動物細胞融合與單克隆抗體知識回顧植物細胞A（番茄）植物細胞B（馬鈴薯）去除細胞壁脫分化再分化原生質(zhì)體融合再生出細胞壁正在融合的原生質(zhì)體雜種細胞愈傷組織雜種植株(番茄-馬鈴薯)人鼠細胞雜交融合實驗動物細胞融合一、動物細胞融合技術(shù)1.概念動物細胞融合也稱細胞雜交，是指兩個或多個動物細胞結(jié)合形成一個細胞的過程。2.誘導(dǎo)方式物理法：化學(xué)法：生物法：滅活的病毒（如：仙臺病毒）電激、振動、離心聚乙二醇（PEG）一、動物細胞融合技術(shù)什么是滅活的病毒？滅活的病毒滅活喪失感染性、保留融合活性一、動物細胞融合技術(shù)4.融合原理：膜融合→質(zhì)融合→核融合2個核→1個核2個細胞→1雜交個細胞細胞膜的流動性3.融合過程：一、動物細胞融合技術(shù)5.動物細胞融合技術(shù)的意義和應(yīng)用：一、動物細胞融合技術(shù)小結(jié)：植物、動物細胞融合的比較比較項目植物體細胞雜交動物細胞融合原理細胞融合的方法誘導(dǎo)方法用途細胞膜的流動性、植物細胞全能性細胞膜的流動性去除細胞壁后誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合使細胞分散后誘導(dǎo)細胞融合物理法、化學(xué)法、物理法、化學(xué)法、生物法（滅活病毒）獲得雜種植株主要用于制備單克隆抗體

二、單克隆抗體制備閱讀教材P52的內(nèi)容，完成下列問題：1.抗體由哪種細胞產(chǎn)生？2.獲得抗體的傳統(tǒng)方法是什么？有哪些缺點？

二、單克隆抗體抗體：能夠與抗原發(fā)生特異性結(jié)合B淋巴細胞效應(yīng)B淋巴細胞記憶B淋巴細胞分化抗體強調(diào)：效應(yīng)B淋巴細胞是能夠產(chǎn)生抗體的B淋巴細胞，下文將其簡稱為B淋巴細胞抗體的傳統(tǒng)生產(chǎn)方法抗原反復(fù)注射動物從動物的血清中分離抗體該法制備抗體的缺點：產(chǎn)量低、純度低，且抗體的特異性差、靈敏度低。如何解決這個問題呢？單克隆抗體！二、單克隆抗體設(shè)想思路克隆單一的B淋巴細胞，形成細胞群，直接培養(yǎng)細胞提取單克隆抗體。每一個B淋巴細胞只能分泌一種特異性抗體；不同種類的B淋巴細胞分泌的抗體不同。人生總是很多憾事！如何解決這個問題呢？B淋巴細胞在體外培養(yǎng)時不能無限增殖，不能得到大量的單一性質(zhì)的抗體；1975年英國科學(xué)家米爾斯坦和柯勒的實驗一個B淋巴細胞只分泌一種特異性抗體骨髓瘤細胞能無限增殖雜交瘤細胞動物細胞培養(yǎng)技術(shù)設(shè)計方案：動物細胞融合技術(shù)單克隆抗體既能產(chǎn)生特異性抗體，又能無限增殖的細胞二、單克隆抗體的過程分析√BB

、B瘤、瘤瘤（B、瘤）（一選）選擇性培養(yǎng)基：只有雜交瘤細胞才能存活獲得產(chǎn)生相應(yīng)抗體的B細胞（二選）：選能產(chǎn)生所需專一抗體的雜交瘤細胞體外培養(yǎng)小鼠腹腔內(nèi)培養(yǎng)二、單克隆抗體的過程三、單克隆抗體的特點和應(yīng)用1.特點特異性強靈敏度高可大量制備診斷試劑治療疾病運載藥物2.應(yīng)用三、單克隆抗體的特點和應(yīng)用診斷試劑——最廣泛應(yīng)用準(zhǔn)確、高效、簡易、快速早早孕：由抗人絨毛膜促性腺激素單克隆抗體制成，懷孕時人絨毛膜促性腺激素（HCG）含量明顯升高，用相應(yīng)抗體檢測，靈敏度高，妊娠第8天即可檢出。

“生物導(dǎo)彈”＝單克隆抗體＋藥物

生物導(dǎo)彈

：

主要用于癌癥治療，單克隆抗體作為載體，運載抗癌藥物，形成“生物導(dǎo)彈”，準(zhǔn)確殺傷癌變細胞。優(yōu)點：作用位置準(zhǔn)確，不損傷正常的細胞，療效高，毒副作用小。本節(jié)小結(jié)兩個過程動物細胞培養(yǎng)過程單克隆抗體制備過程三個“一”一個誘導(dǎo)細胞融合的新方法

——滅活病毒一個新細胞——雜交瘤細胞一個優(yōu)勢——單克隆抗體特異性強、靈敏度高的優(yōu)勢重點1.科學(xué)家用小鼠骨髓瘤細胞與某種細胞融合，得到雜交細胞，經(jīng)培養(yǎng)可產(chǎn)生大量的單克隆抗體，與骨髓瘤細胞融合的是（）ＡA.經(jīng)過免疫的B淋巴細胞C.經(jīng)過免疫的T淋巴細胞B.不經(jīng)過免疫的T淋巴細胞D.不經(jīng)過免疫的B淋巴細胞跟蹤訓(xùn)練2.單克隆抗體是由下列哪種細胞產(chǎn)生的（）DA.

B淋巴細胞B．T淋巴細胞C．骨髓瘤細胞D．雜交瘤細胞3：胃癌是我國發(fā)生率很高的一種惡性疾病，制備抑制胃癌細胞增殖的單克隆抗體對治療胃癌具有重要意義?？刮赴﹩慰寺】贵w制備過程如下圖。人的胃癌細胞骨髓瘤細胞小鼠乙丙（專一抗體檢驗陽性）抗胃癌單克隆抗體注射篩選融合克隆化培養(yǎng)甲（1）抗胃癌單克隆抗體制備過程中要用到

和

技術(shù)。（2）甲代表

細胞。（3）通過檢測細胞是否產(chǎn)生所需的專一抗體，篩選出丙，該過程中所選用的抗原是

。動物細胞培養(yǎng)動物細胞融合B淋巴人的胃癌細胞3：胃癌是我國發(fā)生率很高的一種惡性疾病，制備抑制胃癌細胞增殖的單克隆抗體對治療胃癌具有重要意義?？刮赴﹩慰寺】贵w制備過程如下圖。人的胃癌細胞骨髓瘤細胞小鼠乙丙（專一抗體檢驗陽性）抗胃癌單克隆抗體注射篩選融合克隆化培養(yǎng)甲（4）