1、第三章 醫(yī)藥、農(nóng)藥分析 第一節(jié) 概述 一、基本知識(shí) 醫(yī)藥是人們在日常生活中對(duì)藥物(Drug)的習(xí)慣說法，它是指用于防病、治病、診斷疾病、改善體質(zhì)、增強(qiáng)機(jī)體抵抗力并能規(guī)定有適應(yīng)癥、用法和用量的物質(zhì)。包括中藥材、中藥飲片、中成藥、化學(xué)原料及其制劑、抗生素、生化藥品、放射性藥品、血清疫苗、血液制品和診斷藥品等。藥物的研究在我國已有幾千年歷史，神農(nóng)本草經(jīng)是我國最早的一部藥學(xué)著作，該書共收載藥物365種，其中大部分藥物至今仍廣為應(yīng)用。唐代(公元659年)的新修本草收載藥物844種，是世界上第一部由政府頒布的藥典，比西方的紐倫堡藥典早883年。明代(公元1594年)李時(shí)珍的巨著本草綱目共52卷，收載藥物1

2、892種。 第一節(jié) 概述 農(nóng)藥（Pesticide）是指防治農(nóng)作物病害、蟲害、草害、鼠害和調(diào)節(jié)植物生長的藥劑。自從1942年人工合成了第一種有機(jī)農(nóng)藥2,4-滴后，人類相繼開發(fā)了大量有機(jī)農(nóng)藥品種(例如：1974年合成了俗稱滴滴涕DDT的化合物)，并且其應(yīng)用范圍不斷擴(kuò)大。農(nóng)藥的使用不僅避免了各種有害生物對(duì)農(nóng)作物的危害，而且促進(jìn)了作物的生長，提高了農(nóng)作物的質(zhì)量。 醫(yī)藥和農(nóng)藥分析主要采用的方法有：物理方法、化學(xué)方法、物理化學(xué)方法和生物化學(xué)方法等。 第一節(jié) 概述 3對(duì)貯存過程的質(zhì)量進(jìn)行監(jiān)督與控制 醫(yī)藥和農(nóng)藥分析工作應(yīng)與供應(yīng)部門密切協(xié)作，對(duì)其貯存過程的質(zhì)量進(jìn)行觀察、檢測與養(yǎng)護(hù)，以便采取科學(xué)合理的貯藏條件和

3、管理辦法，以確保其使用效果與安全。 4對(duì)使用效果進(jìn)行分析 醫(yī)藥和農(nóng)藥質(zhì)量的優(yōu)劣和使用是否合理，直接影響其使用效果，為了保證合理使用，對(duì)醫(yī)藥要進(jìn)行臨床分析，對(duì)農(nóng)藥要進(jìn)行最佳使用量、使用濃度以及殘留量進(jìn)行分析。 第一節(jié) 概述 三、質(zhì)量和質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn) 1質(zhì)量 評(píng)價(jià)醫(yī)藥和農(nóng)藥的質(zhì)量應(yīng)從以下兩方面考慮： (1)使用效果 合格的醫(yī)藥應(yīng)有肯定的療效，盡量小的毒性和副作用；醫(yī)藥療效越顯著，毒性和副作用越小，其質(zhì)量就越好。 合格的農(nóng)藥應(yīng)有明顯的使用效果，其毒性和殘留量滿足國家標(biāo)準(zhǔn)或行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)的要求；高質(zhì)量的農(nóng)藥應(yīng)具有高效低毒且不會(huì)給環(huán)境造成污染等特點(diǎn)。第一節(jié) 概述 (2)純度 純度是指純凈程度，有害雜質(zhì)及無效成分的含

4、量越低純度就越高。醫(yī)藥的純度和化學(xué)試劑的純度在要求上不同，前者主要從用藥安全、有效以及對(duì)醫(yī)藥的穩(wěn)定性的影響等方面考慮，后者是從雜質(zhì)可能引起的化學(xué)變化時(shí)對(duì)使用的影響以及試劑的使用范圍和使用目的來規(guī)定的，并不考慮雜質(zhì)對(duì)生物體的生理作用及毒副作用。醫(yī)藥只有合格品與不合格品，而一般化學(xué)試劑分為4個(gè)等級(jí)(基準(zhǔn)試劑、優(yōu)級(jí)純、分析純及化學(xué)純)。由于醫(yī)藥的純度會(huì)影響其療效和毒副作用，故必須達(dá)到一定的純度標(biāo)準(zhǔn)，才能安全有效地使用。農(nóng)藥也必達(dá)到一定的純度才能保證其使用效果。 第一節(jié) 概述 2質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn) 我國現(xiàn)行的醫(yī)藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)為國家藥品標(biāo)準(zhǔn)，其標(biāo)準(zhǔn)有： (1)中華人民共和國藥典簡稱中國藥典（Chinese PHarm

5、acopoeie簡稱CP），是由國家藥典委員會(huì)編纂，經(jīng)國家藥品監(jiān)督管理局批準(zhǔn)頒布實(shí)施的，是我國記載藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的國家法典，是對(duì)藥品質(zhì)量要求的準(zhǔn)則，具有全國的法律約束力。 (2)國家藥品監(jiān)督管理局頒布的藥品標(biāo)準(zhǔn) 簡稱局頒標(biāo)準(zhǔn)，也具有全國性的法律約束力。除國家藥品標(biāo)準(zhǔn)外，目前尚有地方標(biāo)準(zhǔn)，地方標(biāo)準(zhǔn)在轄區(qū)內(nèi)具有法律約束力。根據(jù)藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)來判斷，藥品只有合格和不合格兩種，不合格的藥品不得生產(chǎn)、不得銷售、不得使用，否則都是違法的。 第二節(jié) 醫(yī)藥中雜質(zhì)的檢驗(yàn) 一、醫(yī)藥雜質(zhì)的檢驗(yàn)方法 1對(duì)照法 對(duì)照法是指取一定量待檢雜質(zhì)的對(duì)照物質(zhì)配成對(duì)照液，另取一定量供試品配成供試品溶液，在相同條件下處理后，比較反應(yīng)結(jié)果

6、(比色或比濁)，從而判斷供試品中所含雜質(zhì)是否超過限量。使用本法檢驗(yàn)醫(yī)藥的雜質(zhì)，須遵循平行原則。供試液和對(duì)照液應(yīng)在完全相同的條件下反應(yīng)，如加入的試劑、反應(yīng)的溫度、放置的時(shí)間等均應(yīng)相同。該法的檢驗(yàn)結(jié)果，只能判定醫(yī)藥所含雜質(zhì)是否符合限量規(guī)定，一般不能測定雜質(zhì)的準(zhǔn)確含量。雜質(zhì)限量(L)可用下式計(jì)算: （3-1） 第二節(jié) 醫(yī)藥中雜質(zhì)的檢驗(yàn) 2靈敏度法 靈敏度法是指在供試品溶液中加入試劑，在一定反應(yīng)條件下，不得有下反應(yīng)出現(xiàn)，從而判斷供試品所含雜質(zhì)是否符合規(guī)定。如溴鈉中碘化物的檢驗(yàn)：取本品0.5g，加水10mL溶解后，加三氯化鈦溶液數(shù)滴與氯仿1mL，振搖，靜置分層，氯仿層不得顯紫色。本法的特點(diǎn)是，以該檢測條

7、件下的靈敏度來控制雜質(zhì)限量，不需要對(duì)照物質(zhì)。 第二節(jié) 醫(yī)藥中雜質(zhì)的檢驗(yàn) 二、一般雜質(zhì)的檢驗(yàn) 一般雜質(zhì)檢驗(yàn)應(yīng)注意以下幾點(diǎn)：遵循平行操作原則；正確取樣及供試品的稱量范圍；正確的比濁、比色以及檢驗(yàn)結(jié)果不符合規(guī)定或限度邊緣時(shí)，應(yīng)對(duì)供試品和對(duì)照品各復(fù)查兩份等。 1氯化物的檢驗(yàn) 氯化物廣泛存在于自然界中，在醫(yī)藥的生產(chǎn)過程中極易引入。少量的氯化物雖對(duì)人體無害，但它的量可以反映出醫(yī)藥的純凈程度及生產(chǎn)過程是否正常，因此，控制氯化物的量有其特殊的意義。 (1)檢驗(yàn)原理 利用氯化物在硝酸酸性條件下與硝酸銀試液作用，生成氯化銀白色渾濁，與一定量標(biāo)準(zhǔn)氯化鈉溶液在相同條件下生成的氯化銀渾濁比較，以判斷供試品中的氯化物是否

8、超過了限量。 第二節(jié) 醫(yī)藥中雜質(zhì)的檢驗(yàn) (2)儀器 納氏比色管50mL； 量筒50mL； 玻璃漏斗； 吸量管5mL。 (3)試劑 硝酸溶液10%(質(zhì)量分?jǐn)?shù))； 硝酸銀溶液0.1mol/L； 標(biāo)準(zhǔn)氯化鈉溶液每1mL含10g氯 第二節(jié) 醫(yī)藥中雜質(zhì)的檢驗(yàn) (4)檢驗(yàn)方法 準(zhǔn)確取規(guī)定量的供試品，加蒸餾水使溶解成25mL (溶液如顯堿性，可滴加硝酸使成中性)，再加稀硝酸10mL；溶液如不澄清應(yīng)過濾；置50mL納氏比色管中，加蒸餾水使成約40mL，搖均，即得供試溶液。另取標(biāo)準(zhǔn)氯化鈉溶液(每1mL含10gCl)5.00mL，置50mL納氏比色管中，加稀硝酸10mL，加蒸餾水使成約40mL，搖均得對(duì)照溶液。于

9、供試溶液及對(duì)照溶液中，分別加入硝酸銀試液1.0mL，用蒸餾水稀釋使成50mL，搖均，在暗處放置5分鐘，比濁。 第二節(jié) 醫(yī)藥中雜質(zhì)的檢驗(yàn) 2硫酸鹽的檢驗(yàn) (1)檢驗(yàn)原理 醫(yī)藥中微量的硫酸鹽在稀鹽酸酸性條件下與氯化鋇反應(yīng)，因生成硫酸鋇而出現(xiàn)白色渾濁，與一定量的標(biāo)準(zhǔn)硫酸鉀溶液在相同的條件下產(chǎn)生的硫酸鋇的白色渾濁程度比較，判定供試品中硫酸鹽是否符合限量。 (2)儀器 納氏比色管 50mL； 量筒 50mL； 玻璃漏斗； 吸量管 5mL。第二節(jié) 醫(yī)藥中雜質(zhì)的檢驗(yàn) (3)試劑 鹽酸溶液 2.5mol/L； 氯化鋇溶液 25%(質(zhì)量分?jǐn)?shù))； 標(biāo)準(zhǔn)硫酸鉀溶液 每1mL含100g硫酸根。 (4)檢驗(yàn)方法(以氯化

10、鈉中硫酸鹽檢驗(yàn)為例) 取規(guī)定量的供試品(5.0g)，加蒸餾水溶解使成約40mL (如溶液顯堿性，可滴加鹽酸使成中性)；溶液如不澄清，應(yīng)過濾；置于50mL納氏比色管中，加2mL稀鹽酸，搖勻，即得供試液。另取各藥品項(xiàng)下規(guī)定量的標(biāo)準(zhǔn)硫酸鉀溶液(1.00mL)，按照同樣的方法制成對(duì)照液，于供試液與對(duì)照液中，分別加入25%氯化鋇溶液25mL，用蒸餾水稀釋至50mL，搖勻，放置10分鐘，同置若罔聞黑色背景上，從比色管上方向下觀察、比較。 第二節(jié) 醫(yī)藥中雜質(zhì)的檢驗(yàn) 3鐵的檢驗(yàn) 醫(yī)藥中微量鐵鹽的存在會(huì)加速醫(yī)藥的氧化和降解，因此需要控制鐵鹽的限量中國藥典2000年版采用硫氰酸鹽法檢驗(yàn)。 (1)檢驗(yàn)原理 鐵鹽在鹽

11、酸酸性溶液中與硫氰酸銨生成紅色可溶性硫氰酸鐵配離子，與一定量的標(biāo)準(zhǔn)鐵溶液用同法處理后進(jìn)行比色。第二節(jié) 醫(yī)藥中雜質(zhì)的檢驗(yàn) (2)儀器 納氏比色管 50mL； 量筒 5mL； 吸量管 5mL。 (3)試劑 鹽酸溶液 2.5mol/L； 硫氰酸銨溶液 30%(質(zhì)量分?jǐn)?shù))； 標(biāo)準(zhǔn)鐵溶液 每1mL含10g鐵； 過硫酸銨。 第二節(jié) 醫(yī)藥中雜質(zhì)的檢驗(yàn) 用硫酸鐵銨FeNH4(SO4)212H2O配制標(biāo)準(zhǔn)鐵貯備液，并加入硫酸防止鐵鹽水解。標(biāo)準(zhǔn)鐵溶液為臨用前取貯備液稀釋而成，每1mL標(biāo)準(zhǔn)鐵溶液相當(dāng)于10g的Fe。本法以50mL溶液中含F(xiàn)e3+1050g為宜。測定中加入過硫酸銨可將供試品中可能存在的Fe2+ 氧化成

12、Fe3+，同時(shí)可以防止硫氰酸鐵受光照還原或分解。 第二節(jié) 醫(yī)藥中雜質(zhì)的檢驗(yàn) 4重金屬檢驗(yàn) 重金屬是指在實(shí)驗(yàn)條件下能與硫代乙酰胺或硫化鈉試液作用而顯色的金屬雜質(zhì)，如銀、鉛、汞、銅、鎘、鉍、銻、錫、鎳、鋅等。重金屬可以影響醫(yī)藥的穩(wěn)定性及安全性。醫(yī)藥生產(chǎn)過程中遇到鉛的機(jī)會(huì)較多，鉛在人體內(nèi)又易蓄積中毒，故檢驗(yàn)重金屬以鉛為代表。（實(shí)驗(yàn)條件主要指溶液的pH值） (1)檢驗(yàn)原理(硫代乙酰胺法) 硫代乙酰胺在酸性(pH為3.5醋酸鹽緩沖溶液)條件下水解，產(chǎn)生硫化氫，與微量重金屬離子(以及Pb2+為代表)生成黃色到棕黑色的硫化物均勻混懸液，與一定量標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液經(jīng)同法處理后所呈顏色比較。 第二節(jié) 醫(yī)藥中雜質(zhì)的檢驗(yàn)

13、(3)試劑 醋酸鹽緩沖溶液 pH=3.5； 硫代乙酰胺試液 取硫代乙酰胺4g，加蒸餾水使成100mL，置冰箱中保存。臨用前取混合液(由1mol/L氫氧化鈉溶液15mL+蒸餾水15mL+甘油20mL)5.0mL；加上述硫代乙酰胺溶液1.0mL,置于水浴上加熱20s，冷卻，立即使用。 標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液(每1mL含10g鉛) 準(zhǔn)確稱取硝酸鉛0.16g，置于1000mL容量瓶中，加硝酸5mL與蒸餾水50mL溶解后，用蒸餾水稀釋至刻度，搖勻，作為貯備液。臨用前準(zhǔn)確移取貯備液10.00mL，置于100mL容量瓶中，加蒸餾水稀釋至刻度，搖勻，即得。 硝酸。 第二節(jié) 醫(yī)藥中雜質(zhì)的檢驗(yàn) (4)檢驗(yàn)方法(以氯化鈉中鉛的

14、檢驗(yàn)為例) 取25mL納氏比色管兩支，甲管中加標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液一定量(1.00mL)與醋酸鹽緩沖溶液(pH=3.5)2mL后，加蒸餾水或規(guī)定的溶劑稀釋成25mL，乙管中加入試樣5.0g,加蒸餾水適量溶解后,加入醋酸鹽緩沖溶液(pH=3.5)2mL，加蒸餾水或規(guī)定的溶劑稀釋成25mL；若供試品溶液有色，可在甲管中滴加少量稀焦糖溶液或其他無干擾的有色溶液，使之與乙管顏色與致。再在甲乙兩管中分別加硫代乙酰胺試液2mL，搖勻，放置2分鐘，同置白紙上，自上向下透視，乙管中顯出的顏色與甲管比較，不得更深(0.0002%)。 用硝酸鉛配制標(biāo)準(zhǔn)鉛貯備液，并加入硝酸防止鉛鹽水解，使易于保存。配制和貯存用的玻璃容器均不

15、得含鉛。 第二節(jié) 醫(yī)藥中雜質(zhì)的檢驗(yàn) 5水分測定 (1)測定原理 碘氧化二氧化硫?yàn)槿趸驎r(shí)，需要一定量的水分參加反應(yīng)，根據(jù)反應(yīng)過程消耗碘的量，即可計(jì)算出水的含量。 本法采用的標(biāo)準(zhǔn)溶液是卡爾費(fèi)休試液，是由碘、二氧化硫、吡啶和甲醇按一定比例組成的。由于上述反應(yīng)是可逆的，為了使反應(yīng)向右進(jìn)行完全，加入無水吡啶定量地吸收HI和SO3，形成氫碘酸吡啶和硫酸酐吡啶。 第二節(jié) 醫(yī)藥中雜質(zhì)的檢驗(yàn) (2)儀器 自動(dòng)滴定管 5mL； 具塞錐形瓶 50 mL，干燥潔凈； 吸量管 5mL； 量筒 100mL。 (3)試劑 碘； 甲醇； 吡啶 卡爾費(fèi)休試液(每1mL相當(dāng)于4.0mg左右水) 取甲醇670mL于干燥帶塞的棕

16、色瓶中，加入約85g碘，塞上瓶塞，振蕩至碘全部溶解后，加270mL吡啶蓋緊瓶塞再振蕩至完全混溶。在溫度低于20條件下，通入二氧化硫70g，蓋緊瓶塞，混合均勻，放置24h后使用。 第二節(jié) 醫(yī)藥中雜質(zhì)的檢驗(yàn) (4)測定方法 卡爾費(fèi)休試液滴定度的測定 取干燥的具塞錐形瓶，精確加入蒸餾水約30mg，加入無水甲醇25mL，用卡爾費(fèi)休試液滴定至溶液由淺黃變?yōu)榧t棕色；同時(shí)作空白試驗(yàn)，按下式計(jì)算卡爾費(fèi)休試液的滴定度： 式中：T 1mL卡爾費(fèi)休試液相當(dāng)于水的質(zhì)量，mg；m蒸餾水的質(zhì)量，mg；V滴定時(shí)所消耗卡爾費(fèi)休試液的體積，mL； V0空白所消耗卡爾費(fèi)休試液的體積，mL。 第二節(jié) 醫(yī)藥中雜質(zhì)的檢驗(yàn) 試樣的測定

17、精確稱取試樣適量(約消耗卡爾費(fèi)休試液15mL)，置于干燥具塞錐形瓶中，加溶劑甲醇25mL，在不斷搖動(dòng)下用卡爾費(fèi)休試液滴定至溶液由黃變?yōu)榧t棕色即為終點(diǎn)。 同樣條件下進(jìn)行空白試驗(yàn)。 第二節(jié) 醫(yī)藥中雜質(zhì)的檢驗(yàn) (5)測定結(jié)果計(jì)算 試樣中水分含量按下式計(jì)算： （3-3） 式中：W(H2O)試樣中水的的質(zhì)量分?jǐn)?shù)，%；T 1mL卡爾費(fèi)休試液相當(dāng)于水的質(zhì)量，mg；m試樣的質(zhì)量，mg；V滴定時(shí)所消耗卡爾費(fèi)休試液的體積，mL；V0空白所消耗卡爾費(fèi)休試液的體積，mL。 卡爾費(fèi)休法不適用于氧化劑、還原劑以及能與試液反應(yīng)生成水的化合物的測定。 第二節(jié) 醫(yī)藥中雜質(zhì)的檢驗(yàn) 例 注射用青霉素鈉水分測定 精確稱取本品0.75

18、40g，置于干燥的具塞錐形瓶中，加無水甲醇5mL充分振搖后，用卡爾費(fèi)休試液滴定至溶液由淺黃色變?yōu)榧t棕色，消耗卡爾費(fèi)休試液2.15 mL；另取無水甲醇5mL，同法測定，消耗卡爾費(fèi)休試液0.15mL，求青霉素鈉的含水量(已知1mL卡爾費(fèi)休試液相當(dāng)于3.52mg的水)。 解：青霉素鈉的含水量為： 第二節(jié) 醫(yī)藥中雜質(zhì)的檢驗(yàn) 5酸堿度檢驗(yàn) 純凈醫(yī)藥的溶液或過飽和混懸液，其pH值應(yīng)較為恒定，乾進(jìn)行酸堿度檢驗(yàn)是保證醫(yī)藥質(zhì)量的措施之一。中國藥典2000年版用酸度、堿度、酸堿度和pH值來控制醫(yī)藥中的酸堿性雜質(zhì)。檢驗(yàn)時(shí)采用堿液進(jìn)行滴定或規(guī)定的 “酸度”；采用酸液進(jìn)行滴定或規(guī)定的pH大于7.0的稱為“堿度”；檢驗(yàn)時(shí)

19、先后用酸液和堿液分別進(jìn)行滴定或規(guī)定的pH范圍包括7.0上下兩側(cè)的稱為“酸堿度”。液體醫(yī)藥的酸堿度以pH值表示。 檢驗(yàn)時(shí)一般以新沸放冷的蒸餾水為溶劑，不溶于水的醫(yī)藥可以用中性乙醇等有機(jī)溶劑溶解。醫(yī)藥的酸堿度檢驗(yàn)常采用以下三種方法： 第二節(jié) 醫(yī)藥中雜質(zhì)的檢驗(yàn) (1)酸堿滴定法 在規(guī)定的指示劑條件下，用規(guī)定濃度的酸或堿滴定液滴定供試品溶液中堿性或酸性雜質(zhì)，以消耗酸或堿滴定液的毫升數(shù)作為限度指示。如檢驗(yàn)氯化鈉的酸堿度：取本品5.0g，加蒸餾水50mL溶解后，加溴麝香草酚藍(lán)指示劑2滴，如顯黃色(示為酸性)，加氫氧化鈉滴定液(0.02mol/L)0.10mL，應(yīng)變?yōu)樗{(lán)色；如顯藍(lán)色或綠色(示為堿發(fā)生)，加鹽

20、酸滴定液(0.02mol/L) 0.20mL，應(yīng)變?yōu)辄S色。以上操作方法，將氯化鈉中所含酸性雜質(zhì)的限量控制在0.002mmol,即在100g氯化鈉中允許存在的酸性雜質(zhì)的限量為0.04mmol；同理，每100g氯化鈉允許堿性雜質(zhì)的限量為0.08mmol。 第二節(jié) 醫(yī)藥中雜質(zhì)的檢驗(yàn) (2)指示劑法 此法是利用規(guī)定的指示劑的變色pH范圍控制供試液中酸堿性雜質(zhì)限量。如純水的酸堿度檢驗(yàn)：取本品10mL，加甲基紅指示劑2滴，不得顯紅色(以控制其酸度)；另取10mL，加溴麝香草酚藍(lán)指示劑5滴，不得顯藍(lán)色(以控制其堿度)，即純水的酸堿度控制在pH為4.27.6。 (3) pH測定法 該法采用酸度計(jì)測定供試液的p

21、H值，檢驗(yàn)其酸堿性雜質(zhì)是否符合限量規(guī)定，用酸度計(jì)直接測定溶液的pH值，準(zhǔn)確度高。因此，對(duì)于酸堿度要求嚴(yán)格的注射液、供配制注射劑用的原料藥以及酸堿度會(huì)影響其穩(wěn)定性的醫(yī)藥，大多采用本法檢驗(yàn)酸堿度。 第三節(jié) 醫(yī)藥的鑒別 一、巴比妥類醫(yī)藥的鑒別 1鑒別原理 巴比妥類醫(yī)藥在碳酸水溶液中形成鈉鹽而溶解，再與硝酸銀作用，首先生成可溶性的一銀鹽，繼而生成不溶性的二銀鹽白色沉淀，沉淀能溶于氨水中。 第三節(jié) 醫(yī)藥的鑒別 2鑒別方法 稱取樣品約0.1g，加入12%(質(zhì)量分?jǐn)?shù))碳酸鈉試液1mL與水10mL，振搖2分鐘，過濾，濾液中逐滴加入0.1mol/L硝酸銀試液，即生成白色沉淀，振搖沉淀即溶解；繼續(xù)滴加過量的硝酸銀

22、試液，沉淀不再溶解。 第三節(jié) 醫(yī)藥的鑒別 二、芳酸類醫(yī)藥的鑒別 1鑒別原理(以阿司匹林的鑒別為例) 水楊酸及其鹽，在中性或弱酸性溶液中(pH值為46)，與三氯化鐵試液反應(yīng)，生成紫堇色鐵配合物，在強(qiáng)酸溶液中配位化合物分解。 第三節(jié) 醫(yī)藥的鑒別 2鑒別方法 稱取阿司匹林試樣約0.1g，加入蒸餾水10mL，煮沸，冷卻至室溫后，滴加0.1mol/L三氯化鐵試液1滴，即顯紫堇色。 第三節(jié) 醫(yī)藥的鑒別 三、芳胺類醫(yī)藥的鑒別 1鑒別原理(以鹽權(quán)丁卡因的鑒別為例) 鹽酸丁卡因溶于醋酸鈉溶液后，加硫氰酸銨溶液，即析出結(jié)晶性魄白色沉淀。此沉淀經(jīng)過濾洗滌，干燥后，測定熔點(diǎn)約為131。 第三節(jié) 醫(yī)藥的鑒別 2鑒別方法

23、 稱取鹽酸丁卡因試樣約0.1g，加入5%(質(zhì)量分?jǐn)?shù))醋酸鈉溶液10mL溶解后，加25%(質(zhì)量分?jǐn)?shù))硫氰酸銨溶液1mL，即析出白色結(jié)晶，過濾，結(jié)晶用蒸餾水洗滌，在80干燥后，測定熔點(diǎn)，熔點(diǎn)約為131。 第三節(jié) 醫(yī)藥的鑒別 四、磺胺類醫(yī)藥的鑒別 1鑒別原理 磺胺類醫(yī)藥磺酰胺基上的氫原子可被金屬離子(銀、銅、鈷)取代，并生成不同顏色的難溶性的金屬鹽沉淀。其中與硫酸銅的反應(yīng)常用于本類醫(yī)藥的鑒別。如磺胺甲口惡唑的鑒別。 第三節(jié) 醫(yī)藥的鑒別 2鑒別方法 稱取磺胺甲口惡唑試樣約0.1g，加入蒸餾水與0.4%(質(zhì)量分?jǐn)?shù))氫氧化鈉溶液各1mL，振搖搖使溶解，過濾，取濾液，加12%(質(zhì)量分?jǐn)?shù))硫酸銅試液1滴，即生

24、成草綠色沉淀。 第三節(jié) 醫(yī)藥的鑒別 五、雜環(huán)類醫(yī)藥的鑒別 1鑒別原理(以異煙肼鑒別為例) 異煙肼分子中的酰肼基具有還原性可與托侖試劑反應(yīng)生成異煙肼酸和單質(zhì)銀沉淀，肼基則被氧化為氮化。 第三節(jié) 醫(yī)藥的鑒別 2鑒別方法 稱取異煙肼試樣約10mg，置試管中，加入蒸餾水2mL溶解后，加入1mL托侖試劑(取硝酸銀1g，加入20mL蒸餾水溶解后，滴加氨水，至生成的沉淀全部溶解，即得)，即產(chǎn)生氣泡與黑色混濁，并在試管壁上生成銀鏡。 第三節(jié) 醫(yī)藥的鑒別 六、生物堿的鑒別 1鑒別原理(以黃嘌呤生物堿的鑒別為例) 黃嘌呤生物堿(如咖啡因、茶堿等)在鹽酸酸性介質(zhì)中與氯酸鉀反應(yīng)，在水浴上共熱蒸干后，殘?jiān)霭睔饧瓷勺?/p>

25、色的四甲基紫脲酸銨，再加氫氧化鈉溶液紫色即消失。如咖啡因的鑒別。 2鑒別方法 稱取咖啡因試樣約10mg，加入1mol/L鹽酸1mL與0.1g氯酸鉀，置于水浴上加熱蒸干，遺留的淺紅色的殘?jiān)?，遇氨氣即變?yōu)樽仙?；再?%氫氧化鈉溶液數(shù)滴，紫色即消失。 第三節(jié) 醫(yī)藥的鑒別 七、維生素類醫(yī)藥的鑒別 1鑒別原理(以維生素C的鑒別為例) 維生素C分子中有烯二醇的結(jié)構(gòu)，具有極強(qiáng)的還原性，可被硝酸銀氧化為去氫維生素C，同時(shí)產(chǎn)生黑色的銀沉淀。 2鑒別方法 稱取維生素C試樣約0.2g，加入蒸餾水10mL 溶解后，再加入0.1mol/L 硝酸銀試液0.5mL，即生成銀的黑色沉淀。 第三節(jié) 醫(yī)藥的鑒別 八、-內(nèi)酰胺類抗

26、生素醫(yī)藥的鑒別 1鑒別原理 -內(nèi)酰胺類抗生素包括青霉素類和頭孢菌素類，它們的化合物遇硫酸在冷時(shí)和加熱時(shí)都無變化，而遇硫酸-甲醛試劑有較顯著的顏色變化，可供鑒別。 2鑒別方法 稱取試樣約20mg置于試管中，用1滴蒸餾水潤濕，加入2mL硫酸-甲醛試液(體積比為：50+1)，搖勻，觀察溶液顏色變化。將試管浸入沸水浴中1分鐘，再觀察溶液變化。 第三節(jié) 醫(yī)藥的鑒別 第三節(jié) 醫(yī)藥的鑒別 九、甾體激素類醫(yī)藥的鑒別 1鑒別原理： 甾體激素類醫(yī)中有許多能夠與濃硫酸發(fā)生反應(yīng)而呈現(xiàn)一定的顏色，用水稀釋后，顏色會(huì)發(fā)生相應(yīng)的變化，利用這些顏色的變化可對(duì)甾體激素類醫(yī)藥進(jìn)行鑒別。 2鑒別方法 稱取試樣約0.2g置于試管中，

27、用1滴蒸餾水潤濕，加入2mL濃硫酸，搖勻，觀察溶液顏色；向試管中加入10mL蒸餾水稀釋后，再觀察溶液變化。 第三節(jié) 醫(yī)藥的鑒別 第三節(jié) 醫(yī)藥的鑒別 十、糖類醫(yī)藥的鑒別 1鑒別原理 單糖或含有半縮醛基的雙糖分子中均有醛基或酮基，具有還原性，可將斐林 (即堿性酒石酸銅)試劑中銅離子還原，生成紅色的氧化亞銅沉淀，利用這一性質(zhì)可鑒別糖類醫(yī)藥。 第三節(jié) 醫(yī)藥的鑒別 2鑒別方法 (1)葡萄糖的鑒別：稱取葡萄糖試樣約0.2g，加入5mL蒸餾水溶解后，緩慢加入溫?zé)岬膲A性酒石酸銅試劑(斐林試劑)中，即生成紅色氧化銅沉淀。 (2)蔗糖的鑒別：稱取約0.5g蔗糖試樣，加入0.05mol/L硫酸溶液5mL，煮沸后，用

28、0.1mol/L氫氧化鈉溶液中和，再加入堿性酒石酸銅試劑，加熱，即生成紅色氧化銅沉淀。 第三節(jié) 醫(yī)藥的鑒別 十一、醇類醫(yī)藥的鑒別 1鑒別原理 碳原子數(shù)在10以下的醇類化合物能與硝酸鈰銨試劑反應(yīng)，生成紅色配位化合物，利用這一性質(zhì)可鑒別醇類醫(yī)藥。(碳原子數(shù)在10以下的一元醇、多元醇及糖類都能呈正性性結(jié)果) 2鑒別方法 量取醇類試樣約1mL置于小試管中，向其中滴加幾滴0.1mol/L硝酸鈰的硝酸溶液，即生成紅色的配合物。 第三節(jié) 醫(yī)藥的鑒別 十二、酚類醫(yī)藥的鑒別 1鑒別原理 一元酚類化合物(如苯酚)，能與三氯化鐵試液反應(yīng)，生成有色的配位化合物，利用這一特殊性質(zhì)，可對(duì)一元酚類醫(yī)藥進(jìn)行鑒別。 2鑒別方法

29、(以苯酚的的鑒別為例) 稱取苯酚試樣約0.1g，加入10mL蒸餾水溶解，然后取出5mL溶液，加入三氯化鐵試液1滴，即顯藍(lán)紫色。 第三節(jié) 醫(yī)藥的鑒別 十三、醚類醫(yī)藥的鑒別 1鑒別原理(以鹽酸苯海拉明的鑒別為例) 鹽酸苯海拉明在酸性條件下易水解，生成難溶于水的二苯甲醇，在加熱的條件下，二苯甲醇則呈油狀物，冷卻后凝固成白色蠟狀固體。 第三節(jié) 醫(yī)藥的鑒別 2鑒別方法 稱取鹽酸苯海拉明試樣30mg，加入1mL蒸餾水溶解后，再加入1mol/L硫酸溶液1mL，即出現(xiàn)白色乳濁；加熱煮沸數(shù)分分鐘，析出油狀物，冷卻至室溫，凝固成白色蠟狀固體。 第三節(jié) 醫(yī)藥的鑒別 十四、醛類醫(yī)藥的鑒別 1鑒別原理(以烏洛托品的鑒別

30、為例) 烏洛托品是甲醛與氨的縮合物，在酸中能分解產(chǎn)生甲醛和氨氣；利用甲醛的還原性與托侖試劑(硝酸銀氨溶液)發(fā)生銀鏡反應(yīng)，氨氣遇濕潤的紅色石蕊試紙變色反應(yīng)，可加以鑒別。 第三節(jié) 醫(yī)藥的鑒別 2鑒別方法 稱取烏洛托品試樣約0.1g，加入1mol/L硫酸溶液5mL溶解后，加熱，產(chǎn)生甲醛特殊臭味，能使硝酸銀氨試紙顯黑色；再加入過量的氫氧化鈉溶液，產(chǎn)生氨氣的刺激性氣味，能使?jié)駶櫟氖镌嚰堊優(yōu)樗{(lán)色。 第三節(jié) 醫(yī)藥的鑒別 十五、酮類醫(yī)藥的鑒別 1鑒別原理(以月桂艸卓 酮的的鑒別為例) 月桂 酮與鹽酸羥胺反應(yīng)生成異羥肟酸，異羥肟酸可以與三氯化鐵發(fā)生反應(yīng)，生成棕紫色的異羥肟酸鐵，利用這一性質(zhì)可以鑒別月桂 酮。

31、第三節(jié) 醫(yī)藥的鑒別 2鑒別方法 量取月桂 酮約2mL，加入2mL甲醇，加入1mol/L鹽酸羥胺溶液(臨用新配)1mL，再加氫氧化鉀1小粒，置于水浴上加熱23分鐘，然后冷卻至室溫，再滴加三氯化鐵試液(9g三氯化鐵，加蒸餾水溶解成100mL溶液)1滴，溶液顯棕紫色。 第四節(jié) 醫(yī)藥有效分含量的測定 一、巴比妥類醫(yī)藥的測定 巴比妥類醫(yī)藥是一類常見的鎮(zhèn)靜、催眠藥，有抑制中樞神經(jīng)的作用。常用的有巴比妥、苯巴比妥、異戊巴比妥、司可巴比妥等以及它們的鈉鹽。本類醫(yī)藥在使用過程中，因誤服過量或有意過量服用而引起中毒者較為常見。 1測定原理(酸量法) 巴比妥類醫(yī)藥呈弱酸性，可視為一元酸，以麝香草酚酞為指示劑，用氫氧

32、化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定，同時(shí)作空白試驗(yàn)，根據(jù)氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液的消耗量，可計(jì)算出巴比妥類醫(yī)藥含量。 第四節(jié) 醫(yī)藥有效分含量的測定 2儀器 (1)滴定裝置； (2)錐形瓶 250mL； 3試劑 (1)氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 0.1mol/L； (2)乙醇； (3)麝香草酚酞指示劑。 第四節(jié) 醫(yī)藥有效分含量的測定 4測定方法(以異戊巴比妥為例) 準(zhǔn)確稱取異戊巴比妥(C11H18N2O3)試樣約0.5g(準(zhǔn)確至0.2mg)，加乙醇20mL溶解后，加麝香草酚酞指示劑6滴，用0.1mol/L的氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液滴定至淡藍(lán)色。同樣條件下進(jìn)行空白試驗(yàn)。 異戊巴比妥結(jié)構(gòu)式為： 第四節(jié) 醫(yī)藥有效分含量的測定 5測定結(jié)果

33、計(jì)算 （3-4） 式中：W(異戊巴比妥）試樣中異戊巴比妥的質(zhì)量分?jǐn)?shù)，%；c氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液的濃度，mol/L；V試樣測定消耗氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液的體積，mL；V0空白測定消耗氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液的體積，mL；m試樣質(zhì)量，g；M異戊巴比妥的摩爾質(zhì)量，g/mol。第四節(jié) 醫(yī)藥有效分含量的測定 二、芳酸類醫(yī)藥的測定 1測定原理(水解后剩余堿滴定法) 阿司匹林與定量過量的氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液在加熱條件下水解，水解反應(yīng)完成后，剩余堿以酸標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定，同時(shí)作空白試驗(yàn)，根據(jù)堿標(biāo)準(zhǔn)溶液和酸標(biāo)準(zhǔn)溶液的量可計(jì)算出阿司匹林的含量。 第四節(jié) 醫(yī)藥有效分含量的測定 2儀器 (1)滴定裝置； (2)錐形瓶 250mL；

34、(3)研缽； (4)恒溫水浴。 3試劑 (1)氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 0.1mol/L； (2)硫酸標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 0.05mol/L； (3)酚酞指示劑 (4)中性乙醇 第四節(jié) 醫(yī)藥有效分含量的測定 4測定方法 (1)中和 準(zhǔn)確稱取約0.3g(準(zhǔn)確至0.2mg)阿司匹林(C9H8O4)片劑細(xì)粉，置于250mL錐形瓶中，加適量(20mL)中性乙醇，振搖使阿司匹林溶解，加3滴酚酞指示劑，用0.1mol/L氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液迅速滴定至粉紅色，即將可能存在的游離酸全部中和。阿司匹林同時(shí)轉(zhuǎn)變成鈉鹽。消耗的氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)滴定液的體積可以不計(jì)。其反應(yīng)式為： 第四節(jié) 醫(yī)藥有效分含量的測定 (2)水解 在上述中和

35、后的溶液中，準(zhǔn)確加入過量的氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液(40.00mL)，置水浴上加熱15min并時(shí)時(shí)振搖，使乙酸羥基酯水解。迅速冷至室溫，再用0.05mol/L硫酸標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液滴定剩余的堿。 (3)同樣條件下進(jìn)行空白試驗(yàn) 第四節(jié) 醫(yī)藥有效分含量的測定 5測定結(jié)果計(jì)算 （3-5） 式中：W(異戊巴比妥）試樣中阿斯匹林的質(zhì)量分?jǐn)?shù)，%；c1氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液的濃度，mol/L；V1氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液的體積，mL；c2硫酸標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液的濃度，mol/L；V2硫酸標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液的體積，mL；m試樣的質(zhì)量，g； M阿斯匹林的摩爾質(zhì)量，g/mol。 第四節(jié) 醫(yī)藥有效分含量的測定 三、胺類醫(yī)藥的測定 可根據(jù)其官能

36、團(tuán)的特殊性質(zhì)進(jìn)行測定。以鹽酸丁卡因的含量測定為例。 1測定原理 鹽酸丁卡因是有機(jī)弱堿的鹽酸鹽，分子結(jié)構(gòu)中有脂烴胺側(cè)鏈N(CH3)2，具有弱堿性，可用非水滴定法測定其含量。滴定時(shí)，以結(jié)晶紫為指示劑，用高氯酸標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液進(jìn)行滴定，滴定到溶液變藍(lán)色為終點(diǎn)，根據(jù)高氯酸標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液的用量，可以計(jì)算出鹽酸丁卡因含量。 第四節(jié) 醫(yī)藥有效分含量的測定 2儀器 (1)滴定裝置； (2)錐形瓶 250mL； (3)恒溫水?。?(4)量筒 25mL； 3試劑 (1)冰醋酸； (2)醋酸酐； (3)醋酸汞試液 15%醋酸汞的冰醋酸溶液； (4)結(jié)晶紫指示劑。 (5)高氯酸標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 0.1mol/L； 第四節(jié) 醫(yī)藥

37、有效分含量的測定 4測定方法 準(zhǔn)確稱取鹽酸丁卡因(C15H24N2O2HCl) 試樣約0.2g(準(zhǔn)確至0.2mg)，置于250mL錐形瓶中，加冰醋酸25mL與醋酸酐5mL溶解后，加熱回流2分鐘，冷至室溫，加醋酸汞試液5mL與結(jié)晶紫指示液1滴，用0.1mol/L的高氯酸標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液滴定至溶液顯藍(lán)色為終點(diǎn)。同樣條件下進(jìn)行空白試驗(yàn)。 第四節(jié) 醫(yī)藥有效分含量的測定 5測定結(jié)果計(jì)算 （3-6） 式中：W(鹽酸丁卡因）試樣中鹽酸丁卡因的質(zhì)量分?jǐn)?shù)，%；c高氯酸標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液的濃度，mol/L；V試樣測定消耗高氯酸標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液的體積，mL；V0空白消耗高氯酸標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液的體積，mL；m試樣的質(zhì)量，g； M鹽酸丁

38、卡因的摩爾質(zhì)量，g/mol。 第四節(jié) 醫(yī)藥有效分含量的測定 6注意事項(xiàng) (1)為增強(qiáng)丁卡因的堿性，在冰醋酸中加入適量醋酸酐。國為醋酸酐解離產(chǎn)生的醋酸酐合乙酰陽離子比醋酸合質(zhì)子的酸性還強(qiáng)，使滴定突躍敏銳。 (2)加醋酸汞溶液消除氫氯酸干擾。因品為鹽酸鹽，用高氯酸標(biāo)準(zhǔn)滴定液滴定時(shí)有氫氯酸生成，所以在滴前加入醋酸汞溶液，生成難解離的氯化汞，消除了氫氯酸的干擾。第四節(jié) 醫(yī)藥有效分含量的測定 四、磺胺類醫(yī)藥的測定 磺胺類醫(yī)藥是對(duì)氨基苯磺酰胺的衍生物，是一類用于治療細(xì)菌性感染的化學(xué)合成藥物。應(yīng)用較廣泛的磺胺類藥物有：磺胺甲口惡唑、磺胺嘧啶、磺胺異口惡唑和磺胺醋酰鈉?；前奉愥t(yī)藥的基本結(jié)構(gòu)為： 通常規(guī)定磺酰胺

39、上的氮為N1，芳胺基上的氮為N4，因?yàn)镹1或N4上取代基的不同形成不同的磺胺藥物。在此以N1取代的衍生物為例進(jìn)行測定。 第四節(jié) 醫(yī)藥有效分含量的測定 1測定原理(亞硝酸鈉滴定法) 分子結(jié)構(gòu)中具有芳伯胺或經(jīng)水解后具有芳伯胺的磺胺類藥物，在鹽酸酸性介質(zhì)中可與亞硝酸鈉發(fā)生重氮化反應(yīng)，重氮化反應(yīng)完成后，可用永停法指示終點(diǎn)。根據(jù)亞硝酸鈉標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液消耗量計(jì)算出磺胺類藥物的含量。 第四節(jié) 醫(yī)藥有效分含量的測定 2儀器 (1)永停測定終點(diǎn)裝置； (2)磁力攪拌器； (3)滴定裝置； (4)燒杯 100mL； (5)量筒 50mL。 3試劑 (1)鹽酸溶液 6mol/L； (2)亞硝酸鈉標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 0.1m

40、ol/L 第四節(jié) 醫(yī)藥有效分含量的測定 4測定方法(以磺胺甲口惡唑?yàn)槔? 準(zhǔn)確稱取磺胺甲口惡唑(C10H11N3O3S)試樣約0.5g(準(zhǔn)確至0.2mg)，置于100mL燒杯中，加入6mol/L鹽酸溶液25mL溶解后，再加蒸餾水25mL，按照永停法，用0.1mol/L的亞硝酸鈉標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液進(jìn)行滴定至終點(diǎn)。 第四節(jié) 醫(yī)藥有效分含量的測定 5測定結(jié)果計(jì)算 （3-7） 式中：W(磺胺甲惡唑）試樣中磺胺甲口惡唑的含量，%；c亞硝酸鈉標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液的濃度，mol/L；V亞硝酸鈉標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液的體積，mL；v試樣的質(zhì)量，g； M磺胺甲口惡唑的摩爾質(zhì)量，g/mol。 第四節(jié) 醫(yī)藥有效分含量的測定 五、雜環(huán)類醫(yī)藥

41、的測定 異煙肼用于含量測定的主要官能團(tuán)與性質(zhì)是吡啶環(huán)的堿性和酰肼基的還原性以及與某些試劑縮合呈色的性質(zhì)。測定常用的方法有溴酸鉀法、溴量法、碘量法紫外分光光度法、非水溶液滴定法和比色法等，現(xiàn)僅介紹溴酸鉀法。 1測定原理(溴酸鉀法) 異煙肼在強(qiáng)酸性介質(zhì)中可被溴酸鉀氧化為異煙酸和氮?dú)?，溴甲烷酸鉀被還原為溴化鉀。終點(diǎn)時(shí)微量過量的溴酸鉀可將甲基橙指示劑氧化，使粉紅色消失而指示終點(diǎn)。根據(jù)溴酸鉀標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液的消耗量可以計(jì)算出異煙肼的含量。 第四節(jié) 醫(yī)藥有效分含量的測定 2儀器 (1)恒溫水浴 (2)測定裝置 (3)容量瓶 100mL； (4)移液管 25mL (5)錐形瓶 250mL 3試劑 (1)鹽酸溶液

42、 0.1mol/L； (2)溴酸鉀標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 0.01667mol/L； (3)甲基橙指示劑 第四節(jié) 醫(yī)藥有效分含量的測定 4測定方法 準(zhǔn)確稱取異煙肼(C6H7N3O) 試樣約0.2g(準(zhǔn)確至0.2mg)，置于100.00 mL容量瓶中，加蒸餾水溶解并稀釋至刻度，搖均；準(zhǔn)確移取25.00mL，置于250 mL錐形瓶中，加蒸餾水50mL，加0.1mol/L鹽酸溶液20mL與1滴甲基橙指示劑，溫度保持在1825，用0.01667mol/L溴酸鉀標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液緩緩滴定至粉紅色消失。 第四節(jié) 醫(yī)藥有效分含量的測定 5測定結(jié)果計(jì)算 （3-8） 式中：W(異煙肼）試樣中異煙肼的含量，%；c溴酸鉀標(biāo)準(zhǔn)滴定溶

43、液的濃度，mol/L；V溴酸鉀標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液的體積，mL；m試樣的質(zhì)量，g； M異煙肼的摩爾質(zhì)量，g/mol。 第四節(jié) 醫(yī)藥有效分含量的測定 六、生物堿類醫(yī)藥的測定 生物堿是一類含氮的有機(jī)化合物，絕大多數(shù)存在于植物體內(nèi)，大部分顯堿性，故稱生物堿。 生物堿類醫(yī)藥含量測定的方法很多，主要是利用其整個(gè)分子的堿性，根據(jù)堿性的強(qiáng)弱的不同以及存在形式的溶解性而選用非水溶液滴定法、提取酸堿滴定法、酸性染料比色法、置換酸堿滴定法、紫外分光光度法等；也可利用分子中所含的氮原子，采用凱氏定氮法測定；近年來高效液相色譜法在生物堿含量測定中應(yīng)用日趨廣泛。在此以非水滴定法測定咖啡因含量為例來介紹生物堿的測定方法。 第四節(jié)

44、 醫(yī)藥有效分含量的測定 1測定原理 采用非水滴定法測定生物堿類醫(yī)藥時(shí)，除少數(shù)醫(yī)藥以游離生物堿的形式存在外，絕大多數(shù)為鹽類。生物堿鹽類可與高氯酸標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液發(fā)生定量反應(yīng)，反應(yīng)完成后，微量過量的高氯酸標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液可使結(jié)晶紫變色，指示滴定終點(diǎn)。根據(jù)高氯酸標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液的消耗量可計(jì)算出生物堿的含量。 式中BH+A-表示生物堿鹽類，HA表示被置出的弱酸。第四節(jié) 醫(yī)藥有效分含量的測定 2儀器 (1)滴定裝置； (2)錐形瓶 250mL； (3)電爐； (4)量筒 25mL； 3試劑 (1)醋酸酐； (2)冰醋酸； (3)高氯酸鉀標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 0.1mol/L； (4)結(jié)晶紫指示劑。 第四節(jié) 醫(yī)藥有效分含量的

45、測定 4測定方法(以咖啡因測定為例) 準(zhǔn)確稱取咖啡因(C8H10N4O2)試樣約0.15g(準(zhǔn)確至0.2mg)，置于250mL的錐形瓶中，加醋酸酐-冰醋酸(5:1)的混合液25mL，微熱使其溶解，冷至室溫，滴加結(jié)晶紫指示劑1滴，用0.1mol/L的高氯酸鉀標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液滴定至溶液顯黃色。同樣條件下進(jìn)行空白試驗(yàn)。(每1mL高氯酸標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液相當(dāng)于19.42mg的C8H10N4O2) 第四節(jié) 醫(yī)藥有效分含量的測定 5測定結(jié)果計(jì)算 （3-9） 式中：W(咖啡因）試樣中咖啡因的含量，%； c高氯酸鉀標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液的濃度，mol/L；V試樣測定消耗高氯酸鉀標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液的體積，mL；V0空白消測定耗高氯酸鉀標(biāo)

46、準(zhǔn)滴定溶液的體積，mL；m試樣的質(zhì)量，g； M咖啡因的摩爾質(zhì)量，g/mol。 第四節(jié) 醫(yī)藥有效分含量的測定 七、維生素類醫(yī)藥的測定 維生素是維持人體正常代謝功能所必需的生物活性物質(zhì)，一旦缺乏或吸收過量，都將破壞其在體內(nèi)的有效平衡，引起機(jī)體的病理變化。維生素多為醇、酯、醛、胺或酸類等有機(jī)化合物，各自具有不同的理化性質(zhì)和生理作用。根據(jù)維生素在油脂中和水中的溶解度不同可分為脂溶性和水溶性兩大類。其中屬于脂溶性的有維生素A、D、E和K等；水溶性的有維生素B族、煙酸、泛酸、葉酸及維生素C等。在此僅介紹碘量法測定維生素C(抗壞血酸)含量的方法。 第四節(jié) 醫(yī)藥有效分含量的測定 1測定原理 在醋酸(硫酸)酸性

47、介質(zhì)中，維生素C(抗壞血酸)與碘標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液發(fā)生定量反應(yīng)，反應(yīng)完成后，微量過量的碘標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液使淀粉指示劑顯藍(lán)色，指示終點(diǎn)。根據(jù)碘標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液的消耗量可計(jì)算出維生素C(抗壞血酸)的含量。 第四節(jié) 醫(yī)藥有效分含量的測定 2儀器 (1)滴定裝置； (2)電爐； (3)量筒50mL； (4)碘量瓶250mL； (5)燒杯250mL； 3試劑 (1)醋酸溶液1mol/L； (2)碘化鉀溶液1mol/L； (3)碘酸鉀溶液0.0167mol/L； (4)淀粉指示劑。 第四節(jié) 醫(yī)藥有效分含量的測定 4測定方法 準(zhǔn)確稱取維生素C(C6H8O6)試樣約0.2g(準(zhǔn)確至0.2mg)，加入新煮沸并冷卻至室溫的純水

48、100mL與稀醋酸溶液10mL使其溶解，加入淀粉指示劑1mL，立即用0.1mol/L的碘標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液滴定，至溶液變藍(lán)色，在30秒鐘內(nèi)不褪色。(每1mL0.1mol/L的碘標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液相當(dāng)于8.806mg的維生素C) 第四節(jié) 醫(yī)藥有效分含量的測定 5測定結(jié)果計(jì)算 （3-10） 式中：W(維生素C)試樣維生素C的含量，%；C碘標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液的濃度，mol/L；V碘標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液的體積，mL；M試樣的質(zhì)量，g； M維生素C的摩爾質(zhì)量，g/mol。 第四節(jié) 醫(yī)藥有效分含量的測定 八、抗生素類醫(yī)藥的測定 抗生素是一類防治疾病的的重要醫(yī)藥，臨床應(yīng)用的抗生素主要由生物合成，經(jīng)過發(fā)酵和提純制得。由于生物合成的生產(chǎn)

49、技術(shù)比較復(fù)雜，不易控制，因此異物污染的可能性較大，雖經(jīng)過精制提純，成品中仍不可避免含有雜質(zhì)。又由于多數(shù)抗生素的性質(zhì)不穩(wěn)定，其分解產(chǎn)物常使療效降低或失效，有時(shí)甚至引起毒副作用。抗生素類醫(yī)藥含量測定是常規(guī)檢驗(yàn)項(xiàng)目之一，它可以確定有效成分的含量。目前各國藥典收載的抗生素中，除青霉素、頭孢菌素、氯霉素、四環(huán)素、灰黃霉素等采用化學(xué)法測定外，多數(shù)還是采用微生物檢定法。在此以碘量法測定青霉素的含量為例介紹抗生素的化學(xué)測定方法。 第四節(jié) 醫(yī)藥有效分含量的測定 1測定原理 青霉素類藥物在堿性條件下定量水解，生成青霉素噻唑二鈉；青霉素噻唑二鈉在酸性條件下可以被碘氧化，根據(jù)碘的消耗量，可以計(jì)算出青霉素類藥物的含量。

50、（青霉素噻唑二鈉在酸性條件下與碘的氧化還原反應(yīng)受溫度、pH值、時(shí)間等因素影響，因此在實(shí)驗(yàn)過程中必須嚴(yán)格控制反應(yīng)條件，同時(shí)采用與青霉素標(biāo)準(zhǔn)品平行對(duì)照測定，以消除可變因素的影響）。 第四節(jié) 醫(yī)藥有效分含量的測定 第四節(jié) 醫(yī)藥有效分含量的測定 2儀器 (1)滴定裝置； (2)移液管 5mL，15mL； (3)碘量瓶 250mL； (4)容量瓶 100mL 3試劑 (1)氫氧化鈉溶液 1mol/L； (2)鹽酸溶液 1mol/L； (3)醋酸-醋酸鈉緩沖溶液 pH=4.5 ； (4)碘標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 0.01mol/L； (5)硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 0.01mol/L； (6)淀粉指示劑 ； 第四節(jié)

51、醫(yī)藥有效分含量的測定 4測定方法(以普魯卡因青霉素的測定為例) 準(zhǔn)確稱取青霉素試樣(C13H20N2O2C16H18N2O4SH2O：注射用普魯卡因青霉素，其分子量為588.72)0.12g(準(zhǔn)確至0.2mg)，置于100mL容量瓶中，加純水溶解并稀釋至刻度，搖均，即得供試液。準(zhǔn)確移取供試液5.00mL ,置于碘量瓶中，加入1mol/L氫氧化鈉溶液1mL，放置20分鐘，再加入1mol/L鹽酸溶液1mL與醋酸-醋酸鈉緩沖溶液(pH=4.5) 5mL，準(zhǔn)確移取碘標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液(0.01mol/L)15.00mL，塞緊瓶塞并搖均，在2025暗處放置20分鐘，然后用硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 (0.01mo

52、l/L)滴定，至近終點(diǎn)時(shí)加1mL淀粉指示液，繼續(xù)滴定并強(qiáng)力振搖，至藍(lán)色消失。另準(zhǔn)確移取供試液5.00mL ,置于碘量瓶中，加入醋酸-醋酸鈉緩沖溶液(pH=4.5) 5mL，準(zhǔn)確移取碘標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液(0.01mol/L)15.00mL，塞緊瓶塞并搖均，在20 25暗處放置20分鐘，用硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 (0.01 mol/L)滴定，至近終點(diǎn)時(shí)加1mL淀粉指示液，繼續(xù)滴定并強(qiáng)力振搖，至藍(lán)色消失，作為空白。同時(shí)用已知含量的青霉素對(duì)照品按同法測定作對(duì)照試驗(yàn)，計(jì)算出青霉素試樣的含量。 第四節(jié) 醫(yī)藥有效分含量的測定 5測定結(jié)果計(jì)算 （3-11） 式中：W1(普魯卡因青霉素）試樣測得的普魯卡因青霉素的質(zhì)量

53、分?jǐn)?shù)，%；W2(普魯卡因青霉素）試樣中普魯卡因青霉素實(shí)際的質(zhì)量分?jǐn)?shù)，%；c硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液濃度，mol/L；V0測定空白消耗硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液的體積，mL；V測定試樣消耗硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液的體積，mL；M普魯卡因青霉素的摩爾質(zhì)量，g/ mol； ms稱取試樣的質(zhì)量，g。 第四節(jié) 醫(yī)藥有效分含量的測定 6注意事項(xiàng) 從上述反應(yīng)原理可知，碘(I)1mol與青霉素1/8mol、硫代硫酸鈉1mol相當(dāng)。但碘的實(shí)際消耗量，隨反應(yīng)條件如溫度、加碘后放置時(shí)間、碘離子和碘的濃度、溶液的pH值、雜質(zhì)存在的多少及碘的過量程度等因素有關(guān)，因此在測定時(shí)應(yīng)嚴(yán)格控制操作條件。 碘量法是青霉素族的經(jīng)典測定方法，

54、應(yīng)用范圍廣泛；頭孢菌素族也可經(jīng)堿水解，p-內(nèi)酰胺開環(huán)后與碘發(fā)生氧化還原反應(yīng)，根據(jù)消耗的碘量計(jì)算含量。 第四節(jié) 醫(yī)藥有效分含量的測定 九、甾體激素類醫(yī)藥的測定 甾體激素類醫(yī)藥是指具有甾體結(jié)構(gòu)的激素類醫(yī)，是臨床上一類重要的醫(yī)藥，主要包括腎上腺皮質(zhì)激素和性激素兩大類。腎上腺皮質(zhì)激素類藥物用于臨床的有醋酸可的松、氫化可的松、醋酸地塞米松、醋酸氟輕松等。性激素分為雄性激素、蛋白同化激素、雌性激素及孕激素等。 甾體激素類醫(yī)藥種類較多，有些為天然藥物，有些為人工合成品。無論是天然的還是人工合成的甾體激素類醫(yī)藥，其基本骨架相同，均具有環(huán)戊烷并多氫菲母核。 甾體激素類醫(yī)藥含量測定的方法很多，常采用的方法有：滴定

55、分析法、比色法、紫外分光光度法、熒光法、氣相色譜法及高效液相色譜法等。在此以異煙肼比色法測定腎上腺皮質(zhì)激素的含量為例，介紹甾體類激素含量的測定方法。 第四節(jié) 醫(yī)藥有效分含量的測定 第四節(jié) 醫(yī)藥有效分含量的測定 1測定原理(異煙肼比色法)甾體類激素醫(yī)藥C3酮基及某些其他位置的酮基都能在酸性條件下與羰基試劑異煙肼縮合生成黃色異煙腙，在一定波長下具有最大吸收，因此，可用比色法測定甾體類激素醫(yī)藥的含量。 第四節(jié) 醫(yī)藥有效分含量的測定 2儀器 (1)容量瓶 50mL，100mL； (2)移液管 5mL，10mL； (3)恒溫水??； (4)玻璃過濾漏斗； (5)量筒 10mL； (6)具塞試管 25mL；

56、 (7)燒杯 100mL； (8)分光光度計(jì)； 3試劑 (1)無水乙醇； (2)氯仿； (3)異煙肼甲醇溶液 0.1%； (4)鹽酸溶液 0.0074mol/L。 第四節(jié) 醫(yī)藥有效分含量的測定 4測定方法(醋酸地塞米松軟膏的含量測定) (1)對(duì)照溶液的制備 準(zhǔn)確稱取醋酸地塞米松對(duì)照品25mg(準(zhǔn)確至0.2mg)，置于100mL容量瓶中，加入無水乙醇適量使溶解并稀釋至刻度，搖均；準(zhǔn)確移取5.00mL，置于50mL容量瓶中，用無水乙醇稀釋至刻度，搖均，即得對(duì)照液。 (2)試樣溶液的制備 準(zhǔn)確稱取醋酸地塞米松試樣2.5mg(準(zhǔn)確至0.1mg)，置于燒杯中，加入無水乙醇約25mL，置于水浴中加熱，攪拌

57、使醋酸地塞米松試樣溶解，再置于冰水浴中冷卻，過濾，濾液置于100mL容量瓶中，同法提取3次，濾液并入容量瓶中，用無水乙醇稀釋至刻度，搖均，即得試樣溶液。 第四節(jié) 醫(yī)藥有效分含量的測定 (3)測定 準(zhǔn)確移取對(duì)照溶液和試樣溶液各10.00mL，分別置于具塞試管中，置水浴中蒸去乙醇，殘?jiān)屑尤肼确?0mL，振搖，使殘?jiān)芙?。各?zhǔn)確加入0.1%異煙肼甲醇溶液(取異煙肼0.5g，加鹽酸溶液0.63mL，加甲醇使溶解成500mL)10.00mL ,搖均，置55暗處保溫45分鐘，取出，冷卻至室溫，用氯仿稀釋至25.00mL，搖均，按照分光光度法，在415nm的波長處分別測定吸光度，計(jì)算，即得。 第四節(jié) 醫(yī)藥

58、有效分含量的測定 5測定結(jié)果計(jì)算 （3-12） 式中：W(醋酸地塞米松）試樣中醋酸地塞米松質(zhì)量分?jǐn)?shù)，%；A在281nm處醋酸地塞米松試樣吸光度；AS在281nm處醋酸地塞米松對(duì)照品吸光度；AO在281nm處空白吸光度；m醋酸地塞米松試樣質(zhì)量，g；ms醋酸地塞米松對(duì)照品質(zhì)量，g；P對(duì)照品中酸地塞米松的質(zhì)量分?jǐn)?shù)，%。第四節(jié) 醫(yī)藥有效分含量的測定 6討論 異煙肼比色法測定甾體激素類醫(yī)藥的含量，受到各種因素的影響，如溶劑、酸的種類和濃度、水分、溫度、光線和氧、反應(yīng)的專屬性等方面的影響。在操作中應(yīng)嚴(yán)格控制條件，才能獲得滿意的結(jié)果。 (1)溶劑的選擇 無水乙醇或甲醇為溶劑均能得到滿意的結(jié)果。試劑在甲醇中的

59、穩(wěn)定性與呈色強(qiáng)度均比在無水乙醇中高，但由于甲醇對(duì)制劑輔料植物油的溶解度較無水乙醇小，故一般多選用乙醇。 (2)酸的種類和濃度 一般使用鹽酸，因當(dāng)鹽酸與異煙肼反應(yīng)的物質(zhì)的量比為2:1時(shí)可獲得最大吸光度，按上述操作中鹽酸濃度為0.0074mol/L。 第四節(jié) 醫(yī)藥有效分含量的測定 (3)水分、溫度、光線和氧 當(dāng)反應(yīng)液中含水量增加，縮合產(chǎn)物異煙腙將發(fā)生水解，從而吸光度降低。溫度升高，反應(yīng)速度加快。當(dāng)在具塞試管中不致使溶劑揮發(fā)和吸收水分的情況下，光線與氧不影響反應(yīng)。 (4)關(guān)于反應(yīng)的專屬性 具有4-3-酮基的甾體激素類醫(yī)藥在室溫不到1小時(shí)，即可定量地與酸性異煙肼反應(yīng)。其他甾酮化合物需在長時(shí)間放置或加熱

60、后方反應(yīng)完全，因此，本法對(duì)4-3-酮基的甾體激素類醫(yī)藥具有一定的專屬性。 第四節(jié) 醫(yī)藥有效分含量的測定 十、糖類醫(yī)藥的測定 1測定原理(旋光法)葡萄糖的水溶液具有右旋性，由于葡萄糖在水中有三種互變異構(gòu)體，故有變旋現(xiàn)象。須放置6小時(shí)以上或加熱、加酸、加弱堿，使變旋反應(yīng)達(dá)到平衡。用旋光法測定葡萄糖含量時(shí)，常加入少量堿液(如氨試液)加速變旋作用，促進(jìn)達(dá)到平衡。變旋反應(yīng)達(dá)到平衡后，用旋光儀測定葡萄糖溶液的旋光度，根據(jù)旋光度可計(jì)算出葡萄糖的含量。變旋平衡反應(yīng)式如下： 第四節(jié) 醫(yī)藥有效分含量的測定 第四節(jié) 醫(yī)藥有效分含量的測定 2儀器 (1)旋光測定儀； (2)容量瓶 100mL； (3)吸量管 2 mL