§3.2體外受精和早期胚胎培養(yǎng)1學(xué)習(xí)目標簡述哺乳動物體外受精技術(shù)的主要操作步驟。簡述哺乳動物胚胎的早期培養(yǎng)方法。認同體外受精在家畜快速繁殖中的重要意義。學(xué)習(xí)重點（1）體外受精在家畜快速繁殖中的重要意義。（2）哺乳動物體外受精技術(shù)的主要操作步驟。學(xué)習(xí)難點（1）卵母細胞的采集和培養(yǎng)。（2）精子的采集和獲能。21978年7月25日世界首例試管嬰兒第一個試管嬰兒于1978年7月25日在英國的奧爾德姆市醫(yī)院誕生，她的名字叫路易絲.布朗。路易絲.布朗的母親梅.布朗因輸卵管阻塞而不能生育。

醫(yī)生從梅.布朗（時年31歲）體內(nèi)提取卵子，再取她丈夫（時年38歲）的精液，經(jīng)處理在體外使卵子受精，受精卵分裂形成16細胞胚后重新植入梅.布朗的子宮內(nèi)。9個多月后就生下了路易絲.布朗。31988年3月10日我國首例試管嬰兒誕生著名婦產(chǎn)科專家張麗珠教授與中國首例試管嬰兒4根據(jù)資料回答下列問題：1.試管嬰兒技術(shù)包括哪些操作步驟？（體外受精、早期胚胎培養(yǎng)和胚胎移植）2.試管嬰兒培育和母親正常懷孕的過程有何異同？相同之處：都通過有性生殖產(chǎn)生;都要在母體子宮內(nèi)發(fā)育形成胎兒。不同之處：受精作用在體外，并在體外發(fā)育成早期胚胎進行胚胎移植。5一、從試管牛說起6牛的生育率雖然很低，但是牛的卵母細胞卻相當?shù)亩?，其卵巢中卵母細胞?shù)目要比一生中排卵數(shù)多1000倍左右公牛產(chǎn)生的精子數(shù)目就更多了偉大設(shè)想誕生了7試管動物技術(shù)是指通過人工操作使卵子和精子在體外條件下成熟和受精，并通過培養(yǎng)發(fā)育成早期胚胎后，再經(jīng)移植產(chǎn)生后代的技術(shù)。精子卵子受精卵早期胚胎移植子宮個體8試管動物技術(shù)過程：第一步：體外受精第二步：胚胎的早期培養(yǎng)第三步：胚胎移植快速繁殖動物優(yōu)良品種目的：試管動物技術(shù)91982年世界首例試管牛犢問世實現(xiàn)良種?？焖俅罅糠敝呈紫纫龅氖?/p>

和

的培養(yǎng)。體外受精早期胚胎10主要包括

、

和

等幾個主要步驟。概念：采取雌性動物的

和雄性動物的

，使其在

受精。二、體外受精卵母細胞精子體外卵母細胞的采集精子的獲取受精11a.如何使雌性動物排出更多的卵子？b.對實驗動物小鼠、兔和小家畜豬、羊如何采集卵子？c.對于大家畜或大型動物如何采集卵子？d.采集的卵子是否馬上可以受精？閱讀P69、70思考以下問題：1.卵母細胞的采集和培養(yǎng)12采用的主要方法是給供體注射

，使其排出更多的卵子，之后從

中沖取卵子，直接與獲能的精子在體外受精。促性腺激素輸卵管a.如何使雌性動物排出更多的卵子？超數(shù)排卵處理b.對實驗動物小鼠、兔和小家畜豬、羊如何采集卵子？對不同動物,采集卵母細胞的方法不同。1.卵母細胞的采集和培養(yǎng)13大家畜或大型動物，如牛，卵細胞的采集：從屠宰場已屠宰母畜的

中采集卵母細胞，也可以借助

、

或

等工具，直接從活體動物的卵巢中吸取卵母細胞。卵巢超聲波(B超)探測儀內(nèi)窺鏡腹腔鏡1.卵母細胞的采集和培養(yǎng)c.對于大家畜或大型動物如何采集卵子？d.采集的卵子是否馬上可以受精？采集的卵母細胞，都要在體外經(jīng)

后，才能與

精子結(jié)合完成受精。人工培養(yǎng)成熟獲能14閱讀P70、71思考以下問題：a.精子的采集有哪些方法？b.體外受精需要哪些前處理？2、精子細胞的采集和獲能152、精子細胞的采集和獲能（1）采集方法：假陰道法手握法電刺激法a.精子的采集有哪些方法？

大家畜或大型動物豬、犬等體型較小，易于控制的動物野生或經(jīng)濟動物此外，嚙齒類實驗動物可在處死后從附睪尾收集精液。162、精子細胞的采集和獲能（2）體外精子獲能的方法：培養(yǎng)法:化學(xué)誘導(dǎo)法:如：嚙齒動物、家兔和豬等如：牛、羊等放入人工配制的獲能液中放在一定濃度的肝素或鈣離子載體A23187溶液中b.體外受精需要哪些前處理？173.受精獲能溶液專用受精溶液獲能的精子和培養(yǎng)成熟的卵子，一般情況下在或中完成受精過程。18CO2培養(yǎng)箱三、胚胎的早期培養(yǎng)復(fù)習(xí)：動物細胞培養(yǎng)的條件是什么？糖、氨基酸、促生長因子、無機鹽、微量元素、血清等動物細胞培養(yǎng)液成分?19精子和卵子在體外受精后，應(yīng)將受精卵移入發(fā)育培養(yǎng)液中繼續(xù)培養(yǎng)，以檢查受精狀況和受精卵的發(fā)育能力。培養(yǎng)液成分：有機鹽、無機鹽、維生素、激素、氨基酸、核苷酸、血清等三、胚胎的早期培養(yǎng)20動物胚胎培養(yǎng)液成分與動物細胞培養(yǎng)液成分比較項目動物胚胎培養(yǎng)液動物細胞培養(yǎng)液鹽類營養(yǎng)物質(zhì)調(diào)節(jié)物質(zhì)特有物質(zhì)無機鹽和有機鹽氨基酸、核苷酸維生素、激素血清無機鹽、微量元素促生長因子糖、氨基酸血清、血漿三、胚胎的早期培養(yǎng)21培養(yǎng)發(fā)育到適宜階段時，可將其取出向受體移植或冷動保存三、胚胎的早期培養(yǎng)不同動物胚胎移植時間不同牛、羊：小鼠、家兔：試管嬰兒：桑椹胚或囊胚階段可在更早的階段移植8~16個細胞階段注：胚胎發(fā)育的主要場所是母體22為充分利用屠宰母畜卵巢上的卵母細胞，不妨將屠宰場和“胚胎工廠”合建。這樣屠宰場的產(chǎn)品就不僅是鮮肉，還會生產(chǎn)出大量的胚胎和胚胎工程所需的原材料，你看這個想法可行嗎？奇思妙想目前，從屠宰場廢棄的卵巢中，每個卵巢平均可采集10枚左右可用卵母細胞，經(jīng)體外培養(yǎng)成熟和受精后約可獲4枚可用的胚胎，經(jīng)過移植給受體母牛，最終可得到1～2頭犢牛。牛體外受精胚胎的工廠化生產(chǎn)已經(jīng)成為可能。23存放條件？24采集良種母牛的卵母細胞卵母細胞的體外培養(yǎng)采集良種公牛精子精子體外獲能體外受精良種牛體外受精胚胎胚胎移植受體牛良種犢牛成熟期牛屠宰加工廠市場采集卵巢中的卵母細胞“試管?！惫S化生產(chǎn)的技術(shù)流程圖思考：試管牛的產(chǎn)生屬于克隆嗎？25早期胚胎胚胎移植C代孕母體D新個體（與B遺傳物質(zhì)相同）克隆動物的培育過程A雌性動物卵子去核細胞質(zhì)取核B動物體細胞核移植顯微注射重組細胞26有性生殖

無性生殖核移植技術(shù)、胚胎移植遵循

不遵循體外受精胚胎移植試管動物克隆動物發(fā)育起點生殖方式技術(shù)手段遺傳物質(zhì)遺傳規(guī)律比較試管動物和克隆動物來自2個個體主要來自核供體

受精卵重組細胞27胚胎移植采集卵母細胞體外培養(yǎng)采集精子體外獲能體外受精早期胚胎培養(yǎng)受體牛小結(jié)（時期：）

1）超數(shù)排卵（試劑）

2）活體取卵（儀器）

3）從屠宰的卵巢取卵方法①②③（方法，試劑）（試劑）（培養(yǎng)條件、目的階段）成熟的卵子獲能的精子MII中期方法281、關(guān)于牛體外受精及胚胎的工廠化生產(chǎn)的敘述，正確的是A.精子和卵細胞受精形成受精卵后即可移入母牛子宮B.采集的卵母細胞應(yīng)立即與精子共同放入培養(yǎng)液才能形成受精卵C.成熟的卵細胞與收集來的精子相遇形成受精卵，需培養(yǎng)到一定階段才可移植D.體外受精胚胎的工廠化生產(chǎn)即胚胎發(fā)育和受精過程只需在體外進行2、下列現(xiàn)代生物技術(shù)成果獲得必須通過胚胎移植的是

A.轉(zhuǎn)基因良種雞B.重組酵母乙肝疫苗

C.單克隆抗體D.試管嬰兒C

D

鞏固練習(xí)293、采集的卵母細胞，在體外經(jīng)人工培養(yǎng)成熟后，才能與獲能的精子受精，以下原因不正確的是A.卵子從輸卵管中沖出也要經(jīng)歷類似精子獲能的過程B.