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??1概述一、定義凝集反應是指顆粒性抗原(細菌、紅細胞)或附著在載體上的可溶性抗原(或抗體)與相應的抗體(或抗原)在適量的電解質(zhì)存在的條件下,經(jīng)一定時間后凝聚成肉眼可見的凝集物。參加反應的抗原稱為凝集原,抗體稱為凝集素。概述一、定義參加反應的抗原稱為凝集原,抗體稱為凝集素。2二、分類凝集反應玻片凝集試驗直接凝集反應抗人球蛋白凝集試驗間接凝集反應試管凝集試驗正向間接凝集試驗反向間接凝集試驗間接凝集抑制試驗直接法間接法(coombs試驗)二、分類凝玻片凝集試驗直接凝集反應抗人球蛋白凝集試驗間接凝集3直接凝集反應

定義:直接用顆粒性抗原與抗體結(jié)合,出現(xiàn)肉眼可見的凝集現(xiàn)象。特點:*抗原呈顆粒狀,制成的液體為懸液*抗原顆粒相對比抗體大,形成的凝集物主要成分為抗原*抗原的比表面積比抗體小,試驗時為使抗體不過剩,通常稀釋抗體*以出現(xiàn)凝集現(xiàn)象的抗體最高稀釋度判斷效價直接凝集反應定義:4一、玻片凝集試驗已知抗體

未知抗原(待檢標本)?+凝集團塊混濁YESNOO抗原(菌體抗原)

致密的顆粒狀凝集物

O凝集H抗原(鞭毛抗原)疏松的絮狀凝集物

H凝集Vi抗原(表面抗原)致密的顆粒狀凝集物

Vi凝集一、玻片凝集試驗已知抗體未知抗原?+凝集團塊混濁YE5ABO血型鑒定血型系統(tǒng)

ABO血型鑒定血型系統(tǒng)6實驗原理標準抗A血清含抗A凝集素使A型、AB型紅細胞的凝集原凝集含抗B凝集素使B型、AB型紅細胞的凝集原凝集標準抗B血清實驗原理標準抗A血清含抗A凝集素標準抗B血清7實驗步驟1、標記玻片:取潔凈玻片一張,用筆在玻片兩端分別標明ABBA2、滴加血請:在玻片AB兩端分別滴加標準抗A和抗B血清各一滴??笰抗體抗B抗體實驗步驟1、標記玻片:取潔凈玻片一張,用筆在玻片兩端分別標明83、消毒取血

用無菌棉簽蘸取消毒液,消毒左手無名指指腹皮膚,用消毒采血針垂直刺入消毒皮膚處取血各一滴分別涂于玻片的標準抗A血清和標準抗B血清中,分別用牙簽將其混勻4、觀察結(jié)果靜置10—15分鐘后用肉眼觀察有無凝集現(xiàn)象。3、消毒取血用無菌棉簽蘸取消毒液,消毒左手無名指指腹皮9結(jié)果判斷A型標準抗A血清標準抗B血清根據(jù)有無凝集現(xiàn)象判定血型B型AB型O型結(jié)果判斷A型標準抗A血清標準抗B血清根據(jù)有無凝集現(xiàn)象判定血型10方法評價:定性試驗簡便和快速敏感度低臨床應用:菌種鑒定血清學分型血型鑒定方法評價:臨床應用:11試管凝集試驗定量抗原(已知)+系列稀釋抗體(待檢血清)不同程度的凝集反應(陽性)確定抗體的滴度(凝集效價)試管凝集試驗定量抗原(已知)+系列稀釋抗體(待檢血清)不同程12實驗材料:

傷寒桿菌O菌液、待測血清、生理鹽水2.方法:0.50.50.50.50.50.50.50.50.51:201:401:801:1601:3200.5棄掉123450.160.9生理鹽水(ml)待測血清對照管0.5ml0.5ml0.5ml0.5ml0.5ml①②③④傷寒桿菌O菌液0.5ml0.5ml0.5ml0.5ml0.5ml0.5ml抗體稀釋度徹底混勻56℃,1h實驗材料:2.方法:0.50.50.50.50.50.5134.預期結(jié)果+很小的凝集顆粒混濁-無凝集現(xiàn)象與對照相同++小、部分凝集塊中等混濁+++大多凝集管底輕度混濁++++大的凝集塊清亮凝集程度沉淀上清4.預期結(jié)果+很小的凝集顆?;鞚?無凝集現(xiàn)象與對照相同++14管底沉淀凝集程度最高稀釋比例待測血清的滴度管底沉淀凝集程度最高稀釋比例待測血清的滴度15方法評價:半定量試驗簡便、快速敏感度低臨床應用:肥達試驗外斐試驗布魯菌病交叉配血試驗方法評價:臨床應用:16間接凝集試驗將可溶性抗原或抗體吸附于顆粒性載體表面,然后與相應的抗體或抗原反應,在電解質(zhì)的作用下,出現(xiàn)肉眼可見的凝集現(xiàn)象間接凝集試驗將可溶性抗原或抗體吸附于顆粒性載體表面,17間接凝集反應載體不同反應方式不同正向間接凝集試驗反向間接凝集試驗間接凝集抑制試驗協(xié)同凝集試驗紅細胞凝集試驗膠乳凝集試驗分類間載體不同反應方式不同正向間接凝集試驗反向間接凝集試驗間接凝18正向間接凝集用抗原致敏載體--檢測抗體間接乳凝試驗檢測類風濕因子間接炭凝試驗檢測梅毒反應素間接血凝試驗檢測豬瘟抗體正向間接凝集用抗原致敏載體--檢測抗體間接乳凝試驗檢測類風濕19反向間接凝集試驗用抗體致敏載體----檢測抗原反向間接血凝試驗檢測甲胎蛋白、乙肝表面抗原反向間接凝集試驗用抗體致敏載體----檢測抗原反向間接血凝試20間接凝集抑制試驗用抗原致敏載體--檢測抗原間接凝集抑制試驗用抗原致敏載體--檢測抗原21妊娠免疫診斷試驗孕婦尿中,絨毛膜促性腺激素(HCG)含量明顯增高。(HCG是可溶性抗原)反之,非孕婦尿中HCG含量甚微,不足以消耗掉抗HCG抗體。妊娠免疫診斷試驗孕婦尿中,絨毛膜促性腺激素(HCG)含量明顯22實驗材料

1、標本:孕婦尿(HCG陽性)、待檢尿、正常尿2、試劑:兔抗人HCG血清、HCG致敏的乳膠顆粒3、器材:載玻片、滴管、玻棒實驗材料1、標本:23四、實驗方法

加尿液標本加兔抗人HCG免疫血清加HCG致敏的乳膠顆粒

觀察結(jié)果混勻靜止2分鐘混勻靜止2分鐘孕婦尿待檢尿正常尿123四、實驗方法加尿液標本混勻靜止2分鐘混勻靜24五、實驗結(jié)果待檢尿若出現(xiàn)白色細小凝集為妊娠診斷試驗陰性若呈均勻渾濁乳狀液為妊娠診斷試驗陽性。孕婦尿呈現(xiàn)白色均勻渾濁乳狀液。正常尿出現(xiàn)均勻一致的白色細小凝集物。五、實驗結(jié)果待檢尿若出現(xiàn)白色細小凝集為妊娠診斷試驗陰性25間接凝集試驗反應類型反應環(huán)節(jié)反應結(jié)果應用正向間接凝集可溶性抗原-載體+抗體凝集測定抗體反向間接凝集抗體-載體+可溶性抗原凝集測定抗原間接凝集抑制可溶性抗原+抗體+可溶性抗原-載體不凝集測定抗原間接凝集試驗反應類型反應環(huán)節(jié)反應結(jié)果應用正向間接凝集26小結(jié)凝集反應是指細菌和紅細胞等顆粒性抗原或表面包被抗原的顆粒性載體與相應抗體結(jié)合后,可出現(xiàn)肉眼可見的凝集現(xiàn)象。可以分為直接凝集反應、間接凝集反應和抗人球蛋白試驗小結(jié)凝集反應是指細菌和紅細胞等顆粒性抗原或表面包被抗原的顆粒27小結(jié)類型反應環(huán)節(jié)結(jié)果應用直接凝集試驗顆粒性抗原+抗體凝集測定抗原或抗體正向間接凝集可溶性抗原-載體+抗體凝集測定抗體反向間接凝集抗體-載體+可溶性抗原凝集測定抗原間接凝集抑制可溶性抗原+抗體+可溶性抗原-載體不凝集測定抗原小結(jié)類型反應環(huán)節(jié)結(jié)果應用直接凝集試驗顆粒性抗原+抗體凝集測定28作業(yè)1、何為凝集反應?凝集反應有哪些類型?2、請解釋直接凝集試驗、正向間接凝集試驗、反向間接凝集試驗和間接凝集抑制試驗的原理?作業(yè)1、何為凝集反應?凝集反應有哪些類型?29謝謝!謝謝!30??31概述一、定義凝集反應是指顆粒性抗原(細菌、紅細胞)或附著在載體上的可溶性抗原(或抗體)與相應的抗體(或抗原)在適量的電解質(zhì)存在的條件下,經(jīng)一定時間后凝聚成肉眼可見的凝集物。參加反應的抗原稱為凝集原,抗體稱為凝集素。概述一、定義參加反應的抗原稱為凝集原,抗體稱為凝集素。32二、分類凝集反應玻片凝集試驗直接凝集反應抗人球蛋白凝集試驗間接凝集反應試管凝集試驗正向間接凝集試驗反向間接凝集試驗間接凝集抑制試驗直接法間接法(coombs試驗)二、分類凝玻片凝集試驗直接凝集反應抗人球蛋白凝集試驗間接凝集33直接凝集反應

定義:直接用顆粒性抗原與抗體結(jié)合,出現(xiàn)肉眼可見的凝集現(xiàn)象。特點:*抗原呈顆粒狀,制成的液體為懸液*抗原顆粒相對比抗體大,形成的凝集物主要成分為抗原*抗原的比表面積比抗體小,試驗時為使抗體不過剩,通常稀釋抗體*以出現(xiàn)凝集現(xiàn)象的抗體最高稀釋度判斷效價直接凝集反應定義:34一、玻片凝集試驗已知抗體

未知抗原(待檢標本)?+凝集團塊混濁YESNOO抗原(菌體抗原)

致密的顆粒狀凝集物

O凝集H抗原(鞭毛抗原)疏松的絮狀凝集物

H凝集Vi抗原(表面抗原)致密的顆粒狀凝集物

Vi凝集一、玻片凝集試驗已知抗體未知抗原?+凝集團塊混濁YE35ABO血型鑒定血型系統(tǒng)

ABO血型鑒定血型系統(tǒng)36實驗原理標準抗A血清含抗A凝集素使A型、AB型紅細胞的凝集原凝集含抗B凝集素使B型、AB型紅細胞的凝集原凝集標準抗B血清實驗原理標準抗A血清含抗A凝集素標準抗B血清37實驗步驟1、標記玻片:取潔凈玻片一張,用筆在玻片兩端分別標明ABBA2、滴加血請:在玻片AB兩端分別滴加標準抗A和抗B血清各一滴??笰抗體抗B抗體實驗步驟1、標記玻片:取潔凈玻片一張,用筆在玻片兩端分別標明383、消毒取血

用無菌棉簽蘸取消毒液,消毒左手無名指指腹皮膚,用消毒采血針垂直刺入消毒皮膚處取血各一滴分別涂于玻片的標準抗A血清和標準抗B血清中,分別用牙簽將其混勻4、觀察結(jié)果靜置10—15分鐘后用肉眼觀察有無凝集現(xiàn)象。3、消毒取血用無菌棉簽蘸取消毒液,消毒左手無名指指腹皮39結(jié)果判斷A型標準抗A血清標準抗B血清根據(jù)有無凝集現(xiàn)象判定血型B型AB型O型結(jié)果判斷A型標準抗A血清標準抗B血清根據(jù)有無凝集現(xiàn)象判定血型40方法評價:定性試驗簡便和快速敏感度低臨床應用:菌種鑒定血清學分型血型鑒定方法評價:臨床應用:41試管凝集試驗定量抗原(已知)+系列稀釋抗體(待檢血清)不同程度的凝集反應(陽性)確定抗體的滴度(凝集效價)試管凝集試驗定量抗原(已知)+系列稀釋抗體(待檢血清)不同程42實驗材料:

傷寒桿菌O菌液、待測血清、生理鹽水2.方法:0.50.50.50.50.50.50.50.50.51:201:401:801:1601:3200.5棄掉123450.160.9生理鹽水(ml)待測血清對照管0.5ml0.5ml0.5ml0.5ml0.5ml①②③④傷寒桿菌O菌液0.5ml0.5ml0.5ml0.5ml0.5ml0.5ml抗體稀釋度徹底混勻56℃,1h實驗材料:2.方法:0.50.50.50.50.50.5434.預期結(jié)果+很小的凝集顆?;鞚?無凝集現(xiàn)象與對照相同++小、部分凝集塊中等混濁+++大多凝集管底輕度混濁++++大的凝集塊清亮凝集程度沉淀上清4.預期結(jié)果+很小的凝集顆粒混濁-無凝集現(xiàn)象與對照相同++44管底沉淀凝集程度最高稀釋比例待測血清的滴度管底沉淀凝集程度最高稀釋比例待測血清的滴度45方法評價:半定量試驗簡便、快速敏感度低臨床應用:肥達試驗外斐試驗布魯菌病交叉配血試驗方法評價:臨床應用:46間接凝集試驗將可溶性抗原或抗體吸附于顆粒性載體表面,然后與相應的抗體或抗原反應,在電解質(zhì)的作用下,出現(xiàn)肉眼可見的凝集現(xiàn)象間接凝集試驗將可溶性抗原或抗體吸附于顆粒性載體表面,47間接凝集反應載體不同反應方式不同正向間接凝集試驗反向間接凝集試驗間接凝集抑制試驗協(xié)同凝集試驗紅細胞凝集試驗膠乳凝集試驗分類間載體不同反應方式不同正向間接凝集試驗反向間接凝集試驗間接凝48正向間接凝集用抗原致敏載體--檢測抗體間接乳凝試驗檢測類風濕因子間接炭凝試驗檢測梅毒反應素間接血凝試驗檢測豬瘟抗體正向間接凝集用抗原致敏載體--檢測抗體間接乳凝試驗檢測類風濕49反向間接凝集試驗用抗體致敏載體----檢測抗原反向間接血凝試驗檢測甲胎蛋白、乙肝表面抗原反向間接凝集試驗用抗體致敏載體----檢測抗原反向間接血凝試50間接凝集抑制試驗用抗原致敏載體--檢測抗原間接凝集抑制試驗用抗原致敏載體--檢測抗原51妊娠免疫診斷試驗孕婦尿中,絨毛膜促性腺激素(HCG)含量明顯增高。(HCG是可溶性抗原)反之,非孕婦尿中HCG含量甚微,不足以消耗掉抗HCG抗體。妊娠免疫診斷試驗孕婦尿中,絨毛膜促性腺激素(HCG)含量明顯52實驗材料

1、標本:孕婦尿(HCG陽性)、待檢尿、正常尿2、試劑:兔抗人HCG血清、HCG致敏的乳膠顆粒3、器材:載玻片、滴管、玻棒實驗材料1、標本:53四、實驗方法

加尿液標本加兔抗人HCG免疫血清加HCG致敏的乳膠顆粒

觀察結(jié)果混勻靜止2分鐘混勻靜止2分鐘孕婦尿待檢尿正常尿123四、實驗方法加尿液標本混勻靜止2分鐘混勻靜54五、實驗結(jié)果待檢尿若出現(xiàn)白色細小凝集為妊娠診斷試驗

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