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文檔簡介
生物技術(shù)重點!!細胞工程蛋白質(zhì)工程生物技術(shù)重點!!細胞工程蛋白質(zhì)工程228出品質(zhì)量保障誰用誰請客?生物技術(shù)的確切定義:人們運用現(xiàn)代生物科學(xué),工程學(xué)和其他基礎(chǔ)學(xué)科的知識,按照預(yù)先的設(shè)計,對生物進行控制和改造或模擬生物及其功能,用來發(fā)展商業(yè)性加工,產(chǎn)品生產(chǎn)和社會服務(wù)的新技術(shù)領(lǐng)域。?生物技術(shù)的構(gòu)成基因工程發(fā)酵工程酶工程?生物技術(shù)各構(gòu)成成分之間的關(guān)系現(xiàn)代生物技術(shù)的核心是基因工程,而現(xiàn)代生物技術(shù)的基礎(chǔ)和歸宿則是發(fā)酵工程和酶工程,否則就不能獲得產(chǎn)品和經(jīng)濟效益,也就體現(xiàn)不了基因工程和細胞工程的優(yōu)越性?;蚬こ痰亩x:▼是指按照人們的意愿和設(shè)計方案,▼以分子生物學(xué),分子遺傳學(xué),生物化學(xué)和微生物學(xué)為理論基礎(chǔ),▼通過將一種生物細胞的基因分離出來或人工合成新的基因,在體外進行酶切和連接并插入載體分子構(gòu)成遺傳物質(zhì)的新組合,▼導(dǎo)入到自身細胞或另一種細胞中進行復(fù)制和表達等實驗手段,▼有目的的實現(xiàn)動物,植物和微生物等物種之間的DNA重組和轉(zhuǎn)移,使現(xiàn)有物種在短時間內(nèi)趨于完善或創(chuàng)造出新的生物特性。發(fā)酵工程的定義
生物技術(shù)重點!!228出品質(zhì)量保障誰用誰請客生物技術(shù)重點!!利用微生物的某種特性,通過現(xiàn)代化工程技術(shù)手段進行工業(yè)規(guī)模生產(chǎn)的技術(shù).包括:①傳統(tǒng)發(fā)酵(有時稱釀造),②近代的發(fā)酵工業(yè)如酒精,如乳酸,丙酮-丁醇等③目前新興的如抗生素,有機酸,氨基酸,酶制劑,核苷酸,生理活性物質(zhì),單細胞蛋白等的發(fā)酵生產(chǎn)酶工程的定義:酶工程是利用酶所特有的生物催化性能,將酶學(xué)理論與化工技術(shù)結(jié)合而成的一門生物技術(shù)。也就是利用離體酶或者直接利用微生物細胞,動植物細胞,細胞器的特定功能,借助于工程學(xué)手段來生產(chǎn)酶制劑并應(yīng)用于相關(guān)行業(yè)的一門科學(xué)。細胞工程的定義:是利用細胞生物學(xué)和分子生物學(xué)技術(shù),通過類似于工程學(xué)的步驟,在細胞整體水平或細胞器水平上,按照人們的意愿改變細胞內(nèi)的遺傳物質(zhì)已獲得新型生物或特定細胞產(chǎn)品的一門綜合性科學(xué)技術(shù)。蛋白質(zhì)工程的定義:蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)和功能的研究為基礎(chǔ),運用遺傳工程的方法,借助計算機信息處理技術(shù)的支持,從改變或合成基因入手,定向地改造天然蛋白質(zhì)或設(shè)計全新的人工蛋白質(zhì)使之具有特定的結(jié)構(gòu)、性質(zhì)和功能,能更好地為人類服務(wù)的一種生物技術(shù)。生物技術(shù):農(nóng)業(yè)生物技術(shù)、醫(yī)藥生物技術(shù)、食品生物技術(shù)、海洋生物
生物技術(shù)重點!!228出品質(zhì)量保障誰用誰請客生物技術(shù)重點!!技術(shù)、環(huán)境生物技術(shù)、能源生物技術(shù)食品生物技術(shù)(foodbiotechnology):是生物技術(shù)在食品原料生產(chǎn)、加工和制造應(yīng)用的一個學(xué)科。?食品生物工程下游技術(shù)從由基因工程獲得的動物、植物和微生物的有機體或器官中,從細胞工程、發(fā)酵工程和酶工程產(chǎn)物(發(fā)酵液、培養(yǎng)液)中,把目標(biāo)化合物分離純化出來,使之達到商業(yè)應(yīng)用目的的過程。食品發(fā)酵和釀造等最古老的生物技術(shù)加工過程,也包括了①應(yīng)用現(xiàn)代生物技術(shù)改良食品原料的加工品質(zhì)基因,生產(chǎn)高質(zhì)量的農(nóng)產(chǎn)品。②制造食品添加劑。③植物和動物細胞的培養(yǎng)。④與食品加工和制造相關(guān)的其它生物技術(shù),如:酶工程、蛋白質(zhì)工程和酶分子進化工程等。組成DNA的基本單位是四種脫氧核苷酸,dAMP,dGMP,dCMP,dTMP通過3’,5’(3’-羥基和5,-磷酸)一一磷酸二酯鍵一定順序相基因工程的最大特點1、打破生物種屬界限2、進行生物種內(nèi)外基因的重組、遺傳信息的轉(zhuǎn)移重組DNA技術(shù):DNA克隆、分子克隆、基因克隆?;蚬こ毯诵模禾撬峁羌苌锛夹g(shù)重點!!228出品質(zhì)量保障誰用誰請客基因工程的研究內(nèi)容1、目的基因的獲取2、構(gòu)成重組DNA--目的基因與載體的重組3、將重組DNA轉(zhuǎn)移或?qū)氲绞荏w或宿主細胞4、篩選重組轉(zhuǎn)化體陽性克隆5、從篩選出的陽性克隆中提取出擴增的重組DNA分子或基因供分析和研究使用-使目的基因在受體細胞中高效表達生物技術(shù)重點!!228出品質(zhì)量保障誰用誰請客OH*OH核昔一璘贏(NMP)核昔二磷酸(NDP)7核昔三璘酸(NTP)核昔及核甘酸的結(jié)構(gòu)通式途中土脫氧核苔(酸)此處無氧原子,N代表任何一種核昔?3-1根酸中主要的含氮頓?植管、植智酸的名希股其代號桃音tMutkoddei核普酸fNHtckmW5M7A核群核音門械甘酸t(yī)NM曾腺嗓喳<A**adsninfJ掾r^dErtosine)脆背聯(lián)1聲MF)0修畛VGi良uaEiine)鳥并f^mnu£ide)鳥甘酸(GMP)胞瑞?ItCiCytufline)抱昔(的ytidinG胞昔酸0CMP1屈唐吟fu.u摩C說碰音tinidinE俄甘酸BMF)1J.NA脫氧榛節(jié)T般艮核甘酸:MNMP)臊噪吟£A■ridcniiw)脆氧腺節(jié)(deaHLyadeno^i,^e)脫銃相甘酸EAM心烏噫吟?3>SUinino)股,幅電舒tdeaK/guanosinc)腹乳鳥甘酸3GMP;胞唯嵯〔廣脫氣胞甘《dsM產(chǎn)yrlditie)脫氧胭FSVdCMPl的原普淀tT?工】kymimG脫氧梅甘<dmx/ihymidine)_限零物肯量MTMP, 注二,A、<hU、C、T除了用來代;表相應(yīng)的含期械基之外?還常常就用來表示相應(yīng)的核寸和穆什的,見本事行欄3在脫角枝甚觸代號之前加上小學(xué)的白以羲示脫策型“228出品質(zhì)量保障誰用誰請客228出品質(zhì)量保障誰用誰請客1,一級結(jié)構(gòu)組成口NA的基本單位是四種脫氧核甘酸一改ME,4SME照MPBMPI通過3',5,(甲舞基和5,消酸)一磷酸一酯鍵一定順序相連JJ糖酸骨架\堿基從骨架側(cè)向突出DNA的一級結(jié)構(gòu)—DNA分干多核甘酸鏈中4種脫氧核昔酸的排列順序喊基的排列順序每條DNA鏈都有方向性二5,末端-末端5,磷酸基未形成磷酸二酯鍵的一端3,末端一末端3「果基未被酯化的一端基因工程工具酶一在基因工程中所用各種酶的統(tǒng)稱其種類繁多,作用各異,主要包括如下幾種酶
I「?限制性內(nèi)切核酸酶?DNA甲基化酶?DNA聚合酶一v?依賴于DNA的RNA聚合醵 ?連接醵激酶 ?磷酸醵 ?核酸酶生物技術(shù)重點!! 228出品質(zhì)量保障誰用誰請客?限制性內(nèi)切核酸酶限制作用(Restriction)I是指一定類型的細菌可以通過其限制性內(nèi)切核酸酶的作用,切的降解入侵的外源DNA(例如噬菌體DNA等)使得外源DNA入侵受到限制的現(xiàn)象。修飾作用(Modification)是指在DNA甲基化醇的作用下,生物體自身DNA分子在特定破基的特定位置上發(fā)生甲基化而得到修飾,從而免遭自身限制性內(nèi)切核酸醒降解的現(xiàn)象.?限制性內(nèi)切核酸酶(restrictionendonuclease,RE)簡稱內(nèi)切酶是指一類能夠識別和切割雙鏈DNA分子內(nèi)核苷酸序列的內(nèi)切核酸酶。?DNA甲基化酶(DNAmethycase)簡稱甲基化酶是指一類能夠識別口岫特定序列,并其特定堿基的特定位置上引入甲基而發(fā)生修飾作用的酶?!拗泼负图谆钢饕菑亩喾N微生物中分離純化而來的。228出品質(zhì)量保障誰用誰請客228出品質(zhì)量保障誰用誰請客命名和分類工①寄主微生物屬名的頭個字母一大寫一k組成的三字母(斜體字)②種科的前兩個字母-小寫一 為其基本形式氣貓串曲;曲擊汨濘海道或臉擊潮淋道乳x&m玄虹溟踴麋通的演;曲的浙游海海;踴§I③當(dāng)微生物具有特殊名稱時卜則將代表該特殊名稱的符號加在三個字母后面,非斜體字例如:「例如:「菌株中分離出來的前后順序,羅馬數(shù)字Hfcdllld前株中分離出來的第三個福嗜血甘苗屬 流行性感冒桂園Hfcdllld前株中分離出來的第三個福掇骸設(shè)血/歌你加勃工裴.同屬不同種的兩種微生物的種名相同一前2個字母相同時好同助口蠹由血皮口利國Mu受0翻e(副流感嗜血桿菌〕—*胸?rno姐姐照明敏3幽瑟(副溶血嗜血桿菌)一Hph?限制性內(nèi)切醯一般以提取這類醯生物的(屬)名和(種)名的第(32)個字母以及菌株(型)的(代號)來命名。如果從同一生物中先后提取到多種限制性核酸內(nèi)切醇,則依次用羅馬數(shù)字加以區(qū)分。例如H加。in表示從(Waemopft/(wsinfluenzae或流感嗜血桿菌)菌(英文)株(d)中分離出來的第(3)種限制性內(nèi)切醇.?EcoRI表示從(Escherichiacoli或大腸埃希氏菌)菌株RY13中分離出的第(1)種限制性內(nèi)切酶。
228出品質(zhì)量保障誰用誰請客228出品質(zhì)量保障誰用誰請客限制性內(nèi)切核酸酶分類工根據(jù)酶的性質(zhì),可將限制酶分為三個類型且切割作用點隨機1型限制酶不宜K作為基因工程的工具酶I型;其切割位點距其識別位點至少1000bp且切割作用點隨機1型限制酶不宜K作為基因工程的工具酶例如&qAI、箕。BI.EsDI、EcoKIo〈II型工其切割位點與其通別位點重疊或在其附近]II型限制性內(nèi)切酶是
基因工程的理想工具酶I II型限制性內(nèi)切酶是
基因工程的理想工具酶例如BamHI,期RI?Hindffl」l山型;其切割位點一般在距識別位點3,端24-26bp處m型限制酶在基因工程中也不常用Ey(pyrimi就四)-i]密噴類含氮堿一c或tEutpuiins)一口票嶺類含氮堿fa或g切割方式:r-。形成雙鏈平齊末端根據(jù)雙鏈DNA被一。形成5'磷酸端2—5個核昔酸突出切割所成的末端 單鏈粘性末端-。形成3'羥基端2—5個核昔酸突出單鏈粘性末端同裂酶:在n型限制性內(nèi)切核酸酶中,來源不同而識別序列和切割方式相同者稱為同裂酶例如:HpanMspI,兩者的識別序列都是CCGG同尾酶:雖來源及識別序列不同,但DNA經(jīng)其切割后能形成相同粘性末端者稱為同尾酶?;蚬こ梯d體(Vactor):質(zhì)粒載體(plasmid)-細菌等生物細胞內(nèi)一類能自我復(fù)制的遺傳物質(zhì)生物技術(shù)重點?。?228出品質(zhì)量保障誰用誰請客噬菌體載體(bacteriophage)-細菌病毒的總稱柯斯質(zhì)粒載體(cosmidvactor)?按照介導(dǎo)的作用目的分類:克隆載體、表達載體?按照介導(dǎo)的受體生物分類:大腸桿菌載體(原核生物)、酵母載體(真核生物)、植物載體(病毒)、動物載體啟動子(promoter):DNA轉(zhuǎn)錄起點部位的DNA序列增強子(enhancer):使DNA轉(zhuǎn)錄加速的DNA序列衰減子(attenuator):使DNA轉(zhuǎn)錄衰減的DNA序列終止子(terminator):使DNA轉(zhuǎn)錄終止的DNA序列操縱基因(operator):直接負責(zé)DNA轉(zhuǎn)錄開啟和關(guān)閉的DNA序列理想的載體應(yīng)具備的基本條件:①能自主穩(wěn)定復(fù)制②應(yīng)具有一個以上的單一限制性內(nèi)切酹位點,以便目的基因插入③具有某些容易檢測的遺傳標(biāo)記(如:抗藥性、氨基酸合成酶,空斑形成等)④插入口的基因的幅度較寬@分子量小,拷貝數(shù)高⑥對于表達載體還應(yīng)配備與寄主細胞相適應(yīng)的啟動子,前導(dǎo)序列,加尾信號,增強子等口NA調(diào)控元件10228出品質(zhì)量保障誰用誰請客228出品質(zhì)量保障誰用誰請客PBR322質(zhì)粒的優(yōu)點:①分子質(zhì)量較小,易于進行重組克?、诳截悢?shù)高一每個細胞可累計高達1000-3000個質(zhì)??截悺缚拱毖蚯喽舅鼗蛞虎劬哂锌咕乜剐曰?L抗四環(huán)素抗性基因一ifer「如果將外源DMA插入到上述BamHI等9種或舐aI等三種限制位點上會導(dǎo)致施安基因或麴『基因的失活I(lǐng)針對這一缺陷構(gòu)建PBR322衍生質(zhì)粒2,質(zhì)粒載體pUC19aUG一美國加利福尼亞大學(xué)(UniversityofCalifornia)的科學(xué)家構(gòu)建外PBR322—使用廣泛,但帶的單一克隆位點較少,篩選程序還較費時間PBR322的基礎(chǔ)上發(fā)展了質(zhì)粒曲;口UC19.DUC18.OUC7廣①目的基因的獲?、跇?gòu)成重組DNA一目的基因與載體的重組基因工程的研究內(nèi)容<③將重組DNA轉(zhuǎn)移或?qū)氲绞荏w或宿主細胞@篩選重組轉(zhuǎn)化體陽性克隆、5)從篩選出的陽性克隆中提取出擴增的重組DNA分子或基因供分析和研究使用-使0的基因在受體細胞中高效表達PCR技術(shù):定義:PCR技術(shù)又稱聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(polymerase
生物技術(shù)重點!! 228出品質(zhì)量保障誰用誰請客chainreaction),是通過模擬體內(nèi)DNA復(fù)制的方式,在體外選擇性地將DNA某個特殊區(qū)域擴增出來的技術(shù)。PCR技術(shù)的基本原理在微量離心管中,加入適量的緩沖液,微量的模板DNA,四種脫氧單核昔酸,耐熱性多聚酶,一對合成DNA的引物,通過高溫變性、低溫退火和中溫延伸三個階段為一個循環(huán)的反應(yīng)過程,每一次循環(huán)使特異區(qū)段的基因拷貝數(shù)放大一倍,一般樣品是經(jīng)過30次循環(huán),最終使基因放大了數(shù)百萬倍;擴增了特異區(qū)段的DNA帶。①模板:單鏈或雙鏈DNA②引物:16?30bp合成的寡核苜酸PCR基本要素③DNA聚合酶:耐熱的DNA聚合酶PCR基本要素④底物:四種脫氧三磷酸核甘⑤Mg2+=DNA聚合酶的激活劑轉(zhuǎn)化(transformation):是感受態(tài)的大腸桿菌細胞接受及表達質(zhì)粒DNA分子的生命過程轉(zhuǎn)染(transfection):是感受態(tài)的大腸桿菌細胞接受及表達噬菌體DNA分子的的生命過程ICP基因工程概念:ICP基因工程主要運用膿桿菌介導(dǎo)法,基因槍法等對植物進行ICP基因12生物技術(shù)重點??! 228出品質(zhì)量保障誰用誰請客遺傳轉(zhuǎn)化,借助于伴胞晶體蛋白的毒性,達到抗蟲害的目的的工程之 。r大腸桿菌轉(zhuǎn)化法酵母轉(zhuǎn)化法根據(jù)受體生物主要分為<植物細胞轉(zhuǎn)化法:動物細胞轉(zhuǎn)化法大腸桿菌轉(zhuǎn)優(yōu)法一|氯化鈣轉(zhuǎn)化癥對數(shù)生長期的大腸桿菌—懸浮于冰預(yù)冷的低滲CaCIN溶液中I大使細胞膜通透性增加
I然后加入重組DNA\使DNA與鈣離子形成復(fù)合物,吸附于細胞表面經(jīng)42七短暫熱處理促進外源DNA進入感受態(tài)細胞13生物技術(shù)重點!!ICP基因工程;228出品質(zhì)量保障誰用誰請客這種蛋白被稱作殺蟲結(jié)晶蛋白(insecticidalcrystal四期也Xf)有活性的毒性分子(6-內(nèi)毒素.也;冢1出雙疝?使細胞由于滲透平衡被破壞而破裂昆蟲幼蟲將停止進食,最終死亡ICP基因來自于蘇云金桿菌(BacillusJ■極頒照破原Rt>「在另一端形成胞晶體[蘇云金桿菌的營養(yǎng)體發(fā)育到一定階段后T在其_端形成芽胞;當(dāng)昆蟲吞噬伴胞晶體后活化后的ICP昆蟲腸道上皮細胞上的特異性結(jié)合蛋白轉(zhuǎn)型為毒性多肽分子一轉(zhuǎn)型后的CP全部或部分的嵌合于細胞膜■細胞膜產(chǎn)生一些孔道基因工程在食品科學(xué)中的應(yīng)用一、基因工程與動物、植物和微生物產(chǎn)品品質(zhì)的改良(一)培育抗病蟲害抗除草劑的植物新品種及抗凍動物新品種的基因工程(二)改良微生物菌種特性的基因工程(二)改良微生物菌種特性的基因工程面包酵母I-具有優(yōu)良特性的酶產(chǎn)因轉(zhuǎn)移至該菌種中使該國種含有麥芽(透性酶及麥芽糖酶比普通面包酵母制造產(chǎn)生的二氧化碳量也高一面包膨脹性能良好,松軟可口微生物菌種在面包烘烤過程中會被殺死一利用其制造因面包食品是安全(三)改良動植物品種質(zhì)量的基因工程14
生物技術(shù)重點!!228出品質(zhì)量保障誰用誰請客生物技術(shù)重點!!1、改良谷物種子貯藏蛋白的基因工程2、改良脂肪酸組成的基因工程3、增加果實甜度的基因工程4、提高果實可溶性固形物含量的基因工程5、提高果實等器官組織微量元素含量的基因工程6、提高動物生長速度,增加動物營養(yǎng)價值的基因工程二、基因工程與植物產(chǎn)品的貯藏保鮮[①PG基因工程(構(gòu)成反義PG基因,降解PG的活性)②AAG合成酶基因工程(反義RNA技術(shù))“③乙烯形成酶基因工程J④ACC脫氨酶基因工程三、基因工程與食品資源的開發(fā):非洲的應(yīng)樂果蛋白第三章發(fā)酵工程原理及其在食品工業(yè)中的應(yīng)用?菌種保藏現(xiàn)行的菌種保藏方法有下列諸種二、低溫保藏法2、低溫定期移植法3、石蠟油低溫保藏法,4、干燥保藏I5、甘油管保管法6、真空冷凍干燥法液態(tài)超低溫保存15
生物技術(shù)重點!!228出品質(zhì)量保障誰用誰請客生物技術(shù)重點!!228出品質(zhì)量保障誰用誰請客AnKafl期dn(yellow)Moq^SSIO(yellow)?菌種活化與擴大培養(yǎng):是指將保存的處于休眠狀態(tài)的生產(chǎn)菌種接入試管斜面培養(yǎng)活化后,再經(jīng)過茄子瓶或搖瓶及種子罐逐級擴大培養(yǎng)而獲得一定數(shù)量和質(zhì)量的純種過程。這些純種培養(yǎng)物又稱為種子。功能性食品(Functionalfood):又稱保健功能食品(Funtionalhealthfood),是指具有調(diào)節(jié)人體生理功能,適宜特定人群食用,不以治療疾病為目的的一類食品。這類食品既具有普通食品的營養(yǎng)功能和感官功能,還具備調(diào)節(jié)人體生理功能的作用。功能性食品與一般食品的區(qū)別:共同點f都能提供人體生存必需的基本營養(yǎng)物質(zhì),都具有色,香,味,形等感官功能。區(qū)別f1.功能性食品f含有一定量的功效成分,具有調(diào)節(jié)人體機能16
228出品質(zhì)量保障誰用誰請客228出品質(zhì)量保障誰用誰請客的功效,而一般食品不強調(diào)其特定的生理功能。功能性食品與藥品的區(qū)別:藥品f是治療疾病的物質(zhì),必須在醫(yī)生的指導(dǎo)下使用,允許一定程度的毒副作用存在功能性食品一本質(zhì)仍然是食品,它具有調(diào)節(jié)人體某種機能的作用但它不能取代藥物用于治療疾病.功能性食品*★對于生埋機能正常,想要維護健康或預(yù)防某種疾病的人群是一種營養(yǎng)補充劑,*必須達到現(xiàn)代毒理學(xué)上的基本無毒或無毒.☆無需醫(yī)生的處方口左在正常攝入范圍內(nèi)不能帶來任何的毒副作用17
生物技術(shù)重點!!228出品質(zhì)量保障誰用誰請客生物技術(shù)重點!!第三節(jié)發(fā)麻工藝控制一、溫度對發(fā)酵的影響以及控制二.溶解氧濃度對發(fā)酵的影響及監(jiān)控三rpH對發(fā)酵的影響及控制五一基質(zhì)濃度對發(fā)酵的影響及補料控制六.泡沫控制七、發(fā)酵終點判斷[增強機體免疫功能抗腫瘤活性多糖的生理功能<降血脂抗衰老活性多糖的生理功能<降血脂抗衰老<抗菌、抗病毒活性肽的三種生理功能:促免疫,降血壓,促進鈣吸收谷胱甘肽(Glutathion,GSH)是谷氨酸、半胱氨酸和甘氨酸,通過肽鍵縮合而成的三肽化合物。谷胱甘肽的結(jié)構(gòu)特點:分子中有一個特殊的肽鍵(谷氨酸的Y-羧基與半胱氨酸的a-氨基縮合二成肽鍵);谷胱甘肽中含有一個活潑的巰基(-SH)易被氧化脫氫還原型:GSH氧化型:GSHG18228出品質(zhì)量保障誰用誰請客228出品質(zhì)量保障誰用誰請客.咨胱甘肽的生理功能二①GSH可以清除自由基,能起到強有力的保護作用②GSH對于放射線.放射線藥物或由于抗腫搐藥物所引起的白細胞減少等癥狀能夠起到弓雖有力的保護作用:③GSH與進入機體的有毒化合物、重金屬離子或致癌物械等相結(jié)合并促進排出體外,起到了中和解毒的作用,臨床上已應(yīng)用GSH來解除丙烯造、氟化物、一氧化族(CO)、重金屬、有機試劑等的中毒現(xiàn)象;④GSH可以阻止H2O2的氧化血紅細胞f保證血紅蛋白能持續(xù)發(fā)揮輸氧功能⑤GSH還能保護含前基醒分子中的?SH基f有利于醒活性的發(fā)揮,并且能恢復(fù)已被破壞的醒分子中的-SH的活性功能一使能重新恢復(fù)活性:?GSH述可以抑制乙醇侵害肝臟產(chǎn)生脂肪肝.降血壓肽降血壓肽調(diào)節(jié)血壓活性過程如下.血管¥素原 腎素廣體血管緊張素I 腎素 (血管緊張素轉(zhuǎn)移酶)JY ACE(iBjpteDiinconvertingenzyme)血管緊張素n(使末端血管收縮)抑帶ACE活性導(dǎo)致血壓升高降血壓肽(圖二pip二prpjjfe-p「o-p「。)B■酪蛋白Lactobacillus 閱圖媛(瑞士乳桿菌)19生物技術(shù)重點??! 228出品質(zhì)量保障誰用誰請客甘酸酸(GfccU娛) 丙氨酸(AJ骸繳氨酸(YalinQ亮氨酸。加可口0) 異亮甘酸(laoteMine)脯氨酸(ErWin。苯丙氨酸(Phenylalanine) 酪氨酸(TyrosM)色氨酸(Tntntostwi:半胱氨酸(Cysteine)甲硫氨酸或蛋氨酸(MKWanine)絲氨酸(Serine)蘇氨酸(Ibl做曲娛)賴氨酸(Lysine)精氨峻(Aigjnij媛) 組氨酸(bktidin爰天冬氨酸(Asparticacid)天冬酰胺(人0期第批照)谷氨酸(期式掰nfcacid)咎氨酰胺(G1M炮nmiQg).酪蛋白磷酸肽(CaseinphQ黃phQr*RtidaCPP)促鈣吸收肽》牛乳酪蛋白為原料經(jīng)單一酶或復(fù)合酶水解,再經(jīng)分離純化而得到的,含有成串的磷酸第氨基的肽.來自口?酪蛋白的稱為口-CPP 它們主要含有來自P?酪蛋白的稱為D?CPP 成串的璘酸絲氨酸(班膜PhQ戰(zhàn)口愿)CPP與鈣、鐵一起配合使用:L促進兒童骨骼發(fā)育、牙齒生長:Y預(yù)防和改善骨質(zhì)疏松癥:I促進骨骼患者康復(fù)和預(yù)防貧血;常用乳桿菌的種類:乳桿菌屬(Lactobacillus鏈球菌屬(Streptococcus)(增強機體免疫力)明串珠球菌屬(Pediococcus)20生物技術(shù)重點?。?228出品質(zhì)量保障誰用誰請客「嗜酸乳桿菌4斑燭感颯微生態(tài)制劑中常用的菌種==c?保加利亞乳桿菌()〔植物乳桿菌CLsfatOaiw)四、發(fā)酵法生產(chǎn)功能微量元素硒、錯—人體必需的微量元素一|天然食品中硒、錯有機物(有活性)的形式存在,但含量很低礦物質(zhì)亞硒酸鈉等無機硒一對人體的毒性太大,只能用于醫(yī)藥達到治療的目的不能用于食品達到補充營養(yǎng)的目的有機褚—有明顯的生理活性通過生物轉(zhuǎn)化一^無機硒有機硒可以提高硒的生理活性與吸收率,并降低其毒性r有機硒的生理功能—抗氧化,提高免疫力,降低癌癥的發(fā)病率有機錯的生理功能—具有抗氧化,降低血脂等作用的記載,但對人體的生理調(diào)節(jié)作用沒有有機硒明顯黃原膠的發(fā)酵法生產(chǎn):生產(chǎn)菌種:野油菜黃單胞菌:?發(fā)酵工藝流程?分離、提取V純化「飲料、冷食.調(diào)味料、奶制品中可作為乳化穩(wěn)定劑黃原膠在食品工業(yè)中的應(yīng)用T〔并可改進口感和增強風(fēng)味結(jié)冷膠的發(fā)酵法生產(chǎn)少動鞘脂單孢菌(SpningomonascampestriS21生物技術(shù)重點??! 228出品質(zhì)量保障誰用誰請客結(jié)冷膠在食品工業(yè)中的應(yīng)用結(jié)冷膠不僅作為一種膠海劑?更重要的是可以賦予食品優(yōu)良的質(zhì)地和口感O通常可與多種食品股配合使用.使產(chǎn)品獲得最佳的產(chǎn)品結(jié)構(gòu)和穩(wěn)定性主要應(yīng)用于糖果,果凍,果醬,餡餅,布丁類等食品的加工海藻糖在食品工業(yè)中的應(yīng)用:用作食品添加劑或食品甜味劑,可使某些干燥食品在重新得水后仍保持原有的形狀22
228出品質(zhì)量保障誰用誰請客228出品質(zhì)量保障誰用誰請客第四章酶工程酶工程:(enzymeengieering)是又稱酶技術(shù),就是利用酶催化作用,在一定的生物反應(yīng)器中將相應(yīng)的原料轉(zhuǎn)化成所需要的產(chǎn)品的過程,它是酶學(xué)理論與化工技術(shù)結(jié)合而成的一種新技術(shù)。酶活性中心:組成具有特定空間結(jié)構(gòu)的區(qū)域,能與底物特意結(jié)合并底物轉(zhuǎn)化為產(chǎn)物,這一區(qū)域從稱為酶的活性中心。酶活性中心內(nèi)的必需基團「結(jié)合基團一與底物相結(jié)合使底物與酶形成復(fù)合物催化基團f影響底物中某些化學(xué)鍵的穩(wěn)定性催化底物發(fā)生化學(xué)反應(yīng)并使之轉(zhuǎn)化為產(chǎn)物固定化酶的制備方法:共價鍵結(jié)合法吸附法交聯(lián)法包埋法機械破碎法記種類:胞外酶一分泌透過細胞壁到細胞外部的酶一胞外酷則無需破碎胞內(nèi)酶—存在于細胞內(nèi)部的酹一胞內(nèi)酶的提取,需要破碎技術(shù)酶溶法,化學(xué)滲透法—非機械破碎法Ir高壓勻漿法,珠磨法,超聲破碎法—機械破碎法酶的提?。菏侵冈谝欢l件下,用適當(dāng)?shù)娜軇┨幚砗冈?,使酶充分溶解到溶劑中的過程,也稱作酶的抽提,酶的初步純化?!涪冫}溶液提取酶提取的常用方法②酸溶液提取③堿溶液提取、④有機溶劑提取酶提取的常用方法凝膠過濾法中常用的凝膠交聯(lián)葡聚糖凝膠(Sephadex)交聯(lián)瓊脂糖凝膠(Sepharose)聚丙烯酰胺凝膠(Biogel)23生物技術(shù)重點!!228出品質(zhì)量保障誰用誰請客酶命冬其濾0融B囑commission)—>國際睥學(xué)委員會國際分類法:某一種海f都有其一定的系統(tǒng)編號—采用四碼結(jié)號方法I每個號碼之間用胭點"第一個號碼f表示該醮屬于六大類中的某一類第二個號碼f屬F該類中的某一亞類四碼端號一><第三個號碼一屬于該亞類中的某一小類J第四個號碼f表示該小類中的序號淀粉糖加工利用的4種淀粉酶-氧化還原酯(Oxidoreductases)轉(zhuǎn)移酶類(Transferases)水解酶類(Hydro舊等es)一、聚含蹄類(Lya£H5)或裂和悔異構(gòu)酶類(惶口m白的“幻、連接幅類(Ligase)a-淀粉酶從淀粉分子的內(nèi)部切開a-1.4糖昔鍵,但不能水解a-1.6糖昔鍵和及靠近a-1.6糖背鍵的幾個a-1.4糖背鍵。B-淀粉酶從淀粉分子的非還原末端逐個切下麥芽糖單位,但不能水解a-1.6糖背鍵和及靠近a-1.6糖背鍵的幾個a-1.4糖背鍵。葡萄糖淀粉酶從淀粉分子的非還原末端逐個切下葡萄糖單位,它既能水解a-1.4糖昔鍵,也能水解a-1.6糖背鍵。由于形成的產(chǎn)物幾乎都是葡萄糖,因此稱為糖化酶。異淀粉酶專一水解a-1.6糖昔鍵。因此能切開支鏈淀粉的分支。DE、DP值?低聚糖的功能在工業(yè)中分解淀粉時以dextrg更右旋糖,葡萄糖)的當(dāng)量(隹quNaient}D,£來表示口1.促使雙岐桿曲的憎值,調(diào)節(jié)腸道血群2,抑制內(nèi)毒素,保護肝臟功能口E二 淀粉水解物中的還原中《以葡萄播計)全體固形物成分果膠酶一果汁澄清,果酒澄清,DPfdegneeofpolymerization) 重合度,聚合度3,調(diào)節(jié)胃腸功能,防止便秘和腹瀉X10 4.激活免疫,抗衰老和抗腫瘤柑去囊衣年:二清膽防-1r口二6,合成維生素工低能量或無能量,不會引起踽齒直連淀粉分子內(nèi)的a?葡萄糖的數(shù)量第五章細胞工程原理及其在食品工業(yè)中的應(yīng)用細胞工程(Cellengineering)的概念:細胞工程是利用細胞生物學(xué)和分子生物學(xué)技術(shù),通過類似于工程學(xué)的步驟,在細胞整體水平或細胞器水平上,按照人們的意愿改變細胞內(nèi)的遺傳物質(zhì)以獲得新型生物或特定細胞產(chǎn)品的一門綜合性科學(xué)技術(shù)。細胞融合的定義:是利用自然或人工的方法使兩個或幾個不同細胞融合為一個細胞,用于制造新的物種或品系及產(chǎn)生單克隆抗體等。細胞拆分的定義:細胞拆分又稱細胞質(zhì)工程,是通過物理或化學(xué)方法將細胞質(zhì)與細胞核分開,再進行不同細胞間核質(zhì)的重新組合,重建成新細胞,也包括各種細胞器的分離和重新組合,可用于研究細胞核與細胞質(zhì)的關(guān)系的基礎(chǔ)研究和育種工作。24
228出品質(zhì)量保障誰用誰請客228出品質(zhì)量保障誰用誰請客核移植技術(shù):定義一一是指將不同發(fā)育時期的胚胎或成體動物的細胞核,利用顯微技術(shù)和細胞融合方法一移植到去核卵母細胞中一重新組成胚胎并使之發(fā)育成熟的過程。舉例說明(P269):O鯉魚和鯨魚一兩種常見的魚一鯽魚(特點)T味道鮮美,容易繁殖和飼養(yǎng),但個體?。跢-鯉魚T生長迅速,個體大,但是肉質(zhì)粗厚,味道差二這兩種魚問的雜甘于遠掾雜交因此用傳統(tǒng)的方%很少能獲得成功采用核移植技術(shù)將鯉魚的胚土細胞核移植到鯽魚的去核卵中獲得第一手鯉肥移核個體這種魚非長到性成熟,并能產(chǎn)生后代目前已經(jīng)獲得了第四代移核魚產(chǎn)生長速度快一士肌肉蛋盲質(zhì)含量比細魚高&7弱q脂肪含量比鯉魚低5一50%動物細胞培養(yǎng):Cellculturemethod2.冷凍cell操作工1.MediapreparationDMEM(5(X)ml)+DMEM(5(X)ml)+FBS(50ml)+Antibiotics(5ml)tOtoWimumessentialmedium)dMEM(Du|begggJsmodifiedEaglesmedium)國劍演Ibovineserum)FBS:冷凍貯藏一解派后在50+60Ej30-40mininactivation?warnn-upmediaat37七Jn50mltube 20ml?髓膿匐)f用手搓f解每一用塊時添加到,迷mediacentriftigeat1500『pmfor3min..pellet+newmedia(6ml)-100mmplate分注+media(6nnii)incubationat37T,5%C02for2-3daysubcultureofcell卬:解M-E□丁A頊先解凍.PBSwith7。舟alcohol.Mediadiscard7-lOinlPBSwashing0.25%Xj55in-tl>TA3nilAdd--W7minin5QmltubeMedia7mlAddcentrifneeMediadiscardnewmediaAddplate分注十mediaAddinw由Uqd沛37£ -for2day&DTA(Ethylene第3tetraacetic總cid,乙—改匹乙酸)植物細胞工程及其在食品工程中的應(yīng)用(簡答或論述P275)25生物技術(shù)重點??! 228出品質(zhì)量保障誰用誰請客植物細胞工程是細胞工程的一個重要組成部分,主要包括,植物細胞培養(yǎng)技術(shù),細胞遺傳操作技術(shù),細胞保藏技術(shù),細胞培養(yǎng)技術(shù)等。研究起步較早,各種培養(yǎng)物的制備及其他很多操作方法已經(jīng)基本成熟和規(guī)范化.?植物細胞培養(yǎng)及其在食品中的應(yīng)用二人們已知的3萬多種這類天然產(chǎn)物中有80%來源于高等植物,如色素,香料,調(diào)味品.蛋白酶抑制劑和植物腫瘤抑制劑等需求量增長很快一《植;I::;'}這些物質(zhì)的供應(yīng)受到嚴重限制原生質(zhì)體融合:通過酶解作用將兩個親株的細胞壁去除,在高滲條件下釋放出只有原生質(zhì)膜包被著的球狀原生質(zhì)體。然后將兩個親株的原生質(zhì)體在高滲條件下混合,加入融合促進劑聚乙二醇,仙臺病毒(生物)或電融合等助融,使它們相互凝集。通過細胞質(zhì)融合,促使兩套基因組之間的接觸,交換,遺傳重組,在適宜條件下使細胞再生,在再生的細胞中獲得重組體。原生質(zhì)體融合技術(shù)的特點:.重組頻率較高。由于沒有細胞壁的阻礙,且在原生質(zhì)體融合時又加入融合促進劑,所以微生物的原生質(zhì)體間的雜交頻率明顯高于常規(guī)的雜交方法。.受接合型或致育性的限制較小。兩親株中任何一株都可能起受體或供體的作用,因而有利于不同屬間微生物的雜交。另外,原生質(zhì)體融合是和性無關(guān)的雜交,所以受接合型或致育性的限制比較小。.重組體種類較多。由于原生質(zhì)體融合后,兩個親株的整個基因之間發(fā)生相互接觸,有機會發(fā)生多次交換,產(chǎn)生各種各樣的基因組而得到多種類型的重組子;參與融合的親株不限于兩株,這是常規(guī)的雜交所達不到的。第六章蛋白質(zhì)工程蛋白質(zhì)工程的定義:蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)和功能的研究為基礎(chǔ),運用遺傳工程的方法,借助計算機信息處理技術(shù)的支持,從改變或合成基因入手,定向地改造天然蛋白質(zhì)或設(shè)計全新的人工蛋白質(zhì)使之具有特定的結(jié)構(gòu)、性質(zhì)和功能,能更好地為人類服務(wù)的一種生物技術(shù)。蛋白質(zhì)工程舉例一葡萄糖異構(gòu)酶(P310)_最冠pH70—9.0——>微偏瞳性糖不穩(wěn)定j1荀萄糖異■構(gòu)普 易工化使苣金率下降’、最適溫度70—80TC高溫條件一>有利于反應(yīng)進程的加快和平衡點的向果糖方向移動 “26
228出品質(zhì)量保障誰用誰請客228出品質(zhì)量保障誰用誰請客生物工程下游技術(shù)生物工程下游技術(shù)7^[也叫下游工程(downstr日3mprocessing)、或生物活性物質(zhì)分離純化(andpurificationofbi
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