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(生物科技行業(yè)浙大生物化學(xué)試題浙江大學(xué)2001年攻讀碩士學(xué)位研究生入學(xué)考試題考試科目:生物化學(xué),編號555注意:答題必須寫在答題紙上,寫在試卷或草稿紙上均無效壹是非題1/30酶反應(yīng)的專壹性取決于其輔助因子的結(jié)構(gòu)肽酰轉(zhuǎn)移酶在蛋白質(zhì)合成中催化肽鍵的生成和酯鍵的水解3E.coli連接酶摧化倆條游離單鏈DNA分子形成磷酸二酯鍵通過檸檬酸途徑將乙酰輔酶A轉(zhuǎn)移至胞液中,同時可使NADH上的氫傳遞給NADP生成NADPH亮氨酸的疏水性比纈氨酸強(qiáng)必需氨基酸是指合成蛋白質(zhì)必不可少的壹些氨基酸脯氨酸是α螺旋破壞者維系蛋白質(zhì)三級結(jié)構(gòu)最重要的作用力是氫鍵DNAG-CDNA11DNA雙螺旋的倆條鏈方向壹定是相反的酶影響其催化反應(yīng)的平衡酶促反應(yīng)的米氏常數(shù)和催化的底物無關(guān)維生素EB1TPP16ATP是體內(nèi)能量的儲存形式糖酵解過程無需氧氣的參和磷酸吡哆醛只作為轉(zhuǎn)氨酶的輔酶起作用21DNA復(fù)制時,后滯鏈需多個引物22絕緣子和增強(qiáng)子壹樣都屬于順式作用元件23PCR是包括變性,復(fù)性和延伸三個步驟的循環(huán)反應(yīng)24Sanger曾倆獲諾貝爾獎tRNAAPE14-β氧化反應(yīng)的逆反應(yīng)鐮刀型貧血癥患者血紅蛋白和正常人的血紅蛋白在氨基酸組成上只有2個殘基有差別地球上所有生物中存在的蛋白質(zhì)和核酸的種類總數(shù)都超過1中國科學(xué)家在今年完成了人類基因組11/61Thr2D-核糖3A4GSH5尼克酰胺6丙酮酸三名詞解釋4/241反密碼子2操縱基因3多肽核酸(peptidenucleicacid)4折疊酶5共價調(diào)節(jié)6HumenGenomeProject四綜合題10/401試表述Glu經(jīng)脫氨基,有氧氧化等途徑徹底分解成NH3,CO2,和H2O時的代謝路線,要求用箭頭表示所經(jīng)過的主要中間產(chǎn)物.計算1摩爾Glu共可產(chǎn)生多少摩爾的NH3,CO2,ATP?2以血紅蛋白為例說明蛋白質(zhì)四級結(jié)構(gòu)的含義,比較血紅蛋白和肌紅蛋白結(jié)構(gòu)和功能的異同請對中心法則加以闡述蛋白質(zhì)的實驗操作步驟浙江大學(xué)2002年攻讀碩士學(xué)位研究生入學(xué)考試題考試科目:生物化學(xué),編號570注意:答題必須寫在答題紙上,寫在試卷或草稿紙上均無效壹是非題1/20所謂肽單位就是指組成蛋白質(zhì)的氨基酸殘基速度4Sanger反應(yīng)(二硝基氟苯法)用以鑒定多肽鏈羧基末端氨基酸,而Edman反應(yīng)(苯異硫氰酸酯法)則用以鑒定多肽鏈氨基末端氨基酸.和膽固醇的化學(xué)結(jié)構(gòu)最相近的維生素是維生素B12.,RNA生長激素釋放抑制因子是壹個14B1TPP地球上所有生物中存在的蛋白質(zhì)和核酸的種類總數(shù)都超過1cAMP呼吸鏈電子載體是按照其標(biāo)準(zhǔn)勢能逐步下降而氧化仍原電勢逐步增加的方向排列的12CO對氧化磷酸化的影響主要是抑制ATP的形成過程,但不抑制電子傳遞過程利用酮體作為燃料分子供能紫外輻射引起的DNARNARNA對蛋白質(zhì)進(jìn)行糖基化修飾真核生物中同壹轉(zhuǎn)錄單位能夠通過不同的拼接而產(chǎn)生不同的蛋白質(zhì)合成模板二用化學(xué)結(jié)構(gòu)式完成下列酶促反應(yīng)4/201異檸檬酸裂解酶2丙酮酸羧化酶3磷酸戊糖異構(gòu)酶4烯脂酰輔酶A水化酶5丙氨酰tRNA合成酶三綜合題10/60對αα;SDSSDS聚丙烯酰胺凝膠電泳中的遷PH如果希望反應(yīng)初速度達(dá)到其最大速度的90%DNAE.coliDNAIIIRNA6Jacob和Monod在上個世紀(jì)60年代初提出乳糖操縱子模型,開創(chuàng)了基因表達(dá)調(diào)節(jié)研究的新領(lǐng)域,具有劃時代意義.請你試述乳糖操縱子理論.浙江大學(xué)2003年攻讀碩士學(xué)位研究生入學(xué)考試題考試科目:生物化學(xué)注意:答題必須寫在答題紙上,寫在試卷或草稿紙上均無效壹是非題1/20ATP4FMN和FAD的組成中有核黃素.()5在細(xì)菌的復(fù)制中起主要作用的是DNA聚合酶I()6DNA變性后其粘度增大()7乙醛酸循環(huán)在所有的高等植物中都存在.()8EMP途徑本身只產(chǎn)生仍原劑,而不產(chǎn)生高能中間產(chǎn)物.()和膽固醇的化學(xué)結(jié)構(gòu)最相近的維生素是維生素B12.()11CoQ只能作為電子傳遞的中間載體.()12DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定性主要來自堿基對之間的氫鍵()13組成蛋白質(zhì)的所有氨基酸中,由于含有的α-碳原子屬于不對稱碳原子,因此都具有旋光性.()14mRNA的3`端polyA結(jié)構(gòu)是由DNA的非編碼區(qū)轉(zhuǎn)錄的.()乙酰輔酶ATCA17E.coliRNA聚合酶的σ亞基和轉(zhuǎn)錄的終止識別有關(guān).().()Vmax是能夠達(dá)到的()二寫出下列物質(zhì)的結(jié)構(gòu)式2/101Ser2U3草酰乙酸4ATP5D-glucose三寫出下列酶催化的生化反應(yīng)式(不要求寫結(jié)構(gòu)式)3/301磷酸果糖激酶2磷酸甘油變位酶3丙酮酸脫氫酶系4順烏頭酸酶5異檸檬酸裂解酶6脂酰輔酶A脫氫酶7谷丙轉(zhuǎn)氨酶8鳥氨酸轉(zhuǎn)氨甲酰酶9DNA合成酶10氨酰tRNA合成酶四綜合題15/90簡述SDSpUC18)DNA,請你設(shè)計壹個簡單的實驗4DNA雙螺旋模型是哪年由誰提出的?簡述其基本內(nèi)容.為什么說該模型的提出是分子生物學(xué)發(fā)展史上的里程碑,具有劃時代的貢獻(xiàn)?2004考試科目:生物化學(xué)名詞解釋50)埃德曼降解抗體誘導(dǎo)契合學(xué)說熱力學(xué)第二定律補(bǔ)救途徑荷爾蒙競爭性抑制細(xì)胞膜9DNA聚合酶10基因表達(dá)問答題:(15)(15)仍有幾份數(shù)學(xué)試卷,可不知道怎么上傳壓縮文件,如果想要,望告之方法3敘述基因文庫和cDNA文庫的制作步驟且進(jìn)行它們的特征比較(20)用圖表示說明生物體內(nèi)三羧酸循環(huán)ATP(20)比較說明(30)2004浙江大學(xué)分子試題PCR(15)(15)(25))(25)(20)6A,B和C三個基因都決定矮牽牛花的花色,當(dāng)基因型為A-B-C-時表型為紅色,其余為白色.AaBbCc的個體和三種純系(系1系2和系3)雜交.分別的紅色:白花1:3,1:7和1:1的分離比.問:系1和系2雜交,F1基因型和表型如何,F2的基因型和表型如何系3和系2雜交,F1基因型和表型如何,F2的基因型和表型如何(要寫出分離比)(25)7什么是染色體重排和基因重排它們在發(fā)育中有和作用它們在進(jìn)化中有和作用(25)06浙江大學(xué)分子生物學(xué)試卷壹、名詞解釋:(25%)1DNASouthernBlotting或PCR的方法進(jìn)行檢測。2、SSR:簡章序列重復(fù)多態(tài)性,引物是根據(jù)微衛(wèi)星DNA重復(fù)序列倆翼的特定短序列設(shè)計,用來擴(kuò)增重復(fù)序列本身。由于重復(fù)的長度變化極大,所以是檢測多態(tài)性的壹種有效方法。其特點包括:壹般檢測到的是壹個單壹的多等位基因位點,共顯性遺傳,故可鑒別雜合子和純合子;得到的結(jié)果重復(fù)性很高。3、EST:表達(dá)序列標(biāo)簽,是指從不同的組織構(gòu)建的cDNA文庫中,隨機(jī)挑選不同的克隆,進(jìn)行克隆的部分測序所產(chǎn)生的cDNA大規(guī)模地產(chǎn)生EST,結(jié)合生物信息學(xué)的手段,將為人們提供壹種快速有效的發(fā)現(xiàn)新基因的方法。4、STS:序列標(biāo)簽位點,是由特定引物序列所界定的壹類標(biāo)記的統(tǒng)稱,短的在基因組上是能夠被唯壹操作的序列,因而能夠確定在物理圖譜上的特定位置。5、CAP:CAP即分解代謝物基因活化蛋白是壹種激活蛋白,因為細(xì)菌的許多啟動子為弱啟動子,本身和RNA聚合酶的作用較弱,在有CAP蛋白這類激活蛋白存在下,可使RNA聚合酶和啟動子的親和力增強(qiáng),CAP蛋白的活性強(qiáng)烈依賴cAMP。6AFLP:擴(kuò)增片段長度多態(tài)性,其特點是把RFLP和PCR結(jié)合了起來。其基本步驟是:把DNAPCR擴(kuò)增(在所有的限制性片段倆端加上帶有特定序列的“接頭特異PCR擴(kuò)增,只有那些和7、SNP:單核苷酸多態(tài)性,是壹種較為新型的分子標(biāo)記,其依據(jù)的是壹位點的不同等位基是很有意義的。8、FISH:熒光原位雜交技術(shù),是壹種利用非放射性的熒光信號對原位雜交樣本進(jìn)行檢測的來,通過熒光標(biāo)記的DNA探針和待測樣本的DNA進(jìn)行原位雜交,在熒光顯微鏡下對熒光基因相關(guān)疾病的分型、預(yù)前和預(yù)后提供準(zhǔn)確的依據(jù)。9DNA。10、RNAinsituhybridization:RNA原位雜交,是利用cDNA為探針來檢測和其互補(bǔ)的mRNA11、單克隆抗體:每個B淋巴細(xì)胞有合成壹種抗體的遺傳基因。動物脾臟有上百萬種不同的B淋巴細(xì)胞系,含遺傳基因不同的B淋巴細(xì)胞合成不同的抗體。當(dāng)機(jī)體受抗原刺激時,抗原分子上的許多決定簇分別激活各個具有不同基因的B細(xì)胞。被激活的B細(xì)胞分裂增殖形成該細(xì)胞的子孫,即克隆由許多個被激活B細(xì)胞的分裂增殖形成多克隆,且合成多種抗體。如果能選出壹個制造壹種專壹抗體的細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),就可得到由單細(xì)胞經(jīng)分裂增殖而形成細(xì)胞群,即單克隆。單克隆細(xì)胞將合成壹種決定簇的抗體,稱為單克隆抗體。12進(jìn)行雜交,通過檢測雜交信號的強(qiáng)弱進(jìn)而判斷樣品中靶分子的數(shù)量。由于用該技術(shù)能夠?qū)O其大量的探針同時固定于支持物上DNA分子或RNA分子進(jìn)行檢測分析,從而解決了傳統(tǒng)核酸印跡雜交,技術(shù)復(fù)雜、自動化程度低、檢測目的分子數(shù)量少、效二、描述A文庫構(gòu)建原理和方法A)3)文庫質(zhì)量定義。答:cDNA:以mRNA為模板,利用反轉(zhuǎn)錄酶合成和mRNA互補(bǔ)的DNA(complementaryDNA,cDNA),再復(fù)制成雙鏈cDNA片段,和適當(dāng)載體連接后轉(zhuǎn)入受菌體,擴(kuò)增為cDNA文庫(cDNAlibrary),然后再采用適當(dāng)方法從cDNA文庫種篩選出目的cDNA。和基因組DNA文庫類似,由總mRNA制作的cDNA文庫包括了細(xì)胞全部mRNA信息,自然也含有我們感興趣的編碼cDNA。當(dāng)前發(fā)現(xiàn)的大多數(shù)蛋白質(zhì)的編碼基因幾乎都是這樣分離的。cDNA獲得方法:①TotalRNA的提取;②mRNA的分離;③cDNA雙鏈合成:SupersciptII—RTcDNA末端補(bǔ)平,cDNAXhoI。的提取,的雙酶切消化,載體去磷A雙鏈和載體的連接:連接,檢測R方法電轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞的制備,連接產(chǎn)物純化,電轉(zhuǎn)化;④快速鑒定、菌落PCR文庫質(zhì)量定義:評價壹個文庫是否有實用價值主要在于文庫的含量和插入片段的大小倆cDNA中的每壹個序1.7×105,同時為cDNA1kb。1)化學(xué)誘變)物理誘變A)()()堿基修復(fù)概念變在自然界普遍存在?;蛲蛔兊姆绞胶芏啵饕?)化學(xué)誘變,基因突變能夠由某些化學(xué)物質(zhì)所引起,這些化學(xué)物質(zhì)稱為化學(xué)誘變劑。現(xiàn)已知很多的化學(xué)誘變劑,它們誘變的機(jī)制是不同的。在DNA物理誘變,利用物理因素引起基因突變的稱物理誘變,如X射線、紫外線、電離輻射等物理因素可造成插入,改變讀碼或變成假基因(4)移碼突變:基因中插入或者缺失壹個或幾個堿基對,會使DNA的閱讀框架(讀碼框)發(fā)生改變,導(dǎo)致插入或缺失部位之像吖啶類染料分子能插入DNA分子,使DNA復(fù)制時發(fā)生差錯,導(dǎo)致移碼突變(5)無意(6)損傷的修復(fù)系統(tǒng)主要有以下幾個:①損傷堿基的直接修復(fù);②切除修復(fù),包括堿基切除修復(fù)、核苷酸切除修復(fù)和DNA交鏈的切除修復(fù);③錯配修復(fù);④重組修復(fù),又稱復(fù)制后修復(fù);⑤跨損傷DNA合成,這是壹種利用損傷核苷酸為模板,通過DNA聚合酶I使堿基摻入到復(fù)制終止處進(jìn)行DNA合成,從而延長DNA鏈的修復(fù)?;蛲蛔兊奶攸c為:第壹,基因突變在生物界中是普遍存在的。第二,基因突變是隨機(jī)發(fā)生的。第三,在自然狀態(tài)下,對壹種生物來說,基因突變的頻率是很低的。第四,大多數(shù)基因突變對生物體是有害的,由于任何壹種生物都是長期進(jìn)化過程的產(chǎn)物,它們和環(huán)境條件已經(jīng)取得了高度的協(xié)調(diào)。第五,基因突變是不定向的。四、闡述壹條反向遺傳克隆功能基因的途徑(25%)答:反向遺傳學(xué)是相對于經(jīng)典遺傳學(xué)而言的。經(jīng)典遺傳學(xué)是從生物的性狀、表型到遺傳物質(zhì)來研究生命的發(fā)生和發(fā)展規(guī)律。反向遺傳學(xué)則是在獲得生物體基因組全部序列的基礎(chǔ)上,通
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