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Word-3-豬偽狂犬病的診斷與鑒別方法本病按照疾病的臨診癥狀,結(jié)合流行病學(xué),可做出初步診斷,確診必需舉行試驗室檢查。同時要注重與豬細(xì)小病毒、流行性乙型腦炎病毒等引起的母豬繁殖障礙相區(qū)分。
本文為大家介紹豬偽狂犬病的診斷與鑒別辦法,供參考。
一、病毒分別鑒定
病毒的分別是診斷偽狂犬病的牢靠辦法?;疾游锏亩喾N病料組織如腦、心、肝、脾、肺、腎、扁桃體等均可用于病毒的分別,但以腦組織和扁桃體最為抱負(fù)。
其它,鼻咽分泌物也可用于病毒的分別。病料處理后可直接接種敏感細(xì)胞,如豬腎傳代細(xì)胞(pk一l5和ibrs一2)、雞胚成纖維細(xì)胞(cef),在接種后24~72小時內(nèi)可浮現(xiàn)典型的細(xì)胞病變。
分別到病毒后再用標(biāo)準(zhǔn)陽性血清做中和實驗以確診本病。
二、切片檢查
組織切片熒光抗體檢測取患病動物的病料如腦或扁桃體的壓片或冰凍切片,用直接免疫熒光檢查。
其優(yōu)點是迅速,在幾小時內(nèi)即可得到牢靠結(jié)果,對于新生仔豬,其敏感性與病毒分別相當(dāng),但對于育肥豬與成年豬,該法則不如病毒分別敏感。
三、pcr檢測
pcr檢測豬偽狂犬病病毒通過pcr可從患病動物的分泌物如鼻咽拭子或組織病料中擴(kuò)增豬偽狂犬病病毒的基因,從而對患病動物舉行確診。
pcr與病毒分別鑒定相比,具有迅速、敏感、特異性強(qiáng)等優(yōu)點,能同時檢測大批量的樣品,并且能舉行活體檢測,適合于臨診診斷。
四、血清學(xué)檢查
血清學(xué)診斷多種血清學(xué)辦法可用于偽狂犬病的診斷,應(yīng)用最廣泛的有中和實驗、酶聯(lián)免疫吸附實驗、乳膠凝集實驗、補(bǔ)體結(jié)合實驗及間接免疫熒光等。
其中血清中和實驗的特異性、敏感性都是最好的,并且被世界動物衛(wèi)生組織(oie)列為法定的診斷辦法。
酶聯(lián)免疫吸附實驗同樣具有特異性強(qiáng)、敏感性高的特征,3~4h內(nèi)可得出實驗結(jié)果,并可同時檢測大批量樣品,廣泛用于偽狂犬病的臨診診斷。
其它,近幾年來,乳膠凝集實驗以其獨特的優(yōu)點也在臨診上廣泛應(yīng)用,操作極其簡便,幾分鐘之內(nèi)便可得出實驗結(jié)果。
五、鑒別診斷
鑒別診斷豬偽狂犬病病毒鑒別診斷辦法是在使用基因標(biāo)志疫苗的基礎(chǔ)上應(yīng)用的一類診斷辦法。因為prv中存在多個非必須糖蛋白基因,缺失這些基因的病毒突變株不能產(chǎn)生被缺失基因所編碼的糖蛋白,但又不影響病毒在細(xì)胞上的增殖與免疫原性。將這種基因缺失標(biāo)志疫苗注射動物后,動物不能產(chǎn)生針對缺失蛋白的抗體。因此,可利用血清學(xué)辦法將自然感染野毒的血清學(xué)陽性豬與注苗豬區(qū)別開來。
目前,缺失疫苗缺失的糖蛋白基因主要為ge和gg基因,也有缺失gc、gb基因的。針對缺失的糖蛋白已通過大腸桿菌或酵母等表述系統(tǒng)的表述產(chǎn)物建立了相應(yīng)的鑒別診斷辦法:ge一elisa(酶聯(lián)免疫吸附實驗)、gg一elisa、gc一elisa、gb一elisa以及ge一lat(乳膠凝集實驗)、gg、lat等,試驗證明這些辦法的特異性強(qiáng)、敏感性高,可用于臨診檢測,同時乳膠凝集還具有容易、迅速的特征。目前,在我國已有g(shù)e一elisa、gg一elisa和ge一lat、gg一lat問世。
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