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文檔簡介
自動生化分析技術(shù)1醫(yī)生對生化室的希望、要求:可靠的測定值(化驗結(jié)果)出報告時間快更多的化驗項目開展新的測定技術(shù)2什么是自動化?
國際純化學(xué)與應(yīng)用化學(xué)協(xié)會(InternationalUnionofPureandAppliedChemistry,IUPAC)對自動化的解釋是:由機械化的儀器設(shè)備取代人的手工操作的過程。3
自動化生化分析儀(autoanalyzer)就是一種把生化分析中的取樣、加試劑、混勻、恒溫、反應(yīng)、檢測、計算結(jié)果以及清洗等過程的全部步驟或部分步驟進行自動化操作的儀器。4
臨床生化檢驗實現(xiàn)機械化、自動化,更重要的也促進了操作的規(guī)范化與標(biāo)準(zhǔn)化:操作的規(guī)范化與標(biāo)準(zhǔn)化、不但有高效率、高精密度、準(zhǔn)確性,而且防止人為介入產(chǎn)生的失誤,保證了檢驗的高質(zhì)量。5
自動生化分析儀及TLA發(fā)展歷史20世紀(jì)50年代1957年,Skeggs首次推出單通道連續(xù)流動式自動生化分析儀。20世紀(jì)60年代1964年,推出多通道連續(xù)流動式自動生化儀。20世紀(jì)70年代中期,電子計算機控制的自動生化儀。20世紀(jì)80年代,新型自動生化分析儀不斷涌現(xiàn),開始向TLA發(fā)展。690年代以來,各型自動生化分析儀競爭發(fā)展,功能及性能指標(biāo)日趨完善,具有先進的光路系統(tǒng)和強大的數(shù)據(jù)處理功能,實現(xiàn)了檢測技術(shù)的多樣化,TLA的發(fā)展速度加快。90年代以后,世界上眾多先進的TLA系統(tǒng)問世并運行7
縱觀臨床生化自動分析儀的發(fā)展史也是臨床生化檢測方法學(xué)的發(fā)展史。自動生化分析儀以高新技術(shù)為基礎(chǔ),以高準(zhǔn)確性、精密度、靈活性和高效率為特點,在現(xiàn)代臨床實驗室中承擔(dān)大部分的常規(guī)工作,成為實驗室必備的檢驗儀器。8自動生化分析儀的應(yīng)用要求:1.工作環(huán)境①安置地點②電源電壓③環(huán)境④儀器用水2.工作人員3.儀器管理4.儀器的初步評價9自動生物化學(xué)分析儀的類型按自動化程度可分為:全自動生化分析儀半自動生化分析儀按同時可測定項目分為:單通道生化分析儀多通道生化分析儀10按照儀器的復(fù)雜程度及功能可分為:小型生化分析儀(單通道、半自動、專用)中型生化分析儀(單通道或多通道)大型生化分析儀(多通道、多項目、自選或組合)11按反應(yīng)裝置的結(jié)構(gòu)可分為:連續(xù)流動式(管道式)分析儀分立式分析儀離心式分析儀干片式分析儀自動模塊化系統(tǒng)全實驗室自動化分析系統(tǒng)12分立式自動生物化學(xué)分析儀1.工作原理:該類型儀器是按人工操作的方式編排程序,并以有序的機械動作代替人工,按程序依次完成各項操作的自動分析儀器。132.儀器結(jié)構(gòu)與功能(1)樣品處理系統(tǒng)包括:樣品架和試劑盤、識別裝置、機械臂和加液器。①樣品架:是放置樣品試管的試管架,根據(jù)分析儀的設(shè)計有圓盤狀,也有傳送條帶狀。編程后按指令進行分析檢測。吸樣針上通常裝有液面感應(yīng)器,防止空吸或及入下層的血凝塊。14②試劑盤:放置實驗項目所用的試劑,一般為圓形。試劑室供放試劑盤的空間,一般都有冷藏裝置(4-15℃)。
15③加液器:加液器由定量吸量器和加樣針組成。由機械臂控制加液器的移動,根據(jù)儀器的指令機械臂攜帶加液器運動至指定位置。先進的定量吸取技術(shù)是采用脈沖數(shù)字步進電機定位,定位準(zhǔn)確,故障率低。
16加樣針與靜電液面感應(yīng)器組成一體化探針,它具有自我保護功能。
樣品處理系統(tǒng)可以從指定的地方準(zhǔn)確地吸取樣品或試劑,并轉(zhuǎn)移到指定的反應(yīng)杯中。17④攪拌器:由電機和攪拌棒組成,電機運動就帶動攪拌棒高速轉(zhuǎn)動,使反應(yīng)液被充分混勻。金屬桿表面涂一層不粘性材料。(2)檢測系統(tǒng)(3)恒溫裝置18光學(xué)系統(tǒng)光學(xué)系統(tǒng)是全自動生化分析儀(ACA)的關(guān)鍵部分,由光源、光路系統(tǒng)、分光器(分光元件)組成,其作用提供足夠強度的光束、單色光及比色的光路。19光源:一般采用鹵素?zé)簦ǘ酁?2W、20V)提供波長范圍為348-800nm,壽命800h左右光路系統(tǒng):由透鏡、聚光鏡、光徑和分光元件組成20前分光和后分光前分光的光路與一般分光光度計相同:光源分光元件(濾光片)樣品檢測器后分光的光路是:光源樣品分光元件(光柵)檢測器后分光的優(yōu)點:不需移動儀器的任何部件,可同時選用雙波長或多波長進行測定,降低了噪音,提高了分析的精度和準(zhǔn)確度,減少了故障。21后分光光路示意圖22恒溫系統(tǒng)恒溫液循環(huán)間接加溫干式?。杭墒娇諝庠∨c水浴優(yōu)點于一體。[原理]在比色杯周圍設(shè)計一恒溫槽,在槽內(nèi)加入一種無味、無污染、不蒸發(fā)、不變質(zhì)的穩(wěn)定恒溫液,恒溫液的容量大、熱穩(wěn)定性好、均勻。23恒溫方式結(jié)構(gòu)示意圖
242526自動生物化學(xué)分析儀常用分析方法自動生化分析儀是指借助儀器的機械和電子裝置,使生化檢驗中的主要操作步驟實現(xiàn)機械化和自動化。終點法:單波長、雙波長終點法、比濁法、一點、二點終點法27連續(xù)監(jiān)測法:兩點、多點速率法。測定波長可選單、雙、多波長。校正波長:兩點、多點校正、線性、非線性等。掌握這些方法是有效使用生物化學(xué)分析儀的重要保證。28(一)終點分析法(平衡法)終點分析法是基于反應(yīng)達(dá)到平衡時反應(yīng)產(chǎn)物的吸光光譜特征及其對光吸收強度的大小,對物質(zhì)進行定量分析的一類方法。1.一點終點法:其特點是使用一種或兩種試劑。
樣品+試劑終點比色(測定吸光度)計算292.兩點終點法:也稱固定時間法。是一種使用雙試劑以來出現(xiàn)的分析方法。優(yōu)點是可以消除干擾(顏色、濁度、干擾物)。①單試劑二點法:樣品+試劑讀取A1讀取A2
A=A2-A1,再與標(biāo)準(zhǔn)A值計算求得待測特濃度延滯期30②雙試劑二點法:原理是加入樣品后分別讀取試劑I的A1、讀取試劑II的A2。實際讀取兩次吸光度,第一次相當(dāng)于讀取樣品空白的值,加入試劑II至第二次讀數(shù)才是實際的呈色反應(yīng),因此△A=A2-A1。313.雙波長法雙波長不僅適應(yīng)終點法,還可用于動態(tài)監(jiān)測法。優(yōu)點:①有效地校準(zhǔn)樣本的混濁(脂血)、溶血、黃疸。②對電源波動有補償效果。③通過消除背景吸收減少樣品的顏色和濁度的影響。32原理是用主波長的吸光度-副波長的吸光度,樣品與標(biāo)準(zhǔn)同等對待,計算待測物(樣品)的濃度。33(二)連續(xù)監(jiān)測法測定底物的消耗或產(chǎn)物生成速度的化學(xué)方法稱為連續(xù)監(jiān)測法(又稱動態(tài)分析法、速率法或動力法)。原理是在酶促反應(yīng)的最適應(yīng)條件下,用物理、化學(xué)或酶促反應(yīng)的分析方法,在反應(yīng)速度恒定期(零級反應(yīng)期)來連續(xù)觀察和記錄一定反應(yīng)時間內(nèi)底物或產(chǎn)物量的變化。以單位時間酶反應(yīng)初速度計算出酶活力的大小和代謝物的濃度。34檢測方法:①兩點速率法:觀察兩個時間點的吸光度。用兩個吸光度的差值(△A)除以時間(分)計算每分鐘的吸光度值。35②多點速率法:在酶促反應(yīng)過程的零級反應(yīng)期間每隔一定時間(2-30秒)進行一次監(jiān)測,連續(xù)監(jiān)測多次,求出單位時間內(nèi)的反應(yīng)速度即A,從而求出酶活力的大小或濃度。全自動生化分析儀上最常使用的多點速率法是最小二乘法,它是用最小平方法求得每分鐘的吸光度變化(△A),從而求出酶的活性值或濃度的。36四、自動生化分析儀的性能
及評價主要技術(shù)指標(biāo)和性能1、自動化程度指在人發(fā)出指令后,能夠由儀器自己獨立完成工作的程度。半自動生化分析儀全自動生化分析儀372、分析效率在測定方法相同時分析儀的分析速度
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