多聚聯(lián)苯為唯一碳源(1)Mn2金屬離子與酶結(jié)合能夠改變酶空間結(jié)構(gòu)(尤其是活性部位結(jié)構(gòu))(2)酶分離純化便于重復(fù)利用，能連續(xù)進行反應(yīng)(3)B(4)兩種菌內(nèi)酶量不同兩種菌內(nèi)酶基因結(jié)構(gòu)(酶結(jié)構(gòu))不同第12頁第12頁 (1)酶活力測定普通原理和方法；(2)酶在食品制造和洗滌等方面應(yīng)用；(3)植物組織培養(yǎng)；(4)蛋白質(zhì)提取和分離；(5)PCR技術(shù)基本操作和應(yīng)用。進行本講復(fù)習(xí)應(yīng)從以下角度展開 (1)從試驗角度剖析每項技術(shù)，把握其原理、材料與器材、操作流程及注意事項等；(2)用對比方法區(qū)分一些主要概念和方法；(3)用聯(lián)絡(luò)觀點對待不同技術(shù)，如固定化酵母細胞等內(nèi)容。

13、專家箴言通過以上高考體驗，能夠歸納總結(jié)：第13頁第13頁固定化酶和固定化細胞技術(shù)比較(見下表)更清楚考點一酶研究與應(yīng)用考試闡明(1)酶在食品制造和洗滌等方面應(yīng)用/(2)制備和應(yīng)用固定化酶類型固定酶種類合用辦法長處及不足實例固定化酶_種化學(xué)結(jié)合法、物理吸附法可重復(fù)利用，但只催化_或_化學(xué)反應(yīng)固定化葡萄糖異構(gòu)酶固定化細胞一系列_成本低、操作容易，但反應(yīng)效果_固定化酵母細胞一一個一類包埋法下降第14頁第14頁1酶活性(酶活力)測定普通原理和方法 (1)酶活性(酶活力)含義：酶活性(酶活力)是指酶催化一定化學(xué)反應(yīng)能 力。 (2)酶活性(酶活力)測定普通原理和方法：酶活性(酶活力)通常以單位時 間內(nèi)底物

14、消耗量或者在單位時間內(nèi)產(chǎn)物生成量來表示。2影響酶活性原因、酶用量及應(yīng)用試驗探究時注意問題 (1)試驗設(shè)計時要遵照單一變量標準和對照標準，嚴格控制無關(guān)變量。 (2)探究不同溫度(或pH)對酶活性影響時，溫度(或pH)作為自變量，通常通 過設(shè)置合理梯度來確定最適值。最適值是經(jīng)過比較相同時間內(nèi)取得產(chǎn)量 或效果來確定。 心堂亮 第15頁第15頁溫度和pH在很大程度上對酶構(gòu)象會產(chǎn)生巨大影響，溫度過高或pH過高或過低都會使其失去活性，其曲線如圖。(3)探究最適溫度時，pH為無關(guān)變量，探究最適pH時，溫度最好為最適溫度。(4)探究果膠酶最合用量時，所測出最合用量指在本試驗溫度、pH等條件下測出，因而果膠酶最

15、合用量應(yīng)標明溫度和pH。(5)探究加酶洗衣粉最適溫度要依據(jù)生活中實際情況，合理設(shè)置溫度梯度。(6)在使用加酶洗衣粉時不但要考慮最佳洗滌效果條件，還要考慮到酶專一性和洗滌成本問題。第16頁第16頁 .果膠酶能夠分解植物細胞之間果膠，使榨取果汁變得更容易，果膠被分解后，渾濁果汁會變得澄清。既有磨漿機、質(zhì)量分數(shù)為2%果膠酶溶液、蒸餾水、一定濃度鹽酸和氫氧化鈉溶液等試驗材料，下表是某小組利用上述材料進行相關(guān)試驗(“/”表示不加)。強信心 【例1】編號項目試管甲乙丙丁1在試管中加入蘋果泥2 mL2 mL2 mL2 mL22 mL/2 mL2 mL3加入不同樣液體2 mL蒸餾水2 mL蒸餾水2 mL鹽酸2

16、 mL氫氧化鈉溶液4搖勻，恒溫處理15 min15 min15 min15 min第17頁第17頁請回答以下問題。(1)表中處內(nèi)容是_。(2)若要驗證果膠酶作用，應(yīng)把_兩個試管同時取出并過濾相同時間，觀測并比較，預(yù)期試驗現(xiàn)象與結(jié)果是_。(3)比較試管甲、丙、丁可知，其試驗?zāi)繕耸莀 _。為確保試驗成功，請將表中編號正確排序：_。.在日常洗滌中，普通洗衣粉已經(jīng)逐步被加酶洗衣粉所代替，加酶洗衣粉中堿性蛋白酶、纖維素酶、脂肪酶、淀粉酶等能夠?qū)⒄掣皆谝挛锷夏虧n、汗?jié)n、血漬等快速、徹底地去除掉，因此非常受人們歡迎。(1)某班同學(xué)為探究某復(fù)合加酶洗衣粉最正確洗滌溫度，設(shè)計了一個探究試驗，該試驗自變量應(yīng)為_。

17、試驗過程中，不同小組選取了含不同污染物衣物作為試驗材料，最終止果匯總以下表：第18頁第18頁不同溫度下除去不同污漬所需時間/min由上表可知，在洗滌含不同污染物衣物時要_。(2)從生物體中提取出酶首先要檢測_，方便更加好地將酶應(yīng)用于實踐。(3)加酶洗衣粉中酶是用特殊化學(xué)物質(zhì)包裹，遇水后包裹層很快溶解，釋放出來酶快速發(fā)揮催化作用，請說明這是否利用了酶固定化技術(shù)及其理由。_。水溫/51525354555657585植物油225110987849352246109牛奶200103704211344991100漿糊1439965312163497148第19頁第19頁審題關(guān)鍵“鹽酸”“氫氧化鈉”“果膠

18、酶”“最正確洗滌溫度”“復(fù)合酶”“包裹”。命題起源pH對果膠酶影響、溫度對加酶洗衣粉洗滌效果影響、酶固定化。思緒分析.從題干中表格上看，甲、乙試管是探究果膠酶催化作用；甲、丙、丁三個試管是探究pH對酶活性影響；操作時，先將酶分別放在不同環(huán)境條件下，然后再加入底物，操作次序若改變，會影響試驗結(jié)果。.(1)探究溫度對酶活性影響時，自變量應(yīng)為溫度。由表格可知，去除不同污染物時所需最適溫度不同，因此洗滌含不同污染物衣物時應(yīng)選取不同溫度水。(2)只有酶含有活性才干將酶應(yīng)用于實踐。(3)固定化酶需要把酶固定在一定載體上，使酶既能與反應(yīng)物接觸，又能與產(chǎn)物分離，能夠重復(fù)利用，本題中未利用固定化酶技術(shù)。答案.(

19、1)質(zhì)量分數(shù)為2%果膠酶溶液(2)甲與乙甲果汁比乙澄清度高(3)探究pH對果膠酶活性影響2、3、1、4.(1)溫度使用不同溫度水(2)酶活性(3)未利用酶固定化技術(shù)，因為酶未固定在不溶于水載體上，也不能重復(fù)利用第20頁第20頁1植物莖組織培養(yǎng)與花藥植株產(chǎn)生比較(見下表)更清楚考點二植物組織培養(yǎng)技術(shù)考試闡明植物組織培養(yǎng)菊花莖組織培養(yǎng)月季花藥培養(yǎng)理論依據(jù)細胞_基本過程脫分化、_影響原因材料、營養(yǎng)、激素、pH、溫度、_等選擇材料體細胞花藥(生殖細胞)操作流程制備培養(yǎng)基外植體消毒接種培養(yǎng)移栽栽培選材材料消毒接種和培養(yǎng)篩選和誘導(dǎo)移栽栽培選育全能性再分化光照第21頁第21頁2.植物組織培養(yǎng)技術(shù)、微生物培養(yǎng)

20、技術(shù)和無土栽培技術(shù)比較(見下表) 三種技術(shù)中均需要一定營養(yǎng)物質(zhì)，但營養(yǎng)物質(zhì)劃分標準不同。植物組織培養(yǎng)微生物培養(yǎng)無土栽培含義在無菌條件下，將_植物體器官或組織接種在適當培養(yǎng)基上進行培養(yǎng)，最后發(fā)育成完整植物體在無菌條件下，在適宜營養(yǎng)和環(huán)境條件下對微生物培養(yǎng)將植物生長發(fā)育過程中所需各種礦質(zhì)元素按一定百分比配成營養(yǎng)液，并利用這種營養(yǎng)液栽培植物培養(yǎng)基成份水、礦質(zhì)元素、蔗糖、維生素、有機添加物和_等水、無機鹽、碳源、氮源等水、必需礦質(zhì)元素特殊操作要求嚴格控制無菌操作，在培養(yǎng)過程中要更換培養(yǎng)基，調(diào)整細胞分裂素和生長素百分比嚴格控制無菌操作，整個培養(yǎng)過程無需更換培養(yǎng)基適宜環(huán)境條件，基質(zhì)墊底并固定幼苗，不需要確

21、保_條件離體植物激素無菌第22頁第22頁原理：細胞全能性(1)植物體內(nèi)已分化細胞，在離體狀態(tài)和一定條件下，能夠發(fā)育成完整植株，其過程下列：(2)影響植物組織培養(yǎng)原因a內(nèi)因：植物種類，同一個植物材料年齡、保留時間長短、部位等。b外因：MS培養(yǎng)基中營養(yǎng)物質(zhì)和pH、溫度、光照等環(huán)境條件。c植物激素：生長素用量/細胞分裂素用量影響細胞分裂、分化，該比值較高時，有助于根分化、克制芽形成；該比值較低時，有助于芽分化、克制根形成；該比值適中時，增進愈傷組織形成。 心堂亮 第23頁第23頁 (廣州綜合測試)下圖是月季花藥離體培養(yǎng)產(chǎn)生花粉植株兩種途徑，請據(jù)圖回答下面相關(guān)問題。(1)選取材料適當是否是成功誘導(dǎo)出花

22、粉植株主要原因，普通來說選取_期花粉可提升成功率。選擇花粉時，普通要通過_來擬定花粉是否處于適當發(fā)育期，這時需要對花粉細胞核進行染色，慣用染色劑是_。(2)上圖中花藥經(jīng)脫分化產(chǎn)生胚狀體還是愈傷組織主要取決于培養(yǎng)基中_。強信心 【例2】第24頁第24頁(3)胚狀體與愈傷組織在結(jié)構(gòu)上主要區(qū)別在于愈傷組織細胞排列疏松無規(guī)則，是一個高度_薄壁細胞，胚狀體與_發(fā)育形成胚有類似結(jié)構(gòu)，即含有胚芽、胚軸和胚根。(4)無菌技術(shù)也是成功誘導(dǎo)出花粉植株主要原因，請闡明下列各項需要消毒，還是需要滅菌。培養(yǎng)基培養(yǎng)皿接種環(huán)花蕾試驗操作者雙手三角錐形瓶。_(填編號)需要滅菌，_(填編號)需要消毒。(5)試管苗移栽到土壤前，

23、通常要進行壯苗處理，應(yīng)如何壯苗？_。第25頁第25頁審題關(guān)鍵“花藥”、“愈傷組織”、“消毒”、“滅菌”、“壯苗”。命題起源月季花藥離體培養(yǎng)過程。思緒分析(1)單核期花粉對離體刺激敏感，選取該期花粉可提升培養(yǎng)成功率，選擇花粉時可用顯微鏡觀測、篩選；對花粉細胞核染色應(yīng)當選擇堿性染料，慣用醋酸洋紅。(2)細胞培養(yǎng)成植株兩條路徑取決于植物激素種類及百分比，尤其是生長素和細胞分裂素。(3)愈傷組織細胞特點是細胞排列疏松、無規(guī)則、高度液泡化；胚狀體是含有與胚相同結(jié)構(gòu)，即含有胚芽、胚軸和胚根。(4)滅菌對象為培養(yǎng)基和試驗器材，消毒對象為要保持活性材料和試驗者本身。(5)壯苗就是使試管苗逐步適應(yīng)外界環(huán)境做法。

24、答案(1)單核鏡檢(顯微鏡觀測)醋酸洋紅(2)激素種類及其濃度配比(3)液泡化正常受精卵(或受精卵)(4)(5)將試管苗移栽到經(jīng)消毒過培養(yǎng)基中生活一段時間，等幼苗長壯后再移栽到土壤中第26頁第26頁1細胞內(nèi)DNA復(fù)制與體外DNA擴增(PCR技術(shù))比較(見下表)更清楚考點三DNA和蛋白質(zhì)技術(shù)考試闡明(1)蛋白質(zhì)提取和分離/(2)PCR技術(shù)基本操作和應(yīng)用細胞內(nèi)DNA復(fù)制PCR不同樣點解旋解旋酶，邊解旋邊復(fù)制80100 高溫解旋，雙鏈完全分開酶DNA解旋酶、_、DNA連接酶TaqDNA聚合酶引物DNA單鏈DNA或RNA能量ATP_溫度體內(nèi)溫和條件高溫子鏈合成一條鏈連續(xù)（先導(dǎo)鏈），另一條鏈不連續(xù)，先合

25、成片段,再由DNA連接酶連結(jié)（滯后鏈）兩條子鏈均連續(xù)合成循環(huán)次數(shù)受生物體本身控制30多次相同點a.提供_模板b四種_作原料c子鏈延伸方向都是從_端到_端d都需在一定緩沖溶液中進行DNA聚合酶不加DNA脫氧核苷酸53第27頁第27頁2.蛋白質(zhì)提取和分離(見下表)步 驟操 作樣品處理通過紅細胞洗滌、血紅蛋白釋放、分離血紅蛋白溶液等操作搜集到血紅蛋白溶液粗分離通過_清除血紅蛋白溶液中相對分子質(zhì)量較小雜質(zhì)純化通過_分離相對分子質(zhì)量不同樣蛋白質(zhì)純度鑒定SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳判斷純化蛋白質(zhì)是否達到要求透析法凝膠色譜法第28頁第28頁1人和哺乳動物成熟紅細胞中不含細胞核，也沒有DNA，不適于作 為DNA提

26、取材料，但卻是提取血紅蛋白抱負材料。2凝膠色譜柱直徑大小不影響分離效果，但直徑過大造成洗脫液體 積大，樣品稀釋度大；凝膠色譜柱高度與分離度相關(guān)。3紅細胞洗滌過程中，洗滌三次后，上清液仍有黃色，可增長洗滌次 數(shù)，不然無法除去血漿蛋白；離心時轉(zhuǎn)速要低，時間要短，不然白 細胞等會一同沉淀，達不到分離效果。4血紅蛋白釋放過程中，蒸餾水作用是漲破紅細胞，甲苯作用主 要是溶解細胞膜。 心堂亮 第29頁第29頁 .某生物興趣小組在學(xué)習(xí)完“蛋白質(zhì)提取和分離”后，聯(lián)絡(luò)相關(guān)試驗，準備從豬肝臟研磨液中初步提取過氧化氫酶，設(shè)計“過氧化氫酶提取、分離流程”(以下圖)。請據(jù)圖回答以下相關(guān)問題。(1)向肝細胞懸液中加入一定

27、量pH7.0緩沖液并充分攪拌，能夠破碎肝細胞，破碎細胞原理是_ _。強信心 【例3】第30頁第30頁與使用蒸餾水相比，使用緩沖液優(yōu)點是_ _。(2)蛋白質(zhì)粗分離階段透析目標是_ _。(3)電泳利用了待分離樣品中各種分子_等差異，而產(chǎn)生不同遷移速度，實現(xiàn)各種分子分離。第31頁第31頁(4)試驗小組以3%過氧化氫溶液和取得過氧化氫酶為材料進行溫度對酶催化活性影響探究，得到右圖所表示結(jié)果，依據(jù)試驗結(jié)果得出“過氧化氫酶能耐受100 高溫”結(jié)論，請問這一結(jié)論是否可靠？為何？_。.多聚酶鏈式反應(yīng)(PCR)是一個體外快速擴增DNA片段技術(shù)。請回答下列相關(guān)PCR技術(shù)基本原理及應(yīng)用問題。(1)DNA兩條鏈是反向平行，通常將_末端稱為5端，當引物與DNA母鏈通過堿基互補配對結(jié)合后，DNA聚合酶就能從引物_開始延伸DNA鏈。第32頁第32頁(2)PCR利用了DNA熱變性原理解決了打開DNA雙鏈問題，但又導(dǎo)致了DNA聚合酶失活新問題。到20世紀80年代，科學(xué)家從一種Taq細菌中分離到_，它發(fā)現(xiàn)和應(yīng)用解決了上述問題；要將Taq細菌從其他普通微生物中分離出來，所用培養(yǎng)基叫_。(3)PCR每次循環(huán)