第第頁檢驗(yàn)病理科晉升副高（正高）職稱病例分析專題報(bào)告單位：***姓名：***現(xiàn)任專業(yè)技術(shù)職務(wù)：***申報(bào)專業(yè)技術(shù)職務(wù)：***20**年**月**日病理科醫(yī)師職稱晉升專題報(bào)告微波技術(shù)在病理技術(shù)中的應(yīng)用微波（Microwave,MW）是一種具有能量的電磁波，波長(zhǎng)很短，僅有1mm-m間，但頻率卻很高，在330-300000MHZ（兆赫），由于它的頻率高，可使物體內(nèi)部的極性分子以每秒24.億次的速度運(yùn)動(dòng)，在運(yùn)動(dòng)中產(chǎn)生瞬間熱，自70年代Mayer氏首次把MW技術(shù)用于組織的固定以來，已有二十年的時(shí)間，在這時(shí)間里，人們已將MW技術(shù)廣泛應(yīng)用于病理技術(shù)的各個(gè)方面，如組織固定，組織脫水，組織切片的特殊染色，組織脫鈣，快速組織制作，免疫組化染色等。（一）組織固定組織固定的目的是使組織細(xì)胞中的蛋白質(zhì)發(fā)生凝固，以保存組織中原有的微細(xì)結(jié)構(gòu)。以往為了達(dá)到上述的目的，常應(yīng)用許多常規(guī)試劑來固定組織，如甲醛和酒精等。但是，由于這些固定液的穿透性不強(qiáng)，因而固定需時(shí)較長(zhǎng)，致使某些抗原成分的喪失，雖然人們應(yīng)用新鮮的組織來制作切片，以利于研究，但這樣手續(xù)極為麻煩，且病例有限，做不了回顧性研究?；谏鲜鲈颍藗?yōu)榱烁玫乇４婵乖?，研究了不同的各種固定組織的方法，在這些方法中，MW技術(shù)固定的組織、抗原保存較好。1．MW技術(shù)固定各種組織所需的溫度MW是具有能量的電磁波，由于它能使物體內(nèi)部的極性分子快速運(yùn)動(dòng)而產(chǎn)熱，那么應(yīng)用于組織固定的溫度應(yīng)是多少為好呢？各種組織由于各自的結(jié)構(gòu)不同，分子不一，電子密度也就不一樣，因而用于組織固定的溫度也不一樣。Bernard經(jīng)過一系列的實(shí)驗(yàn)，認(rèn)為肝、腎、肺的最佳固定溫度是70℃，77℃和77℃，我們的實(shí)驗(yàn)認(rèn)為各組織的固定溫度應(yīng)在60℃左右，時(shí)間2-3min為好。2．MW技術(shù)固定是組織所需固定液的選擇本室張素娟應(yīng)用臨床冰凍切片所剩的新鮮組織如甲狀腺、乳腺、淋巴結(jié)等組織，實(shí)驗(yàn)性小鼠的肝、腎、心、肺和大腸等組織，分別用甲醛、生理鹽水進(jìn)行固定，然后通過HE、網(wǎng)染、AB-PAS等特殊染色以及用免疫組化對(duì)幾種抗體如CEA、EMA和L26等的標(biāo)記，對(duì)其結(jié)果進(jìn)行比較，結(jié)果發(fā)現(xiàn)生理鹽水固定的組織效果最好。我們的實(shí)驗(yàn)也證明生理鹽水固定的組織效果為最好，但應(yīng)注意的是固定組織塊不能太厚，時(shí)間在3min左右。3．MW技術(shù)固定組織固定液的選擇固定液的量按傳統(tǒng)的固定方法，應(yīng)是1：20，但在固定液也不能很少，至少不少于250ml。原因之一，液體量少，容易導(dǎo)致沸騰，如此易使液體揮發(fā)直至干涸，使組織塊破壞嚴(yán)重。其二是液體量多，可保持一定的溫度，接受全程的MW輻射，使輻射和固定足時(shí)，使固定完全徹底。（二）MW快速石蠟制作法新鮮組織或臨床門診病例的組織（存于福爾馬林固定液中）采用本法的以下列為好：1．福爾馬林（或生理鹽水）MW輻射1.30-2.30min；

2．80%酒精MW1.30-2.30min；

3．90%酒精MW1.30-2.30min；

4．95%酒精MW1.30-2.30min；

5．95%酒精MW1.30-2.30min；

6．100%酒精MW1.30-2.30min；

7．100%酒精MW1.30-2.30min；

8．二甲苯MW1.30-2.30min；

9．浸蠟15-20min左右。應(yīng)用MW技術(shù)快速石蠟切片，必須注意的問題：1．如果組織送至病理科時(shí)已用福爾馬林固定液浸泡，則固定液仍采用福爾馬林固定液，如為新鮮組織，可用生理鹽水固定。

2．脫水劑采用由低至高濃度的酒精，以減少組織的過度收縮。

3．如果采用丙酮作脫水劑，應(yīng)注意組織的收縮，因丙酮的沸點(diǎn)低，在MWO內(nèi)容易沸騰。

4．脫水劑的量應(yīng)在200-250ml間，過少容易使液體沸騰直至干涸，過多則達(dá)不到所需的溫度，影響脫水效果。

5．如需在MWO內(nèi)浸蠟，應(yīng)注意脫水盒上的金屬片，因?yàn)镸WO內(nèi)不能用金屬等物品。（三）MW技術(shù)的特殊染色法特殊染色法中，有許多方法中的浸染時(shí)間，少則幾秒種，多則幾十個(gè)小時(shí)，下面是幾種特殊染色的時(shí)間比較。項(xiàng)目/時(shí)間室溫浸染時(shí)間（min）MW輻射時(shí)間（min）Grocott六胺銀701.5膠性銀AgNOR401.5膠性角-AB40,401.5,1.0PAS-膠性銀30,401.0,1.5（四）MW技術(shù)脫鈣法將骨組織鋸成小塊，取一燒杯，盛100ml左右的10%硝酸，在其液面上加入20ml左右的液體石蠟，然后于MWO輻射10min左右，直至用大頭針能順利扎入為止。應(yīng)用MW技術(shù)進(jìn)行骨組織脫鈣，既要使組織快速脫鈣，又要不使硝酸腐蝕機(jī)器，就必須注意如下問題：1．液體不能過少，否則易沸騰導(dǎo)致硝酸濺灑出來。2．液面上加上液體石蠟，以使硝酸分子濺灑出來，同時(shí)在MWO內(nèi)加2杯冷水或冰塊，以吸收一些熱量，使溫度不會(huì)過高。（五）MW技術(shù)的免疫組化染色法各種免疫組織化學(xué)的方法如ABC、LSAB（SP）、EV二步法等，都能用MW技術(shù)來進(jìn)行，在應(yīng)用MW技術(shù)時(shí)，必須注意如下問題：1．MW輻射的時(shí)間：作為MW技術(shù)進(jìn)行免疫組化染色，其輻射時(shí)間各有不同，這應(yīng)看所使用的MWO型號(hào)及其功率，大功率的時(shí)間應(yīng)相對(duì)較少。2．MW輻射的溫度：應(yīng)用的MWO如為家用MWO，其溫度將不好控制，MW技術(shù)免疫組化染色，溫度過高，將會(huì)導(dǎo)致染色的失敗。免疫組化加入的抗體，最多為100μl（這如果用手工操作，至少可作3例）當(dāng)溫度過高時(shí)，抗體很容易被蒸發(fā)至干涸，此時(shí)應(yīng)在MWO內(nèi)放置一些冰塊或用三角燒杯或瓶裝的冷水，以吸收MW輻射產(chǎn)生的熱量，使染色能順利進(jìn)行，一旦加入抗體被熱量所蒸發(fā)干涸，染色將告失敗，應(yīng)重新切片，決不能使用干涸的切片，因這種切片的抗原已失活。3．MWO內(nèi)禁用一切從屬和從屬性的東西，否則容易操壞儀器。檢驗(yàn)病理科禽食鹽中毒的病理分析報(bào)告1發(fā)病情況2021年8月，**鎮(zhèn)某鴨場(chǎng)，混群飼養(yǎng)1000羽鴨、300羽雞，精神萎靡，不愿下水，采食量下降，出現(xiàn)下痢、腫眼、流淚和神經(jīng)等癥狀，鄉(xiāng)鎮(zhèn)獸醫(yī)先給予50%高滲葡萄糖灌服，維生素治療，效果不顯著，發(fā)病禽只逐漸增多，截止剖檢當(dāng)日已死亡900只鴨，180只雞。鴨死亡率90%，雞死亡率60%。2臨床癥狀初期病禽精神萎靡，羽毛蓬松，兩翼下垂，打堆，腹脹，觸診波動(dòng)感，眼腫，流淚，采食量下降，下痢，糞便呈黃褐色或黃白色不等，嗉囊柔軟擴(kuò)張，低頭時(shí)口鼻流出粘性分泌物，呼吸困難，兩肢無力，共濟(jì)失調(diào)，行走困難，驅(qū)趕時(shí)靠?jī)梢頁涞匾菩校缓笃?，病禽消瘦衰弱，肌肉痙攣，昏迷，虛脫，瀕死期角弓反張扭頸。3病理剖檢剖檢十只病死禽，頭部腫大至正常大小的兩倍，眼睛腫脹，切開有大量固性分泌物，胸肌、腿肌皮下水腫，膠凍樣浸潤(rùn)，嗉囊中有大量粘液性液體，氣管出血，氣管內(nèi)有栓性分泌物，心包積液，腺胃黏膜充血，小腸充血，出血，腸內(nèi)空虛水狀內(nèi)容物，腎腫大嚴(yán)重，腹腔內(nèi)大量積液。4病例分析該鴨場(chǎng)所養(yǎng)鴨為東北品種，第一年飼養(yǎng)，鴨舍、雞舍為一條小河溝旁邊的兩棟小平房，鴨子主要活動(dòng)的河溝水質(zhì)較差，鴨和雞混群散養(yǎng)，分多批次引進(jìn)，大小不一致，同群飼養(yǎng)，飼養(yǎng)密度很大，氨氣味道很重，飼養(yǎng)條件惡劣，衛(wèi)生情況很差，故發(fā)病率和死亡率都高。主要的飲水即為河水以及一個(gè)年久未用的水井水，無清潔自來水。年久未用的水井水里面的鹽分過高，大量高濃度的食鹽進(jìn)入消化道后，刺激胃腸黏膜而發(fā)生炎癥過程，同時(shí)因滲透壓的梯度關(guān)系吸收腸壁血液循環(huán)中的水分，引起嚴(yán)重的腹瀉、脫水、積液、水腫，進(jìn)一步導(dǎo)致全身血液濃縮，機(jī)體血液循環(huán)障礙，組織相應(yīng)缺氧，機(jī)體的正常代謝功能紊亂，呼吸困難，神經(jīng)癥狀。5治療停止飲用水井水和河水，增設(shè)飲水器，給予清潔飲水，可適量加入維生素及電解多維采用多次、少量、間斷的方式飲水，以免一次性飲水過量而導(dǎo)致嚴(yán)重腦水腫而使病情加劇，對(duì)不能自行飲水的病禽可灌服。灌服5%葡萄糖水以利尿解毒，病情嚴(yán)重者另加0.3%～0.5%醋酸鉀溶液。改喂無鹽易消化飼料，直至康復(fù)為止。加強(qiáng)飼養(yǎng)管理，搞好禽舍衛(wèi)生消毒，避免繼發(fā)其他疾病給禽場(chǎng)帶來更大的損失。經(jīng)過治療，病禽癥狀逐漸減輕，死亡逐漸減少。但因?yàn)樵搱?chǎng)養(yǎng)殖條件太差，加上治療時(shí)禽群已經(jīng)死亡嚴(yán)重，故最終存活率不高。建議該場(chǎng)主下次飼養(yǎng)前將禽舍徹底消毒，空舍一段時(shí)間，同進(jìn)同出，雞、鴨分開飼養(yǎng)，注意禽舍衛(wèi)生消毒工作，減少飼養(yǎng)密度，保證潔凈水的供應(yīng)，飼料中的鹽分控制在0.3%。白細(xì)胞分類檢測(cè)的影響因素探討影響血液細(xì)胞分析儀測(cè)定白細(xì)胞分類的因素，排除假性增高和假性降低情況，必要時(shí)必須血片復(fù)核，準(zhǔn)確地為臨床提供可靠的診治依據(jù)。方法:使用SysmexKX-21血液細(xì)胞分析儀及目視顯微鏡，同時(shí)對(duì)150例標(biāo)木進(jìn)行檢查，對(duì)比分析。結(jié)果:操作不順利、標(biāo)木采取后放置時(shí)間、溫度及上機(jī)前標(biāo)木混勻、振蕩時(shí)間、力度等均可影響血液細(xì)胞分析儀正確對(duì)白細(xì)胞的分類。結(jié)論:血液細(xì)胞分析儀并不能完全代替日視顯微鏡進(jìn)行白細(xì)胞分類，對(duì)出現(xiàn)疑有異常白細(xì)胞警告報(bào)警，應(yīng)分析原因，日視顯微鏡下白細(xì)胞分炎或重新采血。外周血白細(xì)胞分類，是白細(xì)胞分析中-.項(xiàng)十分重要的內(nèi)容，是臨床診斷和鑒別診斷的重要指標(biāo)之一-。近幾年來，隨若科學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展，各種型號(hào)血液細(xì)胞分析儀，在各級(jí)醫(yī)院檢驗(yàn)科已廣泛應(yīng)用，特別是自細(xì)胞自動(dòng)分類和異常白細(xì)胞警告提示，改變了目視顯微鏡分類方法，大大減輕了檢驗(yàn)人員的勞動(dòng)強(qiáng)度，使工作效率明顯提高。但是，日前很多檢驗(yàn)人員囚對(duì)三分類血細(xì)胞分析儀性能缺乏足夠的認(rèn)識(shí)，誤認(rèn)為血細(xì)胞分析儀分類結(jié)果，完全可以代替H視顯微鏡分類結(jié)果，而忽視某些結(jié)果需耍復(fù)片的重要性。為此，本文將對(duì)口本**公司生產(chǎn)的KX-21血細(xì)胞分析儀白細(xì)胞分類，與目視顯微鏡復(fù)片分類，對(duì)異常白細(xì)胞檢出率進(jìn)行對(duì)比分析。找出使用血細(xì)胞分析儀檢測(cè)白細(xì)胞分類的影響因索，現(xiàn)探討如下:一、方法隨機(jī)抽查門診患者150例，靜脈采血，EDIA-K2抗凝。室溫放置15min后，充分混勻，上機(jī)測(cè)試。同時(shí)推血片一張，空溫自然|燥，堖氏染色，日視顯微鏡下進(jìn)行白細(xì)胞分類。將兩種方法對(duì)異常白細(xì)胞檢出率進(jìn)行對(duì)比分析。二、結(jié)果150例標(biāo)本經(jīng)山血液細(xì)胞分析儀檢測(cè)，白細(xì)胞分類結(jié)果，出現(xiàn)疑有異常白細(xì)胞警告報(bào)警有20例，報(bào)警率(陽性率)13.3%。日視顯微鏡復(fù)片，發(fā)現(xiàn)有不同程度異常白細(xì)胞12例，陽性率8.0%。20例陽性標(biāo)本，目視顯微鏡復(fù)片，其中有8例可見有不同程度異常白細(xì)胞(有幼稚細(xì)胞1例，桿狀核粒細(xì)胞增多1例，嗜酸粒細(xì)胞增多2例，嗜堿粒細(xì)胞增多1例，異常淋巴細(xì)胞增多3側(cè))，占陽性標(biāo)本的40%。130例陰性標(biāo)本(無警告)，H視顯微鏡復(fù)片，有2例發(fā)現(xiàn)有不同程度的異常白細(xì)胞，占陰性標(biāo)本的1.5%。其中1例為已確診急性淋巴白血病在化療中，血液中白細(xì)胞總數(shù)偏低，血細(xì)胞分析儀分類淋巴細(xì)胞百分比增高，儀器無異常白細(xì)胞警告，顯微鏡復(fù)片，幼稚細(xì)胞8%。另1例為發(fā)熱待查兒童，血液中白細(xì)胞總數(shù)正常，血細(xì)胞分析儀三分類百分比基本正常，沒有出現(xiàn)異常白細(xì)胞警告，H視顯微鏡復(fù)片，異常淋巴細(xì)胞達(dá)10%。三、討論通過以上結(jié)果分析，可以看出門診患者，全血做血液細(xì)胞分析，白細(xì)胞分類結(jié)果，異常白細(xì)胞警告較高，假陰性率雖然較低，但也應(yīng)該引起檢驗(yàn)人員的重視。根據(jù)幾年來的工作體會(huì)認(rèn)為，出現(xiàn)上述問題的主要原因，一是血液細(xì)胞分析儀對(duì)白細(xì)胞分類不同于常規(guī)的涂片染色分類|11，常規(guī)分類除細(xì)胞大小外，還要根據(jù)細(xì)胞染色反應(yīng)，核的形態(tài)及染色質(zhì)的著色情況，胞質(zhì)的著色及顆粒才能確定為某種細(xì)胞。三分類血細(xì)胞分析儀法，是根據(jù)白細(xì)胞直方圖分類法，只能反映經(jīng)溶血?jiǎng)┨幚砗竽撤N體積的顆粒，即某種大小細(xì)胞的多少，血不能反映某種特殊細(xì)胞的變化，對(duì)少見的正常白細(xì)胞和異常細(xì)胞不能準(zhǔn)確識(shí)別，不難看出電阻法自細(xì)胞分類只不過是較粗的篩選方法[1]。另外，手指采血，出于采血過程中囚操作緩慢、穿刺不順、組織液混入、混勻不及時(shí)等，均會(huì)引起自細(xì)胞形態(tài)變化。對(duì)血細(xì)胞分析儀分類會(huì)產(chǎn)生明顯影響，出現(xiàn)異常白細(xì)胞假報(bào)警，為此，根據(jù)文獻(xiàn)介紹和大量實(shí)驗(yàn)證明[2]，使用末梢血在血細(xì)胞分析儀上進(jìn)行檢測(cè)，影響因索較多，有些參數(shù)不能得出準(zhǔn)確結(jié)果，共重復(fù)性及穩(wěn)定性都不及靜脈血標(biāo)本，應(yīng)提倡靜脈血。血細(xì)胞的檢測(cè)結(jié)果，尤其是血小板(PLT)的結(jié)果，直接反映試劑的質(zhì)量。原則.上強(qiáng)調(diào)使用與儀器檢測(cè)原理相匹配的試劑[3]。血液細(xì)胞分析儀試劑中的主要試劑，能將紅細(xì)胞溶解，并能使白細(xì)胞的體積發(fā)生規(guī)律性變化。實(shí)際工作中發(fā)現(xiàn)，若溶血不完全，出于紅細(xì)胞碎片沖洗不徹底將引起白細(xì)胞計(jì)數(shù)(WBC)假性增.高。此外，稀釋液的滲透壓、離子強(qiáng)度等亦可影響檢測(cè)結(jié)果。特別注意的是，試劑應(yīng)避免污染，否則，雜質(zhì)微粒會(huì)使本底增高，導(dǎo)致最后計(jì)數(shù)結(jié)果偏高，影響自細(xì)胞分類結(jié)果的準(zhǔn)確性。抗凝劑的種類對(duì)檢測(cè)結(jié)果影響較大，國際化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì)(ICSI)推薦用LDTA二.鉀抗凝。另外，血液和抗凝劑比例也會(huì)影響檢測(cè)質(zhì)量。血液比例過高時(shí)，由于抗凝劑相對(duì)不足，血漿中出現(xiàn)微血塊的可能性增加。微凝塊可能堵塞儀器影響檢測(cè)結(jié)果，從而無法得出正確的結(jié)果[4]。在正常情況下，血液細(xì)胞分析儀對(duì)血細(xì)胞體積的識(shí)別有明顯的體積界限:WBC35-450f1。根據(jù)Coulter原理，儀器只識(shí)別顆粒大小而不能識(shí)別顆粒的性質(zhì)。當(dāng)其體積異常高于或低于儀器設(shè)定的閱值時(shí)，往往會(huì)造成識(shí)判。除以上原因外，標(biāo)本采取后放置時(shí)間、溫度及上機(jī)前標(biāo)本混勻