1、青絲線草多糖的含量測(cè)定【摘要】目的建立青絲線草中多糖的含量測(cè)定方法。方法采用苯酚硫酸比色法。結(jié)果測(cè)得含量為13.74%，精細(xì)度及重復(fù)性良好，回收率為99.35%,RSD為1.3%。結(jié)論此方法操作簡(jiǎn)便，準(zhǔn)確性好，為青絲線草的質(zhì)量控制提供了一個(gè)定量方法和參考根據(jù)?！娟P(guān)鍵詞】青絲線草；多糖Abstrat：bjetiveTestablishanUVethdfrthedeterinatinfplysaaridesinPurplehypestes.ethdsPhenl-Vitrilethd.ResultsThententfplysaharideas13.74%,anditsreveryrateas99.3

2、5%,RSDas1.3%.nlusinTheethdissipleandaurate.ItillprvideanexellentquantitativeethdandreferenefrqualityntrlfPurplehypestesherb.Keyrds：PurpleHypestesherb;Plysaharide青絲線草為爵床科Aanthaea槍刀藥屬植物槍刀藥Hypestespurple(L.)Sland的全草1。槍刀藥屬植物中國(guó)產(chǎn)3種，均可藥用，分布于中國(guó)臺(tái)灣、廣東、廣西。味甘淡，性微寒。功能清熱解毒，消炎，消腫散淤，涼血止血，健脾，止咳，生津止渴。用于治療支氣管炎、肺結(jié)核咳血、咳

3、嗽、消渴、糖尿并刀傷出血、跌打腫痛。據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道，青絲線草中主要含有氨基酸、生物堿、酚類、糖類等2，3。現(xiàn)代藥理研究證明，多糖物質(zhì)及其衍生物具有藥用價(jià)值，尤其在抗凝、抗血栓、調(diào)血脂、調(diào)節(jié)免疫功能和抗腫瘤、抗放射方面均有顯著的藥理作用與療效。多糖類中藥常作為有效的免疫調(diào)節(jié)劑，能明顯調(diào)節(jié)T，B，TL，NK和等細(xì)胞功能；促進(jìn)Ig類抗體含量進(jìn)步，促進(jìn)IL-2產(chǎn)生和IL-2L的表達(dá)，誘導(dǎo)IL-6和TNF的產(chǎn)生4，5。筆者測(cè)定了青絲線草中多糖的含量，作為評(píng)價(jià)該草藥質(zhì)量的指標(biāo)之一。1儀器與材料1.1儀器FH-207B三用紫外分析儀上海精科實(shí)業(yè)；SB-5200超聲波提取器上海新芝生物技術(shù)研究所；AB204-N電

4、子分析天平梅特勒-托利多儀器；TDA-8002型恒溫水浴箱余姚工業(yè)儀器二廠。1.2試劑無(wú)水葡萄糖批號(hào)：0403251，廣州新成化工廠，AR級(jí)，其余化學(xué)試劑均為國(guó)產(chǎn)AR級(jí)。1.3樣品青絲線草產(chǎn)自廣東江門地區(qū)，經(jīng)廣州中醫(yī)藥大學(xué)中藥鑒定教研室周誠(chéng)教授鑒定為爵床科槍刀藥屬植物槍刀藥Hypestespurpurea(L.)Sland的全草。2方法與結(jié)果2.1青絲線草多糖的提取與精制稱取青絲線草粗粉50g，置圓底燒瓶中，加石油醚6090400l，浸泡2h，回流提取1h，濾過，濾渣揮干溶媒，以80%乙醇400l回流提取2次，1h/次，濾過，濾渣置圓底燒瓶中，加蒸餾水600l浸泡1h后回流提取1h，濾過，再加

5、蒸餾水400l回流提取1h，濾過，濾液合并，濃縮至200l，Sevage法除蛋白后加95%乙醇使含醇80%，靜置過夜，抽濾，濾渣以無(wú)水乙醇、丙酮依次洗滌屢次，得精制多糖，60烘干備用。2.2苯酚試液的配制取苯酚100g，加鋁片0.1g和碳酸氫鈉0.05g，蒸餾，搜集182餾分。稱取5g，加水溶解，定容于100l棕色容量瓶臨用前新配。2.3測(cè)定波長(zhǎng)的選擇精細(xì)汲取0.02l/l葡萄糖溶液2.0l，置15l具塞試管中，加苯酚試劑1.0l混勻，加濃硫酸5.0l，混勻，放置15in，置40水浴中加熱10in，取出放置15in，以蒸餾水同法操作為空白，在460510n測(cè)定吸收度，確定最大吸收波長(zhǎng)為488n

6、。2.4標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備精細(xì)稱取經(jīng)105枯燥至恒重的無(wú)水葡萄糖505.6g，置50l量瓶中加水溶解并稀釋至刻度，搖勻，得標(biāo)準(zhǔn)液貯備液。取此貯備液分別稀釋為0.005056，0.010112，0.020224，0.040448，0.050560g/l的5個(gè)不同濃度的對(duì)照品溶液。精細(xì)汲取溶液各2.0l置10l具塞試管中，加苯酚試劑1.0l混勻，再迅速參加濃硫酸5.0l混勻，放置15in后置40水浴中加熱10in，取出放置15in，以相應(yīng)試劑為空白，照分光光度法在488n處測(cè)定吸收度。求得標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程：A=12.975+0.012,r=0.9998n=5。樣品在0.0050.05g/l的范圍內(nèi)線性

7、良好。2.5換算因素的測(cè)定取60枯燥至恒重的精制青絲線草多糖約10g，精細(xì)稱定，置50l容量瓶中，加水溶解并稀釋至刻度，搖勻。精細(xì)汲取該溶液2.0l，照標(biāo)準(zhǔn)曲線制備項(xiàng)下方法，自“加苯酚試劑1.0l起，依法測(cè)定吸收度，按下式計(jì)算換算因素：f=s/(s為多糖液濃度，為多糖液中葡萄糖濃度)。計(jì)算得f=3.93。2.6穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)取樣品溶液、標(biāo)準(zhǔn)品溶液及精制多糖溶液各2.0l，照標(biāo)準(zhǔn)曲線制備項(xiàng)下方法，自“加苯酚試劑1.0l起，依法測(cè)定吸收度，并分別于0，5，10，15，20，25，30，35，40，50，60in測(cè)定，結(jié)果說(shuō)明樣品液至少在1h內(nèi)穩(wěn)定性良好。2.7精細(xì)度實(shí)驗(yàn)取樣品約0.2g，精細(xì)稱定，按樣

8、品測(cè)定項(xiàng)下操作，測(cè)吸收度，結(jié)果RSD=0.82%n=6。2.8重復(fù)性實(shí)驗(yàn)取藥材粉末6份，精細(xì)稱定，按樣品測(cè)定項(xiàng)下操作，測(cè)吸收度，計(jì)算得RSD=0.75%n=6。結(jié)果說(shuō)明該方法具有較好的重復(fù)性。2.9回收率實(shí)驗(yàn)取藥材粉末6份，每份約0.1g，精細(xì)稱定，精細(xì)參加精制多糖約13g，按樣品測(cè)定項(xiàng)下操作，測(cè)吸收度。結(jié)果見表1。表1回收率實(shí)驗(yàn)結(jié)果略回收率%=(測(cè)得量-樣品中多糖含量)/多糖參加量100%2.10樣品測(cè)定取樣品粉末約0.2g，精細(xì)稱定，加80%乙醇100l，超聲振蕩提取20in，過濾，藥渣用熱80%乙醇洗滌，揮干乙醇后加蒸餾水100l超聲振蕩提取20in，過濾，濾渣再加80l蒸餾水超聲振蕩提

9、取20in，過濾，殘?jiān)脽崴礈?，洗液并入提取液，待冷后轉(zhuǎn)移于250l容量瓶，加蒸餾水稀釋至刻度，精細(xì)汲取2.0l，置10l具塞試管中，按“標(biāo)準(zhǔn)曲線項(xiàng)下方法自“加苯酚試劑1.0l起，依法操作，測(cè)得吸收度，計(jì)算樣品中多糖含量。結(jié)果見表2。表2青絲線草多糖含量測(cè)定結(jié)果略3討論本文利用苯酚硫酸法測(cè)定了青絲線草的主要活性成分多糖，作為評(píng)價(jià)該草藥質(zhì)量的指標(biāo)之一。此項(xiàng)實(shí)驗(yàn)研究為首次報(bào)道，本文對(duì)青絲線草的主要化學(xué)成分的研究結(jié)果為開拓新藥源提供了新的科學(xué)用藥根據(jù)。多糖含量的測(cè)定有多種方法，本文選用苯酚硫酸法，生成橙黃色溶液，在488n處有特征吸收。此方法方便簡(jiǎn)單，最為常用，但需嚴(yán)格控制水解條件，否那么誤差較大。本實(shí)驗(yàn)方法操作簡(jiǎn)單，所用儀器簡(jiǎn)單，消耗本錢低，在缺乏先進(jìn)檢測(cè)儀器的基層單位，實(shí)為一種可靠、簡(jiǎn)單的檢測(cè)方法。【參考文獻(xiàn)】1廣州空軍.常用中草藥手冊(cè).北京：人民衛(wèi)生出版社,2022：50.2嚴(yán)永清,余傳隆,黃泰康,等.中藥辭海,第2卷.北京：中國(guó)醫(yī)藥科技出版社,1993：546.3南京中醫(yī)藥大學(xué).中藥大辭典,上冊(cè),第2版.上海：上?？茖W(xué)技術(shù)出版社，2022：1820.4季宇彬.中藥多糖的化學(xué)與藥理.北京：人民衛(wèi)生出版社，2