食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)

食品微生物學(xué)檢驗(yàn)

單核細(xì)胞增生李斯特氏菌檢驗(yàn)

Nationalfoodsafetystandard

Foodmicrobiologicalexamination:Listeriamonocytogenes

張秀麗河南省CDC概述李斯特氏菌的發(fā)現(xiàn)1926年由MurrayWebb和Swann從患有大單核白細(xì)胞增多癥的病兔體內(nèi)分離，命名為單核細(xì)胞增多桿菌（Bacteriummonocytogenes）。1940年P(guān)ine將本菌改為李斯特氏菌（listeria）。歸屬原核生物界乳桿菌科李斯特氏菌屬，共有8個(gè)種：?jiǎn)魏思?xì)胞增生李斯特氏菌（Listeriamonocytogenes）英諾克李斯特氏菌（L.Innocua）綿羊李斯特氏菌（L.Ivanovii）威爾斯李斯特氏菌（L.Welshimeri）西爾李斯特氏菌（L.Seeligeri）格氏李斯特氏菌（L.Grayi）默氏李斯特氏菌（L.Murrayi）脫氮李斯特氏菌（L.Denitrificans）

流行病學(xué)分布狀況

WHO1988年調(diào)查結(jié)果：

30%以上的肉及肉制品，15%的家禽，5%～15%的奶及奶制品，4%～8%的水產(chǎn)品均受到不同程度的污染。

流行病學(xué)傳播途徑垂直傳播傳播途徑-接觸傳播

流行病學(xué)流行特征易感人群：孕婦、胎兒、新生兒、老人及免疫力低下者

季節(jié)性：多散在發(fā)病，無(wú)明顯的季節(jié)性臨床表現(xiàn)病人初起常有胃腸炎的癥狀，繼爾出現(xiàn)腦膜炎癥候群，發(fā)熱，劇烈頭痛、惡心、嘔吐和頸部強(qiáng)直等，部分患者有驚厥，多在發(fā)病后24～48小時(shí)內(nèi)出現(xiàn)昏迷。少數(shù)病人起病緩慢，病程中癥狀可有暫時(shí)緩解。個(gè)別病人可表現(xiàn)為腦炎或腦膿腫，出現(xiàn)抽搐、偏癱、腦疝或其它局限性征象。感染本菌的孕婦會(huì)發(fā)生死胎、流產(chǎn)、產(chǎn)期敗血癥等，即使是活胎，嬰兒也常在分娩后短時(shí)間內(nèi)死亡。如果能夠幸存，也易患腦膜炎，導(dǎo)致智力缺陷或死亡。新生兒感染李斯特氏菌后，主要表現(xiàn)為呼吸急促、粘膜紫紺、嘔吐、尖叫或抽搐等。體溫多低于正常。皮膚常有出血性皮疹和化膿性結(jié)膜炎等。患腦膜炎的病人多同時(shí)存在敗血癥。孕婦、新生兒、免疫系統(tǒng)有缺陷的人易發(fā)病。病死率高達(dá)20%～50%，一般達(dá)30%。

檢驗(yàn)稱取25g待檢樣品加到225ml的LB1增菌液里，30℃培養(yǎng)24小時(shí)。檢驗(yàn)取LB2增菌液1環(huán)劃線接種于CHROMagor李斯特氏菌顯色培養(yǎng)基和PALCAM培養(yǎng)基上，36℃培養(yǎng)24小時(shí)。初篩微生物菌落顏色靈敏度單核增生李斯特菌藍(lán)色,有白色暈環(huán)近100%英諾克李斯特菌藍(lán)色---其它無(wú)色或被抑制---檢驗(yàn)挑取可疑菌落，接種鼠李糖，木糖，同時(shí)劃線TSA-YE檢驗(yàn)鼠李糖陽(yáng)性(變黃)，木糖陰性(不變)者，為可疑單增李斯特菌。檢驗(yàn)進(jìn)行革蘭氏染色和動(dòng)力觀察，李斯特氏菌為革蘭氏陽(yáng)性小桿菌，鏡下翻滾樣運(yùn)動(dòng)或旋轉(zhuǎn)樣運(yùn)動(dòng)。檢驗(yàn)將培養(yǎng)物接種下列生化反應(yīng)管和血平板，36℃培養(yǎng)24小時(shí)。生化反應(yīng)觸酶陽(yáng)性，氧化酶陰性，七葉苷陽(yáng)性；種的生化特征見(jiàn)下表：菌種溶血反應(yīng)硝酸鹽還原尿素酶MR/VP甘露醇鼠李糖木糖單核細(xì)胞增生李斯特氏菌綿羊李斯特氏菌英諾克李斯特氏菌威爾斯李斯特氏菌西爾李斯特氏菌格氏李斯特氏菌默爾李斯特氏菌++--+--------+-------+/++/++/++/++/++/+