1、理化鑒別第1頁，共24頁，2022年，5月20日，16點43分，星期四 中藥制劑的理化鑒別是利用其藥味（原料藥）中的某種或某類指標(biāo)性成分的理化性質(zhì)，通過化學(xué)分析方法和儀器分析方法，檢測有關(guān)成分在制劑中是否存在，進而對所含藥味與處方的一致性做出判斷，達到鑒定藥品真?zhèn)蔚哪康摹?藥品真實性的檢定是藥品質(zhì)量控制的重要內(nèi)容，是評價藥品質(zhì)量的重要依據(jù)。如果藥品缺乏真實性，則可判定為不合格藥品，并以假藥論處。第2頁，共24頁，2022年，5月20日，16點43分，星期四理化鑒別是以制劑藥味中的指標(biāo)性成分（主要為有效成分或特征性成分）為檢測對象，故可以更加客觀深刻地評價藥品的真實性。對于液體制劑或其它不含原料

2、藥粉的制劑，理化鑒別則顯得尤為重要。第3頁，共24頁，2022年，5月20日，16點43分，星期四1、一般化學(xué)反應(yīng)法2、升華鑒別法3、熒光鑒別法4、薄層色譜鑒別法5、氣相色譜鑒別法6、高效液相色譜鑒別法 其中薄層色譜法應(yīng)用最為廣泛第4頁，共24頁，2022年，5月20日，16點43分，星期四 1.原理： 一般化學(xué)反應(yīng)法是利用檢測試劑與制劑中的指標(biāo)性成分發(fā)生化學(xué)反應(yīng)，根據(jù)所產(chǎn)生的顏色、沉淀或氣體等現(xiàn)象，來判斷某些成分或某些藥味的有無。由此可見，所謂一般化學(xué)反應(yīng)法即通常所說的顯色反應(yīng)和沉淀反應(yīng)。第5頁，共24頁，2022年，5月20日，16點43分，星期四2.特點1)、一般化學(xué)反應(yīng)法具有操作簡便，

3、適用性較強等特點。2)、其否定功能往往強于肯定功能，專屬性較差。3)、易發(fā)生假陽性或假陰性反應(yīng)第6頁，共24頁，2022年，5月20日，16點43分，星期四 假陽性或假陰性反應(yīng)克服方法如下： 對樣品進行預(yù)處理，除去干擾性成分，富集被檢成分。 選用專屬性較強的檢測試劑。 必要時做陽性或陰性對照試驗加以驗證，保證其專屬性和靈敏度。第7頁，共24頁，2022年，5月20日，16點43分，星期四3.常用的一般化學(xué)反應(yīng) 主要用于制劑中生物堿、黃酮類、蒽醌類、皂苷、香豆素、萜類以及各種礦物類成分的鑒別。（一）生物堿1)碘化鉍鉀反應(yīng) 產(chǎn)生紅棕色沉淀2)碘化汞鉀反應(yīng) 產(chǎn)生類白色沉淀3)硅鎢酸反應(yīng) 產(chǎn)生白色沉淀

4、4)苦味酸反應(yīng) 產(chǎn)生黃色結(jié)晶性沉淀第8頁，共24頁，2022年，5月20日，16點43分，星期四（二） 黃酮類化合物 最多使用的檢識反應(yīng)為鹽酸-鎂粉反應(yīng)，呈紫紅色。例如：山楂、淫羊藿、黃芩。此外，黃芩提取物采用二氯化鋯-鹽酸顯色反應(yīng)進行檢識。（三）蒽醌類化合物 主要應(yīng)用堿液反應(yīng)，陽性反應(yīng)呈紅色，加酸紅色褪去呈黃色。第9頁，共24頁，2022年，5月20日，16點43分，星期四（四）皂苷泡沫反應(yīng) 樣品水溶液振搖后，產(chǎn)生持久性泡沫。醋酐-濃硫酸反應(yīng) 甾體皂苷呈現(xiàn)污綠色，三萜類皂苷呈現(xiàn)紅、紅紫色。濃硫酸反應(yīng) 呈現(xiàn)紅、紅紫色。三氯化銻或五氯化銻反應(yīng) 氯仿液呈紫蘭色。氯仿-濃硫酸反應(yīng) 氯仿層出現(xiàn)紅色或藍

5、色，并具綠色熒光。第10頁，共24頁，2022年，5月20日，16點43分，星期四（五）香豆素、內(nèi)酯類和酚類 常用的檢識反應(yīng)有： 氯亞氨基-2,6-二氯醌-四硼酸鈉反應(yīng)，呈現(xiàn)藍色。異羥肟酸鐵反應(yīng) 呈紅色。第11頁，共24頁，2022年，5月20日，16點43分，星期四（六）揮發(fā)性成分 主要使用香草醛-濃硫酸反應(yīng)檢識此類成分，正反應(yīng)呈紅、紅紫色。（七）礦物藥 1、朱砂（主含HgS)主要采用銅片反應(yīng)。 2、石膏、牡蠣、海螵蛸等 此類藥物均富含鈣鹽，主要采用草酸銨反應(yīng)。 產(chǎn)生草酸鈣溶于鹽酸，難溶于醋酸。 3、雄黃（主含As2S2) 氯化鋇沉淀法（檢出硫） 硫化氫反應(yīng)（檢出砷）產(chǎn)生As2S3,在鹽酸中

6、析出黃色沉淀，并溶于碳酸銨中 第12頁，共24頁，2022年，5月20日，16點43分，星期四（八）動物藥 常含有較多的蛋白質(zhì)或氨基酸、故鑒別此類藥物，常使用茚三酮反應(yīng)，正反應(yīng)呈紅紫色。第13頁，共24頁，2022年，5月20日，16點43分，星期四操作方法： 大多為試管反應(yīng)，或在檢測試紙上、或在蒸發(fā)皿（坩堝）中進行反應(yīng)。第14頁，共24頁，2022年，5月20日，16點43分，星期四結(jié)果判定：將反應(yīng)現(xiàn)象或結(jié)果與藥品標(biāo)準(zhǔn)對照，若一致則符合規(guī)定。若不一致則判定為不符合規(guī)定。第15頁，共24頁，2022年，5月20日，16點43分，星期四注意事項：試管反應(yīng)一般使用210cm試管，取供試液1-2ml

7、。加入檢測試液時，試管應(yīng)稍傾斜，試液應(yīng)沿試管內(nèi)壁逐滴加入，滴管下口不得觸及內(nèi)壁。加入反應(yīng)試液后一般需振搖試管，使之與供試液搖勻。振搖時應(yīng)緩緩搖擺振搖，不得上下振搖，手指不允許堵塞試管口，若需層反應(yīng)，則不得振搖試管。第16頁，共24頁，2022年，5月20日，16點43分，星期四一般需在白色背景下觀察反應(yīng)所產(chǎn)生的顏色或沉淀，若沉淀為白色則需在黑色背景下觀察。如果反應(yīng)需加熱，一般在水浴中加熱。用試管夾夾持試管，內(nèi)容物不得超過容積的2/3，試管應(yīng)傾斜45度，試管口不得閉塞，并不得朝向人。加熱有機溶液絕對不允許使用明火。如果反應(yīng)需無水條件，必須保持試管、蒸發(fā)皿等容器的干燥，例如醋酐-濃硫酸反應(yīng)。第17

8、頁，共24頁，2022年，5月20日，16點43分，星期四升華法本法是利用升華法來鑒別中藥制劑中某些具有升華性質(zhì)的化學(xué)成分。這些成分在一定溫度下能升華而與其他成分分離。鑒別方法主要有：取升華物在顯微鏡下觀察具有一定形狀或在可見光下具有一定顏色或在紫外下觀察顯出不同顏色的熒光或加一定試劑處理后顯出不同顏色或熒光等制劑中若有2種以上藥味都含有升華物，而升華溫度不同，則可控制加熱溫度，分段收集升華物，分別進行鑒別。例：冰片微量升華，得白色升華物，加新配的1%香草醛硫酸液1-2滴，液滴邊緣漸現(xiàn)玫瑰紅色。第18頁，共24頁，2022年，5月20日，16點43分，星期四光譜法一）熒光法 有些中藥材含有能產(chǎn)

9、生熒光的化學(xué)成分，這些成分有的在可見光或紫外照射下能發(fā)出熒光，有的必須經(jīng)處理后發(fā)出熒光。含有這類藥材的中藥制劑可用熒光法進行鑒別。 通常的操作方法是取制劑的提取液點在濾紙上或試紙上，置紫外燈365nm或254nm觀察，有時則加一定試劑后再進行觀察。二）可見-紫外分光光度法 常見的鑒別方法： 1.規(guī)定吸收波長法 樣品經(jīng)處理后，測定其吸收光譜，在一定波長處有最大吸收。第19頁，共24頁，2022年，5月20日，16點43分，星期四2.對照品對比法 取對照品或?qū)φ账幉募肮┰嚻方?jīng)處理后，制成對照品溶液以及供試品溶液，分別測定吸收光譜，比較二者吸收光譜的一致性。3.規(guī)定吸收波長及吸收度法 取樣品經(jīng)處理后

10、，測定吸收光譜，在吸收光譜的規(guī)定波長下，應(yīng)有若個吸收峰，并有相應(yīng)的吸收度值。4.規(guī)定吸收波長和吸收度比值法 樣品在一定波長下產(chǎn)生相應(yīng)的吸收峰并且吸收度與對照峰的吸收度比值應(yīng)在一定范圍內(nèi)（此法的條件是要有對照品或參照物）5.多溶劑光譜法 選擇不同極性的溶劑按一定次序提取樣品，將樣品分為若干個溶劑組，測定各組的吸收光譜，根據(jù)所得到的特征吸收光譜或?qū)?shù)光譜進行鑒別這種方法的先決條件是處方和工藝固定、原料藥品質(zhì)恒定、具有可靠地對照物或?qū)φ展庾V，否則難以說明問題。第20頁，共24頁，2022年，5月20日，16點43分，星期四三）紅外分光光度法第21頁，共24頁，2022年，5月20日，16點43分，星

11、期四色譜法一）紙色譜 以紙為載體，以紙上所含的水或其他物質(zhì)為固定相，用展開劑進行展開的分配色譜。二）薄層色譜法 點樣：一般原點直徑不大于3mm，高效薄層板原點直徑不大于2mm，點樣量最好控制在10微升以下，如果在一個位置多次點樣，注意不要將點點成空心圓，選用的溶劑沸點不宜太高如正丁醇或太低如乙醚。點樣后可將薄層板再干燥。 控制展開時的相對濕度可在雙槽展開缸一側(cè)用一定濃度的硫酸溶液，密閉放置一定時間（15-30min）,再加入展開劑于另一側(cè)展開。也可以將點樣后的薄層板放入內(nèi)有一定濃度的硫酸溶液或其他調(diào)節(jié)相對濕度的無機鹽水溶液的容器內(nèi)（或特制的濕度控制箱），密閉放置一定時間后取出，立即展開第22頁，共24頁，2022年，5月20日，16點43分，星期四四）氣相色譜法 氣相色譜法在定性分析中較為常用，主要是利用保留值進行定性，多用已知物對照作為鑒別的依據(jù)。五）高效液相色譜法 定性鑒別與氣相有很多相似之處。主要是