實(shí)驗(yàn)十一 DNA的粗提取與鑒定_第1頁(yè)
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生物備課組

(集體課)目的要求1.了解實(shí)驗(yàn)原理。2.學(xué)會(huì)DNA的粗提取和鑒定的方,觀察提取出來(lái)的DNA物。3.通過(guò)實(shí)驗(yàn)培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)操作能力和觀察能力。實(shí)驗(yàn)原理1.DNA在溶中的溶解度,是隨著NaCl的濃度變化而改變的。當(dāng)NaCl的物質(zhì)的量濃度為0.14mol/時(shí)DNA溶解度最低。利用這一原理,可以使溶解在NaCl溶液中的析出。2.DNA不溶于酒溶液但是細(xì)胞中的某些物質(zhì)則可以溶于酒精溶液利用這一原理,可以進(jìn)一步提取出含雜質(zhì)較少的DNA。3.DNA遇二苯胺沸水?。?huì)染成藍(lán)色,因此,二苯胺可以作為鑒定DNA的試劑。注意事項(xiàng)1.步驟3析出含DNA黏稠物中餾水要沿?zé)瓋?nèi)壁緩緩加入能一次快速倒入。2.實(shí)驗(yàn)中有多個(gè)步驟都要用玻璃棒進(jìn)行攪拌,但是在不同的步驟中玻璃棒的用法不同。實(shí)驗(yàn)用具雞血細(xì)胞液(5~mL);體分?jǐn)?shù)為%的冷酒精,蒸餾水,質(zhì)量濃度為0.1g/mL的檬酸鈉溶液物質(zhì)的量濃度分別為mol/L和0015mol/L溶液,二苯胺試劑;燒杯(100mL,1個(gè),50,500mL,各個(gè)),漏斗,試(mL,個(gè)),玻璃,滴管,量筒(100mL,個(gè),紗布,鑷子,濾紙,鐵架臺(tái),鐵環(huán),三角架,酒精燈,石棉網(wǎng),載玻片,試管夾。課時(shí)安排一課時(shí)課前準(zhǔn)備制備雞血細(xì)胞液,方法是:將質(zhì)量濃度0.1g/mL的檸檬酸鈉溶液置于500mL燒懷中,注入新鮮的雞血(約180mL),用璃棒攪拌,使其充分合,以免凝血。靜置于冰箱內(nèi)一天,使血細(xì)胞自行沉淀。(也可以用離心機(jī)離心2min(轉(zhuǎn)速1000轉(zhuǎn)分)。用吸管吸去上清液。板書:(前寫好)實(shí)驗(yàn)十一DNA粗提取與鑒定實(shí)驗(yàn)原理:1.析出溶解在溶液的DNA。2.用冷酒精提取出含雜質(zhì)較少的DNA。3.DNA在沸浴時(shí)被二苯胺染成藍(lán)色。方法步驟:1.提取胞核物質(zhì):順時(shí)針方向攪拌,稍快,稍重。5min2.溶解:3.析出的黏稠物:蒸餾水逆時(shí)針方向攪拌,緩慢4.過(guò)濾取黏稠物

5.再溶:順時(shí)針方向攪拌,較慢。3min6.過(guò)濾取濾液。7.提取含雜質(zhì)較少的DNA,逆時(shí)針方向攪拌,稍慢。5min8.DNA的鑒定:沸水浴板書實(shí)驗(yàn)十一DNA的提取與鑒定實(shí)驗(yàn)原理1.提取血細(xì)

教學(xué)過(guò)程了DNA主么DNA實(shí)。)做?)?)胞的細(xì)胞核物劑質(zhì),。,。:1。2棒2.溶解胞核內(nèi)的3出含DNA的黏稠物4.過(guò)濾5.再溶

用。3.在DNA,所,大要。。)驟1的5:?水)?)。驟3)用碎。),解DNA的。

6.過(guò)濾)7.提取雜質(zhì)

有。少的)。,?)到8DNA的鑒定(1)變化

。的5min)驟3驟1?:驟3使至014molL使DNA驟細(xì))驟7加50mL?為DNA精的DNA)有?)?(2)色是DNA)是DNA?DNA有2

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