生物實(shí)驗(yàn)中常見buffer的配制生物實(shí)驗(yàn)中常見buffer的配制生物實(shí)驗(yàn)中常見buffer的配制V:1.0精細(xì)整理，僅供參考生物實(shí)驗(yàn)中常見buffer的配制日期：20xx年X月常用緩沖溶液配置方法

標(biāo)準(zhǔn)緩沖液pH值與溫度對(duì)照表溫度

℃四草酸氫鉀

0.05M鄰苯二甲酸氫鉀

0.05M混合磷酸鹽

0.025M硼砂

0.01M51.674.006.959.39101.674.006.029.33151.674.006.909.28201.684.006.889.23251.684.006.869.18301.684.016.859.14351.694.026.849.11

常用緩沖溶液的配制方法

1．甘氨酸–鹽酸緩沖液（0.05mol/L）

X毫升0.2mol/L甘氨酸+Y毫升0.2mol/LHCI，再加水稀釋至200毫升pHXYpHXY2.0

2.4

2.6

2.850

50

50

5044.0

32.4

24.2

16.83.0

3.2

3.4

3.650

50

50

5011.4

8.2

6.4

5.0

甘氨酸分子量=75.07，0.2mol/L甘氨酸溶液含15.01克/升。

2．鄰苯二甲酸–鹽酸緩沖液（0.05mol/L）

X毫升0.2mol/L鄰苯二甲酸氫鉀+0.2mol/LHCl，再加水稀釋到20毫升pH(20℃)XYpH(20℃)XY2.2

2.4

2.6

2.8

3.05

5

5

5

54.070

3.960

3.295

2.642

2.0223.2

3.4

3.6

3.85

5

5

51.470

0.990

0.597

0.263

鄰苯二甲酸氫鉀分子量=204.23，0.2mol/L鄰苯二甲酸氫溶液含40.85克/升

3．磷酸氫二鈉–檸檬酸緩沖液pH0.2mol/LNa2HPO4

（毫升）0.1mol/L

檸檬酸

（毫升）pH0.2mol/LNa2HPO4

（毫升）0.1mol/L

檸檬酸

（毫升）2.2

2.4

2.6

2.8

3.0

3.2

3.4

3.6

3.8

4.0

4.2

4.4

4.6

4.8

5.00.40

1.24

2.18

3.17

4.11

4.94

5.70

6.44

7.10

7.71

8.28

8.82

9.35

9.86

10.3010.60

18.76

17.82

16.83

15.89

15.06

14.30

13.56

12.90

12.29

11.72

11.18

10.65

10.14

9.705.2

5.4

5.6

5.8

6.0

6.2

6.4

6.6

6.8

7.0

7.2

7.4

7.6

7.8

8.010.72

11.15

11.60

12.09

12.63

13.22

13.85

14.55

15.45

16.47

17.39

18.17

18.73

19.15

19.459.28

8.85

8.40

7.91

7.37

6.78

6.15

5.45

4.55

3.53

2.61

1.83

1.27

0.85

0.55

Na2HPO4分子量=14.98，0.2mol/L溶液為28.40克/升。

Na2HPO4-2H2O分子量=178.05，0.2mol/L溶液含35.01克/升。

C4H2O7·H2O分子量=210.14，0.1mol/L溶液為21.01克/升。

4．檸檬酸–氫氧化鈉-鹽酸緩沖液pH鈉離子濃度

（mol/L）檸檬酸（克）

C6H8O7·H2O氫氧化鈉(克)

NaOH97%鹽酸（毫升）

HCl（濃）最終體積（升）①2.2

3.1

3.3

4.3

5.3

5.8

6.50.20

0.20

0.20

0.20

0.35

0.45

0.38210

210

210

210

245

285

26684

83

83

83

144

186

156160

116

106

45

68

105

12610

10

10

10

10

10

10

①

使用時(shí)可以每升中加入1克克酚，若最后pH值有變化，再用少量50%

氫氧化鈉溶液或濃鹽酸調(diào)節(jié)，冰箱保存。

②

5．檸檬酸–檸檬酸鈉緩沖液（0.1mol/L）pH0.1

mol/L

檸檬酸（毫升）0.1

mol/L

檸檬酸鈉（毫升）pH0.1

mol/L

檸檬酸（毫升）0.1

mol/L

檸檬酸鈉（毫升）3.0

3.2

3.4

3.6

3.8

4.0

4.2

4.4

4.6

4.818.6

17.2

16.0

14.9

14.0

13.1

12.3

11.4

10.3

9.21.4

2.8

4.0

5.1

6.0

6.9

7.7

8.6

9.7

10.85.0

5.2

5.4

5.6

5.8

6.0

6.2

6.4

6.68.2

7.3

6.4

5.5

4.7

3.8

2.8

2.0

1.411.8

12.7

13.6

14.5

15.3

16.2

17.2

18.0

18.6

檸檬酸C6H8O7·H2O：分子量210.14，0.1mol/L溶液為21.01克/升。

檸檬酸鈉Na3C6H5O7·2H2O：分子量294.12，0.1mol/L溶液為29.41克/毫升。

6．乙酸–乙酸鈉緩沖液（0.2mol/L）pH(18℃)0.2

mol/L

NaAc(毫升)0.3

mol/LHAc(毫升)pH(18℃)0.2

mol/L

NaAc(毫升)0.3

mol/L

HAc(毫升)2.6

3.8

4.0

4.2

4.4

4.60.75

1.20

1.80

2.65

3.70

4.909.25

8.80

8.20

7.35

6.30

5.104.8

5.0

5.2

5.4

5.6

5.85.90

7.00

7.90

8.60

9.10

9.404.10

3.00

2.10

1.40

0.90

0.60

Na2Ac·3H2O分子量=136.09，0.2mol/L溶液為27.22克/升。

7．磷酸鹽緩沖液

（1）磷酸氫二鈉–磷酸二氫鈉緩沖液（0.2）pH0.2

mol/L

Na2HPO4

(毫升)0.3

mol/L

NaH2PO4

(毫升)pH0.2

mol/L

Na2HPO4

(毫升)0.3

mol/L

NaH2PO4

(毫升)5.8

5.9

6.0

6.1

6.2

6.3

6.4

6.5

6.6

6.7

6.8

6.98.0

10.0

12.3

15.0

18.5

22.5

26.5

31.5

37.5

43.5

49.5

55.092.0

90.0

87.7

85.0

81.5

77.5

73.5

68.5

62.5

56.5

51.0

45.07.0

7.1

7.2

7.3

7.4

7.5

7.6

7.7

7.8

7.9

8.061.0

67.0

72.0

77.0

81.0

84.0

87.0

89.5

91.5

93.0

94.739.0

33.0

28.0

23.0

19.0

16.0

13.0

10.5

8.5

7.0

5.3

Na2HPO4·2H2O分子量=178.05，0.2mol/L溶液為85.61克/升。

Na2HPO4·2H2O分子量=358.22，0.2mol/L溶液為71.64克/升。

Na2HPO4·2H2O分子量=156.03，0.2mol/L溶液為31.21克/升。

（2）磷酸氫二鈉–磷酸二氫鉀緩沖液（1/15mol/L）pHmol/L/15Na2HPO4

(毫升)mol/L//15KH2PO4

(毫升)pHmol/L//15Na2HPO4

(毫升)mol/L//15KH2PO4

(毫升)4.92

5.29

5.91

6.24

6.47

6.64

6.81

6.980.10

0.50

1.00

2.00

3.00

4.00

5.00

6.009.90

9.50

9.00

8.00

7.00

6.00

5.00

4.007.17

7.38

7.73

8.04

8.34

8.67

8.187.00

8.00

9.00

9.50

9.75

9.90

10.003.00

2.00

1.00

0.50

0.25

0.10

0

Na2HPO4·2H2O分子量=178.05，1/15M溶液為11.876克/升。

KH2PO4分子量=136.09，1/15M溶液為9.078克/升。

8．磷酸二氫鉀–氫氧化鈉緩沖液（0.05M）

X毫升0.2MK2PO4+Y毫升0.2NNaOH加水稀釋至29毫升

pH(20℃)X(毫升)Y（毫升）pH(20℃)X(毫升)Y（毫升）5.8

6.0

6.2

6.4

6.6

6.85

5

5

5

5

50.372

0.570

0.860

1.260

1.780

2.3657.0

7.2

7.4

7.6

7.8

8.05

5

5

5

5

52.963

3.500

3.950

4.280

4.520

4.680

9．巴比妥鈉-鹽酸緩沖液（18℃）pH0.04M巴比妥鈉溶液0.2V鹽酸pH0.04M巴比妥鈉溶液(毫升)0.2N鹽酸(毫升)6.8

7.0

7.2

7.4

7.6

7.8

8.0

8.2100

100

100

100

100

100

100

10018.4

17.8

16.7

15.3

13.4

11.47

9.39

7.218.4

8.6

8.8

9.0

9.2

9.4

9.6100

100

100

100

100

100

100

1005.21

3.82

2.52

1.65

1.13

0.70

0.35

巴比妥鈉鹽分子量=206.18;0.04M溶液為8.25克/升

10．Tris–鹽酸緩沖液（0.05M，25℃）

50毫升0.1M三羥甲基氨基甲烷（Tris）溶液與X毫升0.1N鹽酸混勻后，加水稀釋至100毫升。pHX(毫升)pHX(毫升)7.10

7.20

7.30

7.40

7.50

7.60

7.70

7.80

7.90

8.0045.7

44.7

43.4

42.0

40.3

38.5

36.6

34.5

32.0

29.28.10

8.20

8.30

8.40

8.50

8.60

8.70

8.80

8.9026.2

22.9

19.9

17.2

14.7

12.4

10.3

8.5

7.0

三羥甲基氨基甲烷（Tris）HOCH2

CH2OHHOCH2

NH2

C

分子量=121.14;

0.

1M溶液為12.114克/升。Tris溶液可從空氣中吸收二氧化碳，使用時(shí)注意將瓶蓋嚴(yán)。

11．硼酸–硼砂緩沖液（0.2M硼酸根）pH0.05M硼砂（毫升）0.2M硼砂（毫升）pH0.05M硼砂（毫升）0.2M硼酸（毫升）7.4

7.6

7.8

8.01.0

1.5

2.0

3.09.0

8.5

8.0

7.08.2

8.4

8.7

9.03.5

4.5

6.0

8.06.5

5.5

4.0

2.0

硼砂Na2B4O7·H2O,分子量=381.43;0.05M溶液（=0.2M硼酸根）含19.07克/升。

硼酸H2BO3,分子量=61.84,0.2M溶液為12.37克/升。

硼砂易失去結(jié)晶水，必須在帶塞的瓶中保存。

11．硼酸-硼砂緩沖液（0.2M硼酸根）pH0.05M硼砂（毫升）0.2M硼酸（毫升）pH0.05M硼砂（毫升）0.2M硼酸（毫升）7.4

7.6

7.8

8.01.0

1.5

2.0

3.09.0

8.5

8.0

7.08.2

8.4

8.7

9.03.5

4.5

6.0

8.06.5

5.5

4.0

2.0

硼砂Na2B4O7·10H2O,分子量=381.43;0.05M溶液（=0.2M硼酸根）含19.07克/升。

硼酸H2BO3，分子量=61.84,0.2M溶液為12.37克/升。

硼砂

易失去結(jié)晶水，必須在帶塞的瓶中保存。

12．甘氨酸–氫氧化鈉緩沖液（0.05M）

X毫升0.2M甘氨酸+Y毫升0.2NnaOH加水稀釋至200毫升pHXYpHXY8.6

8.8

9.0

9.2

9.450

50

50

50

504.0

6.0

8.8

12.0

16.89.6

9.8

10.0

10.4

10.650

50

50

50

5022.4

27.2

32.0

38.6

45.5

甘氨酸分子量=75.07;0.2M溶液含15.01克/升。

13．硼砂-氫氧化鈉緩沖液（0.05M硼酸根）

X毫升0.05M硼砂+Y毫升0.2NNaOH加水稀釋至200毫升pHXYpHXY9.3

9.4

9.650

50

506.0

11.0

23.09.8

10.0

10.150

50

5034.0

43.0

46.0

硼砂Na2B4O7·10H2O,分子量=381.43;0.05M溶液為19.07克/升。

14．碳酸鈉-碳酸氫鈉緩沖液（0.1M）

Ca2+、Mg2+存在時(shí)不得使用pH0.1MNa2CO3(毫升)0.1MN2HCO3(毫升)20℃37℃9.16

9.40

9.51

9.78

9.9