巴比妥類(lèi)藥物的分析（AnalysisofBarbitalsDrugs）含量測(cè)定(Assay)

銀量法溴量法巴比妥類(lèi)藥物的含酸堿滴定法量測(cè)定方法紫外分光光度法提取重量法

HPLC法、GC法

（一）銀量法基于巴比妥類(lèi)藥物在合適的堿性溶液中，可與銀離子定量成鹽，可采用銀量法測(cè)定本類(lèi)藥物及其制劑的含量。如苯巴比妥及其鈉鹽、異戊巴比妥及其鈉鹽以及它們的制劑，中國(guó)藥典均采用銀量法測(cè)定其含量。

優(yōu)點(diǎn)：操作簡(jiǎn)便，專(zhuān)屬性較強(qiáng)。

缺點(diǎn)：受溫度影響較大；滴定終點(diǎn)以溶液出現(xiàn)渾濁為終點(diǎn)指示難以觀察。

1.原理反應(yīng)摩爾比：1:1

溶劑系統(tǒng)：甲醇＋3％無(wú)水碳酸鈉終點(diǎn)指示：電位法指示（Ag－玻璃電極系統(tǒng)）自身指示法

0.2g甲醇

40ml3%無(wú)水碳酸鈉電位滴定法(AgNO3)指示電極(Ag)參比電極(玻璃/甘汞)

2.測(cè)定方法與計(jì)算例如:異戊巴比妥及其鈉鹽的測(cè)定：取本品約0.2g加甲醇40ml使溶解新鮮配制的3%無(wú)水碳酸鈉溶液15ml，照電位法，用硝酸銀滴定液（0.1mol/L）滴定，即得。每1ml硝酸銀滴定液（0.1mol/L）相當(dāng)于22.63mg的C11H18N2O3（或24.83mg的C11H17N2NaO3）。原料藥：直接滴定法（容量分析法）

3.注意事項(xiàng)（1）無(wú)水碳酸鈉應(yīng)新鮮配制（2）硝酸銀滴定液應(yīng)新鮮配制2022/12/14AnalysisofBarbitalsDrugs8

（二）溴量法凡在5位取代基含有不飽和鍵的巴比妥類(lèi)藥物，其不飽和鍵能與溴定量地發(fā)生加成反應(yīng)，故可采用溴量法測(cè)定其含量。中國(guó)藥典收載的司可巴比妥鈉采用本法測(cè)定。其測(cè)定原理可用下列反應(yīng)式表示：（定量過(guò)量）Br2+2KI2KBr+I2（剩余）I2+2Na2S2O3→2NaI+Na2S4O6取本品約0.1g，精密稱(chēng)定，置250ml碘瓶中，加水10ml，振搖使溶解，精密加溴滴定液（0.1mol/L）25ml，再加鹽酸5ml，立即密塞并振搖1min，在暗處?kù)o置15min后，注意微開(kāi)瓶塞，加碘化鉀試液10ml，立即密塞，搖勻后，用硫代硫酸鈉滴定液（0.1mol/L）滴定，至近終點(diǎn)時(shí)，加淀粉指示液，繼續(xù)滴定至藍(lán)色消失，并將滴定結(jié)果用空白試驗(yàn)校正。每1ml溴滴定液（0.1mo1/L）相當(dāng)于13.01mg的C12H17N2NaO3。

原料藥剩余滴定法KBrO3＋5KBr＋6HCl→3Br2＋6KCl＋3H2O溴滴滴定定液液（0.1mol/L）的配配制制取溴溴酸酸鉀鉀3.0g與溴溴化化鉀鉀15g，加加水水適適量量使使溶溶解解成成1000ml，搖搖勻勻。。（三三））酸堿堿滴滴定定法法（（酸酸量量法法））巴比比妥妥類(lèi)類(lèi)藥藥物物呈呈弱弱酸酸性性，，可可作作為為一一元元酸酸以以標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)準(zhǔn)堿堿液液直直接接滴滴定定，，或或在在非非水水溶溶液液中中用用強(qiáng)強(qiáng)堿堿溶溶液液直直接接滴滴定定。。常常用用的的方方法法如如下下：：1.在水－－乙乙醇醇混混合合溶溶劑劑中滴滴定定基于于本本類(lèi)類(lèi)藥藥物物在在水水中中的的溶溶解解度度較較小小，，滴滴定定時(shí)時(shí)多多在在醇醇溶溶液液或或含含水水的的醇醇溶溶液液中中進(jìn)進(jìn)行行，，這這樣樣可可避避免免反反應(yīng)應(yīng)中中產(chǎn)產(chǎn)生生的的弱弱酸酸鹽鹽易易于于水水解解而而影影響響滴滴定定終終點(diǎn)點(diǎn)。。常常以以麝麝香香草草酚酚酞酞為為指指示示劑劑，，滴滴定定至至淡淡藍(lán)藍(lán)色色為為終終點(diǎn)點(diǎn)。。異戊巴比妥水—醇溶解麝香草酚酞NaOH淡藍(lán)色1.水-乙醇醇混混合合溶溶液液本法法是是在在有有機(jī)機(jī)表表面面活活性性劑劑的的膠膠束束水水溶溶液液中中進(jìn)進(jìn)行行滴滴定定，，用用指指示示劑劑或或電電位位法法指指示示終終點(diǎn)點(diǎn)。。常常用用的的有有機(jī)機(jī)表表面面活活性性劑劑有有：：溴溴化化十十六六烷烷基基三三甲甲基基芐芐銨銨(CTMA)和氯氯化化四四癸癸基基二二甲甲基基芐芐銨銨(TDBA)。采用用本本法法測(cè)測(cè)定定巴巴比比妥妥和和苯苯巴巴比比妥妥的的結(jié)結(jié)果果的的相相對(duì)對(duì)標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)準(zhǔn)差差（（RSD）均均小小于于0.3%，并并優(yōu)優(yōu)于于在在水水-乙醇醇混混合合溶溶液液中中的的滴滴定定方方法法。。原料料藥藥直直接接滴滴定定法法（（有有空空白白校校正正））T－滴滴定定度度，，每每1ml滴定定液液相相當(dāng)當(dāng)于于被被測(cè)測(cè)組組分分的的mg數(shù)V－滴滴定定時(shí)時(shí)，，供供試試品品消消耗耗滴滴定定液液的的體體積積（（ml）VO－滴滴定定時(shí)時(shí)，，空空白白消消耗耗滴滴定定液液的的體體積積（（ml）f－濃濃度度校校正正因因子子2.在膠膠束束水水溶溶液液中中滴滴定定表面面活活性性劑劑是是一一種種所所謂謂“兩親親”分子子，，即即其其分分子子是是由由親親水水基基團(tuán)團(tuán)和和親親脂脂基基團(tuán)團(tuán)兩兩部部分分組組成成。。當(dāng)當(dāng)表表面面活活性性劑劑在在水水溶溶液液中中濃度度很很低低時(shí)時(shí)，基基本本上上呈呈單分分子子狀態(tài)態(tài)存存在在，，但但當(dāng)當(dāng)超超過(guò)過(guò)某某一一濃濃度度時(shí)時(shí)（（臨臨界界膠膠束束濃濃度度）），，多多余余的的表表面面活活性性劑劑分分子子在在溶溶液液中中不不再再分分散散，，而而是是聚聚集集成成有有一一定定分分子子組組成成數(shù)數(shù)的的聚聚集集物物，，稱(chēng)稱(chēng)為為膠膠束束或或膠膠團(tuán)團(tuán)。。膠束具有有增溶作作用，水水溶液中中膠束的的存在能能使不溶溶或微溶溶于水的的有機(jī)化化合物的的溶解度度增加，，并顯著著改變?nèi)跞跛?、弱弱堿性物物質(zhì)的解解離，使使其酸堿堿性增強(qiáng)強(qiáng)。正膠束反膠束H2O溴化十六六烷基三三甲基芐芐銨Cetyltrimethylbenzylammoniumbromide，CTMA氯化四癸癸基二甲甲基芐銨銨Tetradecyldimethylbenzylammoniumchloride，TDBA巴比妥類(lèi)表面活性劑溶解麝香草酚酞指示劑NaOH滴定采用本法法測(cè)定巴巴比妥和和苯巴比比妥的結(jié)結(jié)果的相相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)準(zhǔn)差（RSD）均小于于0.3%，并優(yōu)于于在水-乙醇混合合溶液中中的滴定定方法。。3.非水滴定定法巴比妥類(lèi)類(lèi)藥物在在非水溶溶液中的的酸性增增強(qiáng)，用用堿性標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)溶液液滴定時(shí)時(shí)，終點(diǎn)點(diǎn)較為明明顯，可可獲得比比較滿(mǎn)意意的結(jié)果果。測(cè)定定時(shí)常用用的有機(jī)機(jī)溶劑有有二甲基甲甲酰胺、甲醇、、氯仿、、丙酮、、無(wú)水乙乙醇、苯苯、吡啶啶、甲醇醇-苯（15?85）、乙醇醇-氯仿（1?10）等；常常用的滴滴定劑有有甲醇鉀（鈉）的的甲醇（（或乙醇醇）溶液液、氫氧氧化四丁丁基銨的的氯苯溶溶液等；；常用的的指示劑劑為麝香草酚酚藍(lán)等，也可可用玻璃璃-甘汞電極極系統(tǒng)，，以電位位法指示示終點(diǎn)。。（四）紫紫外分光光光度法法巴比妥類(lèi)類(lèi)藥物在在酸性介介質(zhì)中幾幾乎不電電離，無(wú)無(wú)明顯的的紫外吸吸收。但但在堿性性介質(zhì)中中電離為為具有紫紫外吸收收特征的的結(jié)構(gòu)，，因而可可采用紫紫外分光光光度法法測(cè)定其其含量。。本法靈靈敏度高高，專(zhuān)屬屬性強(qiáng)，，廣泛應(yīng)應(yīng)用于巴巴比妥類(lèi)類(lèi)藥物的的原料及其制制劑的含量量測(cè)定，以及固體體制劑的溶溶出度和含含量均勻度度檢查，也也常用于體體內(nèi)巴比妥妥類(lèi)藥物的的檢測(cè)。(4)紫外分光光光度法直接測(cè)定的的UV法提取分離后后的UV法1.直接測(cè)定的的紫外分光光光度法本法是將供供試品溶解解后，根據(jù)據(jù)溶液的pH，在最大吸吸收波長(zhǎng)（（λmax）處，直接接測(cè)定對(duì)照照品溶液和和供試品溶溶液的吸收收度，再計(jì)計(jì)算藥物的的含量。中中國(guó)藥典對(duì)對(duì)注射用硫硫噴妥鈉的的含量測(cè)定定采用本法法。Beer-Lambert定律A=-㏒T=ElCA∝C單組分定量量的方法：A、吸收系數(shù)數(shù)法（絕對(duì)對(duì)法）B、標(biāo)準(zhǔn)曲線線法C、對(duì)照法注射用硫噴噴妥鈉含量量測(cè)定取裝量差異異項(xiàng)下的內(nèi)內(nèi)容物，混混合均勻，，精密稱(chēng)取取適量(約相當(dāng)于硫硫噴妥鈉0.25g)，置500ml量瓶中，搖搖勻，量取取此溶液用用0.4%NaOH溶液定量稀稀釋制成每每1ml中約含5μg的溶液；另取硫噴妥對(duì)照品，精密稱(chēng)定定，加0.4%NaOH溶液溶解并并定量稀釋釋制成每1ml中約含5μg的溶液。用1cm吸收池，于于304nm波長(zhǎng)處分別別測(cè)定吸收收度，以0.4%NaOH溶液作空白白。根據(jù)每每支的平均均裝量計(jì)算算。每1mg的硫噴妥鈉鈉相當(dāng)于1.091mg的C11H19N2NaO2S2.提取分離后后的紫外分分光光度法法提取分離的的主要目的是消除干擾擾物質(zhì)對(duì)測(cè)測(cè)定的影響響。根據(jù)巴巴比妥類(lèi)藥藥物具有弱弱酸性，在在氯仿等有有機(jī)溶劑中中易溶，而而其鈉鹽在在水中易溶溶的特點(diǎn)。。測(cè)定時(shí)取取供試液適適量，加酸酸酸化后，，用氯仿提提取巴比妥妥類(lèi)藥物。。氯仿提取取液加pH7.2～7.5緩沖溶液，，振搖，分分離棄去水水相緩沖液液層。再用用0.45mol/L氫氧化鈉溶溶液提取氯氯仿層中的的巴比妥類(lèi)類(lèi)藥物，將將堿提取液液調(diào)節(jié)至適適宜pH，然后選擇擇相應(yīng)的吸吸收波長(zhǎng)進(jìn)進(jìn)行測(cè)定。。USP（24）對(duì)苯巴比比妥鈉的含含量測(cè)定采采用本法樣品溶