實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)實(shí)驗(yàn)報(bào)告學(xué)院：學(xué)號(hào)：姓名時(shí)間：實(shí)驗(yàn)一：小鼠實(shí)驗(yàn)一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?、掌握小鼠抓取、固定的基本方法；2、掌握小鼠的雌雄鑒別方法；3、掌握小鼠的標(biāo)記方法；6、掌握小鼠的解剖方法，熟悉內(nèi)部臟器的自然位置；二、實(shí)驗(yàn)材料1、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：每組兩只雌鼠，兩只雄鼠；2、實(shí)驗(yàn)器械及試劑：鼠籠；小鼠固定器和小鼠固定板；眼科剪；眼科鑷；解剖刀；1ml注射器；毛細(xì)玻璃管；灌胃針；苦味酸染料；葡萄糖液；2%水合氯醛；三、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容及方法1、小鼠的抓取和固定2、小鼠的雌雄鑒別雄鼠的陰囊明顯，雄鼠可見(jiàn)陰道開(kāi)口和五對(duì)乳頭。幼鼠或仔鼠則主要從外生殖器與肛門的距離判定，近者為雌，遠(yuǎn)者為雄。另外，雌鼠肛門和生殖器之間有一無(wú)毛小溝，而雄鼠則在肛門和生殖器之間長(zhǎng)毛。3、小鼠的標(biāo)記方法耳孔法剪趾法適用于出生一周以內(nèi)新生仔鼠；染色法用毛筆將苦味酸涂在動(dòng)物的不同部位，注意逆著毛發(fā)生長(zhǎng)方向刷。4、小鼠的基本采血1）剪尾采血45℃溫水中浸1-2mm，讓血液滴入盛器或直接用移液器吸取，同時(shí)自尾根部向尾尖按摩。取血后，先用棉球壓迫止血并立即用6％液體火棉膠涂于尾巴傷口處，使傷口外結(jié)0.2～0.3ml血，切割后用棉球壓眼眶后靜脈叢取血使眼球充分外突（示眼眶后靜脈叢充血，右手持毛細(xì)玻璃管，沿內(nèi)眥眼眶后壁2～3mm0.2～0.3ml。心臟取血?jiǎng)游镅雠P固定在固定板上，剪去心前區(qū)部位的被毛，用碘酒酒精消毒皮膚。在3～4肋間，用左手食指摸到心搏處，右手取連有4～5經(jīng)口給藥：小鼠灌胃左手抓住鼠背部及頸部皮膚將動(dòng)物固定，右手持灌胃針，將灌胃針插入動(dòng)物3~4cm0.2~1ml；2）皮下注射給藥皮下注射給藥部位以頸部三角區(qū)最佳。操作時(shí)，常規(guī)消毒注射部位皮膚，然時(shí)左手拇、食指捏住進(jìn)針部位片刻，以防止藥物外漏。肌肉注射給藥小鼠體積小，肌肉少，很少采用肌肉注射。當(dāng)給小鼠注射不溶于水而混懸于1190°1/4,注入藥液.0.1ml/10g體重。腹腔注射給藥左左手提起并固定小鼠，使鼠腹部朝上，鼠頭略低于尾部，右手持注射器將針頭在下腹部靠近腹白線的兩惻進(jìn)行穿刺，針頭刺入皮膚后進(jìn)針3nm左右，接著使注射針頭與皮膚呈45°角刺入腹肌，穿過(guò)腹肌進(jìn)入腹膜腔，當(dāng)針尖穿過(guò)腹肌進(jìn)入腹膜腔后抵抗感消失。固定針頭，保持針尖不動(dòng)，回抽針?biāo)?，如無(wú)回血、腸液和尿液后即可注射藥液。尾靜脈注射給藥鼠尾靜脈有兩根，左右兩側(cè)各一根。操作時(shí)先將動(dòng)物固定在鼠筒內(nèi)或扣在燒45～50℃的溫水浸潤(rùn)半分鐘或用酒精擦拭使血管擴(kuò)靜脈平行（℃，從尾下四分之一處（約距尾尖3厘米）處進(jìn)針，此處以后向尾根部方向移動(dòng)注射。動(dòng)進(jìn)入注射器。6、小鼠的解剖內(nèi)部臟器觀察肺：分左右兩葉，右肺分為四葉，左肺為一整葉。心臟：呈圓錐狀，位于近胸骨端，心尖位于第四肋間。5葉。胃：分賁門、幽門、胃底及胃體。腸：分小腸和大腸。小腸包括回腸、空腸和十二指腸。脾：脾斜臥在胃的左側(cè)，呈暗紅色，長(zhǎng)條扁平狀。胰：在十二指腸附近，呈粉紅色。開(kāi)口于膀胱背側(cè)。9）卵巢和子宮：卵巢形似綠豆?fàn)?，粉紅色，左右各一，位于腎臟下方。小鼠為雙角子宮，為Y字形。10）睪丸：小鼠睪丸有一對(duì)，幼年時(shí)睪丸位于腹腔內(nèi)，性成熟后則下降至陰囊內(nèi)。實(shí)驗(yàn)二：大鼠實(shí)驗(yàn)一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?、掌握大鼠抓取、固定的基本方法；2、掌握大鼠的雌雄鑒別方法；3、掌握大鼠的標(biāo)記方法；4、掌握大鼠的基本采血技術(shù)（尾靜脈采血、心臟釆血、腹主動(dòng)脈采血；5、掌握大鼠的常用給藥方法（注射、麻醉；6、掌握大鼠的解剖方法，熟悉內(nèi)部臟器的自然位置；二、實(shí)驗(yàn)材料D2只（11雄；2、實(shí)驗(yàn)器械及試劑：鼠籠、大鼠固定器、大鼠固定板、1ml注射器、5ml器、眼科剪、彎頭鑷、灌胃針、10%水合氯醛、生理鹽水；三、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容及步驟抓取和固定性別鑒定（其他部位一樣，雌性：距離短，毛發(fā)稀疏。給藥1）灌胃:將注射器裝入藥物溶液，裝上灌胃針。抓取固定大鼠后，使大鼠（若藥物灌入肺中，大鼠死亡。2）腹腔注射：左手固定大鼠后，右手持針，45度沿腹白線兩側(cè)進(jìn)針，刺3nm左右，將注射針頭朝上，減少與皮膚間的傾斜角度，繼續(xù)進(jìn)液。尾靜脈注射：鼠尾靜脈有兩根，左右兩側(cè)各一根。操作時(shí)先將動(dòng)物固定45～50℃的溫水浸潤(rùn)半分鐘或用酒精擦拭使0℃，從尾上三分之一處進(jìn)針，此處皮薄易于刺入，回抽（3/1處注射，此處大鼠易發(fā)生斷尾現(xiàn)象。皮下注射：將大鼠以俯臥位固定，將腹部皮膚去毛后，左手拇指和食指經(jīng)過(guò)段時(shí)間后注射入的藥物可被吸收。皮內(nèi)注射：小鼠以俯臥位固定，將腹部皮膚去毛后，左手拇指和食指捏停留片刻后將針頭拔出，用干棉球按壓針孔。麻醉：抓取固定大鼠后，通過(guò)腹腔注射的方式（10%2ml/kg的用量）或幾乎不動(dòng)為麻醉成功。若注射過(guò)量麻醉劑會(huì)造成大鼠死亡。釆血1）尾靜脈采血45～50℃的溫水浸潤(rùn)半分右手持注射器，使針頭與靜脈平行（小于0℃，從尾上三分之一處進(jìn)針，此處0.1ml。心臟釆血：將麻醉后的小鼠以仰臥位放置，用指腹觸摸觀察確定小鼠心臟的位置（為搏動(dòng)為劇烈處。右手持注射器，左手在左側(cè)固定心臟，針頭緊貼302.5cm（。腹主動(dòng)脈采血：將大鼠麻醉固定后，用手術(shù)剪沿腹正中線剪開(kāi)腹腔，將腹主動(dòng)脈充分暴露后（腹主動(dòng)脈與腹主靜脈伴行，緊貼脊柱，右手持注射器，25~305mm左右200~300g8~10ml，采樣過(guò)程迅速。大鼠解剖；內(nèi)臟器官。內(nèi)部臟器觀察：肺：分左右兩葉，右肺分為四葉，左肺為一整葉。心臟：呈圓錐狀，位于近胸骨端，心尖位于第六肋間（主動(dòng)脈弓前部。7葉，無(wú)膽囊。胃：分賁門、幽門、胃底及胃體。腸：分小腸和大腸。小腸包括回腸、空腸和十二指腸。脾：脾斜臥在胃的左側(cè)，呈深紅色，長(zhǎng)條扁平狀。胰：在十二指腸附近，不規(guī)則狀且呈粉紅色，與脂肪相似但顏色不同。（米粒大小卵巢和子宮：在腎臟前方見(jiàn)肉色帶有顆粒樣突起的腺體為卵巢，兩側(cè)卵巢下方各連有一條輸卵管，輸卵管連接于下方子宮，兩側(cè)子宮結(jié)合形成“V”字形，經(jīng)陰道開(kāi)口于體外。睪丸：小鼠睪丸有一對(duì)，幼年時(shí)睪丸位于腹腔內(nèi)，性成熟后則下降至陰囊內(nèi)。下腺。實(shí)驗(yàn)三：豚鼠、家兔的基本實(shí)驗(yàn)操作一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康男詣e鑒定、灌胃、腹腔注射、心臟釆血、豚鼠解剖；家兔的抓取和固定、性別鑒定、耳緣靜脈采血、耳緣靜脈注射、耳緣靜脈空氣栓塞法注射、家兔解剖，了解豚鼠和家兔的各臟器解剖學(xué)位置。二、實(shí)驗(yàn)材料1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：1只（雌性1只（雄性）2、實(shí)驗(yàn)器械及試劑：鼠籠、鼠板、家兔固定器、兔板、頭皮針、5ml注射器、眼科剪、彎頭鑷、導(dǎo)尿管、10%水合氯醛、生理鹽水、手術(shù)剪、三、實(shí)驗(yàn)步驟1、豚鼠的抓取和固定豚鼠的抓取和固定：左手拇指和食指抓住豚鼠兩耳后和頸部大部分皮膚。其余手指及掌心夾住背部和尾部，豚鼠四肢不會(huì)阻礙實(shí)驗(yàn)操作即為抓取固定成功，注意不要用力過(guò)大使豚鼠窒息死亡。2、豚鼠性別鑒定將豚鼠抓取固定后使其腹面朝上，用手按壓豚鼠的會(huì)陰部，觀察是否有陰莖出現(xiàn)即可判斷雌雄。雄性豚鼠可觀察到陰莖，雌性豚鼠可觀察到會(huì)陰部。3、豚鼠麻醉30度沿腹白3nm左右，將注射針頭朝上，減少與皮膚間的傾液后即可注射麻醉劑（10%4ml/kg260g，故需1.1ml10%水合氯醛。將適量的麻醉劑注射入豚鼠體內(nèi)，等待幾分鐘后觀鼠死亡。4、豚鼠心臟釆血將麻醉后的豚鼠以仰臥位放置，用指腹觸摸觀察確定豚鼠心臟的位置（為搏動(dòng)為劇烈處，通常在胸骨左緣。右手持注射器，左手在左側(cè)固定心臟，在三四302.5cm（。5、豚鼠解剖將通過(guò)心臟采血處死后的豚鼠放至在鼠板上，仰臥位放置，充分暴露頸部、腔的各內(nèi)臟器官。內(nèi)部臟器觀察：1）肺：共七葉，右肺四葉，左肺三葉；心臟：呈圓錐狀，位于近胸骨端，心尖位于第六肋間（色胸腺附于主動(dòng)脈弓前部；肝：緊鄰隔下，呈暗紅色，分四個(gè)主葉和四個(gè)小葉，可見(jiàn)一光亮的膽囊附著于肝下；20-30g；1/315%；脾：脾斜臥在胃的左側(cè)，呈深紅色，長(zhǎng)條扁平狀；胰：一端緊貼脾臟，一端鄰近十二指腸，不規(guī)則狀且呈粉紅色；（米粒大小，每腎內(nèi)側(cè)各有一根輸尿管，開(kāi)口于膀胱背側(cè)；卵巢和子宮：在腎臟前方見(jiàn)肉色帶有顆粒樣突起的腺體為卵成“V”字形，經(jīng)陰道開(kāi)口于體外。6、家兔的抓取和固定自籠內(nèi)取出時(shí)，用手抓住家兔頸部被毛與皮膚，另一手托住其臀部，將其中其頭部無(wú)法向后縮即為固定成功。7、家兔的性別鑒定家兔的性別鑒定類似于豚鼠的性別鑒定。將家兔抓取后使其腹面朝上，用手雌性家兔可觀察到會(huì)陰部。8、家兔耳緣靜脈采血用兔盒固定家兔后，先拔去耳緣靜脈注射部位的被毛，用手指輕彈兔耳使靜5ml。9、家兔灌胃給藥兔灌胃系用導(dǎo)尿管配以一根粗的棉繩，用棉繩固定家兔開(kāi)口，將導(dǎo)尿管從家兔牙齒外側(cè)緩慢沿上顎插入食道。插入約導(dǎo)尿管的2/3的位置?；爻獒樄?，觀察到無(wú)氣體進(jìn)去針管后注射藥物。灌胃完畢后先取出導(dǎo)尿管后松開(kāi)棉繩。10、家兔麻醉（10%4ml/kg的用量等待幾分鐘后觀察家兔反應(yīng)。若家兔全身癱軟幾乎不動(dòng)為麻醉成功。11、家兔處死（空氣栓塞法）以耳緣靜脈采血的方式在耳緣靜脈處進(jìn)針，向耳緣靜脈中注入一定量的空氣l即可瞳孔擴(kuò)散。12、家兔解剖胸腔的各內(nèi)臟器官。內(nèi)部臟器觀察：1）肺：共七葉，右肺四葉，左肺三葉。胸腔中間有縱膈將胸腔分為左右兩部，互不相通。心臟：呈圓錐狀，位于近胸骨端，由左心房、左心室、右心房、右心室組成。胃：分兩部，賁門部和幽門部。100.5米。在回腸和盲腸相接處膨大呈一個(gè)后壁，呈圓形，為圓小囊。脾：脾斜臥在胃的左側(cè)，呈深紅色，長(zhǎng)條扁平狀。則狀且呈粉紅色，與脂肪相似但顏色不同。（米粒大小，每腎內(nèi)側(cè)各有一根輸尿管，開(kāi)口于膀胱背側(cè)。雄兔睪丸下降到陰囊，兩側(cè)陰囊為乳白色。睪丸切除手術(shù)技巧操作一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?、小鼠的睪丸及卵巢切除是目前實(shí)驗(yàn)動(dòng)物手術(shù)操作中最基礎(chǔ)的技巧，要求初步掌握手術(shù)操作的基本流程、術(shù)中的細(xì)節(jié)及了解術(shù)后護(hù)理；2、掌握尾尾直皮的操作方法；3、通過(guò)實(shí)際操作，了解通過(guò)剖腹取胎術(shù)得到幼鼠的基本原理、操作和用途；二、實(shí)驗(yàn)材料、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：試驗(yàn)用孕鼠、清潔級(jí)小鼠（雌雄各一只；2、實(shí)驗(yàn)器械與試劑：鼠籠、鼠板、5ml注射器、眼科剪、彎頭鑷、10%水合氯醛、手術(shù)剪、干棉球、酒精棉球；三、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容1、小鼠的睪丸切除手術(shù)5mm處脫毛，常2-3mm5-8mm手術(shù)口直達(dá)腹并結(jié)扎相關(guān)血管，即可切除睪丸。將腹膜與肌層一起縫合，縫合皮膚。2、小鼠卵巢切除手術(shù)小鼠卵巢切除術(shù)多采用背部切口。小鼠常規(guī)麻醉，采用俯臥或側(cè)臥位，置于0.5cm1cm為中心剪除或拔出長(zhǎng)毛，常規(guī)消毒，切在離脊柱肋下剪開(kāi)腰肌，長(zhǎng)約0.5切口，立即可見(jiàn)兩側(cè)包繞卵巢的脂肪組織及緊間短。3、近交系小鼠皮膚移植實(shí)驗(yàn)尾尾植皮法是在一組近郊系內(nèi)，將小鼠尾部的皮膚輪換移植到另外一個(gè)小鼠的尾部。此方法一個(gè)可以同時(shí)做幾只，省時(shí)間。而且有自體移植，可以用于鑒別植皮的脫落是排斥反應(yīng)，還是手術(shù)失敗造成的。麻醉動(dòng)物，用75%0.75cm長(zhǎng)的尾皮，180度，使皮片上的毛與尾部的毛長(zhǎng)向相反，然后用眼科鑷將植4、孕鼠剖腹取胎實(shí)驗(yàn)1）以頸椎脫臼法將孕鼠處死后，取仰臥位固定小鼠于動(dòng)物固定板上，暴露腹部手術(shù)部位進(jìn)行酒精消毒（2）用剪刀沿腹中線剪開(kāi)腹部皮膚、腹肌和腹膜，暴露子宮，用止血鉗分別夾住血循環(huán)正常后，以止血鉗扎斷臍帶。18閉，胸前有一個(gè)深紅色胎盤附于其上，體表略濕。實(shí)驗(yàn)五大鼠陰道涂片、肺水腫模型及其它試教實(shí)驗(yàn)一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康哪壹氨雀袢哪挲g判斷、前肢背橈外側(cè)靜脈和后肢側(cè)皮下小靜脈的采血操作。二、實(shí)驗(yàn)材料實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：SD大鼠，裸鼠，金黃地鼠，比格犬；846合2ml5ml皮綁帶、顯微鏡。三、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容大鼠陰道涂片及性周期觀察大鼠急性肺水腫模型的建立裸鼠腫瘤接種的試教實(shí)驗(yàn)比格犬年齡判斷比格犬前肢背橈外側(cè)靜脈、后肢側(cè)皮下小靜脈采血金黃地鼠頰囊的觀察四、實(shí)驗(yàn)方法與步驟大鼠陰道涂片及性周期觀察學(xué)改變來(lái)鑒別性周期的不同階段。精將片子烘干，吸陰道分泌物時(shí)，要反復(fù)沖洗4-5次，確保吸到陰道分泌物。用20min沒(méi)有找到明顯有核細(xì)胞和分葉細(xì)胞，可能是烘干片子時(shí)細(xì)胞結(jié)構(gòu)被破壞。情間期。大鼠急性肺水腫模型的建立0.6mL8氯化銨溶液（g，雄性：，觀察大鼠一般情況與呼吸狀況，2-3分鐘后突然倒下，全