1、補陽還五湯及拆方預(yù)處理對MIRI家兔氧化指標(biāo)及心肌酶的影響【摘要】觀察補陽還五湯及拆方對心肌缺血再灌注損傷的保護作用。方法40只家兔隨機分為5組：假手術(shù)組、模型組、補陽還五湯組、補氣組、活血通絡(luò)組。分別預(yù)處理1周后，結(jié)扎左冠狀動脈前降支建立心肌缺血再灌注損傷模型。測定血清中肌酸激酶K、乳酸脫氫酶LDH、超氧化物歧化酶SD、丙二醛DA的含量。結(jié)果與模型組比擬，各用藥組血清K、LDH及DA含量明顯降低P0.01，血清SD的活性顯著升高，且補陽還五湯組作用最明顯P0.05。結(jié)論補陽還五湯及拆方可去除氧自由基，減輕心肌缺血再灌注損傷，補陽還五湯組的療效明顯優(yōu)于拆方組?！娟P(guān)鍵詞】補陽還五湯；拆方；缺血再

2、灌注；氧化指標(biāo)；心肌酶本研究旨在觀察補陽還五湯及拆方對IRI家兔氧化指標(biāo)、心肌酶的影響，討論該方對IRI的保護機制及其配伍規(guī)律，從而為臨床用藥提供可靠的理論根據(jù)。1材料與方法1.1藥物與試劑補陽還五湯：以?醫(yī)林改錯?原方所載的藥味和配方比例，按每錢以3換算：生黃芪120，當(dāng)歸6，赤芍4.5，地龍、桃仁、紅花、川芎各3，60kg人臨床1日劑量。浸泡，煎煮，濃縮成160%的液體。補氣液：黃芪120。浸泡、煎煮，濃縮成120%的液體。活血通絡(luò)液，即補陽還五湯去黃芪。浸泡、煎煮，稀釋成30%的液體。以上藥物均購自滄州市同仁堂藥店。DA、SD、LDH、K試劑盒均購于南京建成生物制品研究所。李淑貞，等:補

3、陽還五湯及拆方預(yù)處理對IRI家兔氧化指標(biāo)及心肌酶的影響1.2實驗動物安康新西蘭大白兔40只，雌雄兼用，體重22.5kg，河北省實驗動物中心提供，動物合格證號：809093。1.3實驗方法1分組與給藥：40只家兔，自由飲水進食，飼養(yǎng)于1822明暗各12h的清潔級動物實驗室內(nèi)，喂養(yǎng)一周后，隨機分為5組，每組8只：假手術(shù)組、模型組、補陽還五湯組、補氣組、活血通絡(luò)組。實驗開場每天行相應(yīng)藥物灌胃：補陽還五湯組：16g/kgd；補氣組：12g/kgd；活血通絡(luò)組：3g/kgd；模型對照組及假手術(shù)組分別給予等量生理鹽水灌胃。各組1次/d灌胃，每次用藥體積均按10l/kg計算，連續(xù)7d。2模型制備：參照張氏方

4、法1復(fù)制家兔心肌缺血再灌注模型：末次灌胃1h后，經(jīng)外耳緣靜脈注射25%烏拉坦4l/kg麻醉動物，仰臥位固定在兔臺上，沿兔的胸部正中線切開皮膚，鈍性別離后緊靠胸骨左緣剪斷24肋軟骨，用小開胸器撐開胸腔切口，一方面加壓止血，一方面翻開手術(shù)視野，可見搏動的心臟，剪開心包，用止血鉗將左心耳提起，用持針器將小彎針在冠狀動脈前降支LAD根部離冠狀動脈起始約35穿一絲線，深度約2，盡量減少對心肌的創(chuàng)傷，穩(wěn)定15in，放置醫(yī)用硅膠管直徑2后一起結(jié)扎。持續(xù)40in后放松結(jié)扎線，恢復(fù)灌流。結(jié)扎后供血區(qū)心肌部分青紫，心電圖ST段上抬，提示缺血模型復(fù)制成功；40in后放松結(jié)扎線部分心肌反響性充血，ST段下移，說明再灌

5、注模型復(fù)制成功。假手術(shù)組胸部切開，僅在冠狀動脈下方穿線，而不進展結(jié)扎，其他操作同模型對照組。3檢測指標(biāo)及方法：a心電圖EG的描記，將針型電極插入兔四肢，全實驗過程連續(xù)觀察導(dǎo)聯(lián)心電圖的變化。b生化指標(biāo)測定實驗完畢后由頸總動脈抽取血液4l，4、3000r/in離心10in，提取上清液。用SD試劑盒、K試劑盒、DA試劑盒和LDH試劑盒，分別測定血清中相應(yīng)酶的活性或含量。步驟完全按照試劑盒說明書操作。DA采用硫代巴比妥酸法TBA測定，SD含量采用黃嘌呤氧化酶法測定。1.4統(tǒng)計學(xué)處理所有數(shù)據(jù)均用均數(shù)標(biāo)準(zhǔn)差xs表示，多組間比擬用單因素方差分析和q檢驗。全部數(shù)據(jù)采用SPSS12.0統(tǒng)計軟件分析。轉(zhuǎn)貼于論文聯(lián)

6、盟.ll.2結(jié)果2.1各組EG的變化假手術(shù)組EG在整個實驗階段較平穩(wěn)，模型組當(dāng)結(jié)扎冠狀動脈時可見ST段均有不同程度的弓背上抬，T波高尖，呈急性心肌缺血圖形，再灌注即刻ST段抬高較缺血更明顯，部分出現(xiàn)室性早搏。而各治療組在結(jié)扎冠狀動脈即刻、10in時EG的變化與模型組無明顯差異，但隨結(jié)扎時間延長及血供的恢復(fù)，上抬的ST段明顯下降，尤以補陽還五湯組最為顯著。2.2對心肌缺血再灌注兔K和LDH活性的影響與假手術(shù)組比擬，模型組家兔結(jié)扎冠狀動脈40in及再灌注90in后血清K、LDH含量明顯升高P0.01；經(jīng)藥物預(yù)處理后，各治療組血清K、LDH含量明顯下降，與模型組比擬有顯著性差異P0.01；與補陽還五

7、湯組比擬，補氣組、活血通絡(luò)組血清K、LDH含量明顯上升P0.05，活血通絡(luò)組上升幅度最大，但補氣組、活血通絡(luò)組之間比擬血清K、LDH含量無顯著性差異P0.05，見表1。表1各組兔心肌缺血再灌注后血清K和LDH活性的測定結(jié)果略與假手術(shù)組比擬，P0.01;與模型組比擬，*P0.01;與補陽還五湯比擬，P0.05表2各組兔血清DA含量、SD活性測定結(jié)果略與假手術(shù)組比擬，P0.01;與模型組比擬，*P0.01，*P0.05;與補陽還五湯比擬，P0.052.3對心肌缺血再灌注兔血清DA含量、SD活性的影響與假手術(shù)組比擬，模型組家兔結(jié)扎冠狀動脈40in及再灌注90in后血清DA含量明顯升高，SD活性明顯降

8、低P0.01；經(jīng)藥物預(yù)處理后，各治療組血清DA含量明顯下降，SD活性明顯升高，與模型對照組比擬有顯著性差異P0.01，P0.05；與補陽還五湯組比擬，補氣組、活血通絡(luò)組血清DA含量明顯上升，SD活性明顯降低P0.05，活血通絡(luò)組尤其顯著，但補氣組、活血通絡(luò)組之間比擬血清DA含量及SD活性無顯著性差異P0.05。3討論本實驗結(jié)果顯示，補陽還五湯及拆方均能使缺血再灌注損傷兔的血清K、LDH、DA含量明顯低于模型組，血清SD的活性顯著高于模型組P0.01，且補陽還五湯總方組療效優(yōu)于其拆方補氣組和活血通絡(luò)組P0.05，但補氣組、活血通絡(luò)組之間比擬無顯著差異。實驗說明，補陽還五湯及拆方可通過去除氧自由基、對抗脂質(zhì)過氧化反響來減輕心肌缺血再灌注損傷，且總方的作用明顯優(yōu)于單純益氣和活血的方法，正應(yīng)方劑學(xué)“整體取性原理2，即“藥有