電泳系統(tǒng)運用及留意事項

科研試驗中心欒廣信電源開關(guān)停止鍵啟動鍵暫停鍵恒壓模式恒流模式參數(shù)上下調(diào)整鍵顯示屏恒壓和恒流模式顯示燈電路途插口電泳儀電源水平電泳主要用來檢測不同大小的DNA或者RNA片段；垂直電泳主要用來檢測不同大小的蛋白質(zhì)或者小片段的DNA或者RNA水平電泳系統(tǒng)水平電泳槽凝膠盒制膠槽樣品梳瓊脂糖凝膠的制備見視頻水平電泳的運用見視頻一、水平電泳系統(tǒng)運用留意事項1、凝膠制備2、加樣3、電泳條件設(shè)置，起先電泳4、結(jié)束電泳，取出樣品1、凝膠制備留意事項1.1瓊脂糖應(yīng)完全熔化呈清澈、透亮的液體。1.2溶化后，當(dāng)膠冷卻至60～70℃時加入染料，充分搖勻。1.3倒膠時，動作要輕，避開產(chǎn)生氣泡，直到在整個凝膠盒表面形成勻整的膠層。1.4科研中心嚴(yán)禁運用EB染料!!!!!1.5一般在膠冷卻室溫30～45min后垂直向上拔出梳子。1.6一般電泳時，凝膠的厚度在5～7mm之間最合適。凝膠太薄，樣品會溢出；凝膠太厚，會降低電泳圖像上樣品的信號強度。2、加樣留意事項負(fù)極正極加樣孔2.1將凝膠盒放入電泳槽中，點樣孔靠近電泳槽的負(fù)極2.3上樣前樣品和LoadingBuffer（載樣緩沖液）應(yīng)當(dāng)充分混勻，否則樣品會漂散。2.2電泳緩沖液應(yīng)高于凝膠面2㎜左右。3、電泳儀運用留意事項3.1留意連接方式：連接電泳槽的電線時留意顏色的匹配，黑色連接線連接黑色插孔，紅色連接線連接紅色插孔。3.2電泳儀電線插孔連接方式：黑黑紅紅3.3不要在層析冷柜中運用電泳儀。3.4在暫停狀態(tài)下可：重新接線，重新選擇恒壓或者恒流模式，重新設(shè)定參數(shù)3.5如是定時的程序，系統(tǒng)會自動停止運行；如是不定時的程序，按Stop按鈕終止

4、結(jié)束電泳留意事項

1、只有在按下STOP鍵后方可關(guān)機，嚴(yán)禁當(dāng)儀器處在RUN和PAUSE狀態(tài)時關(guān)機。2、移除電泳槽蓋時要當(dāng)心，不要使電泳緩沖液溢出。3、運用后用去離子水清洗電泳槽內(nèi)部及凝膠盒、制膠槽、樣品梳。垂直電泳系統(tǒng)SDS膠的制備見視頻SDS電泳見視頻二、垂直電泳系統(tǒng)運用方法1、玻璃盒和灌膠臺組裝2、灌膠3、電泳模具裝配4、上樣5、電泳1、玻璃盒和灌膠臺組裝留意事項

1、把灌膠架直立放在一平坦表面上，壓力板處于打開位置。2、放入灌膠架時，使短玻板正對灌膠架前面3、兩玻板底部平齊以免灌膠時漏膠。4、玻板運用前確定要干凈2、灌膠留意事項

1、把梳子完全放入裝配好的凝膠盒，在梳齒下方1cm處的玻璃板上做上標(biāo)記，以此作為分別膠灌注的平面。取掉梳子。2、灌膠前，加水檢測是否漏膠3、灌膠前確定要混勻，灌膠時，盡量避開氣泡產(chǎn)生4、分別膠凝固后，插入一張濾紙以吸干分別膠上方兩玻璃板間的水或緩沖液。5、插梳子時，先將一端插入，然后插入另一端可避開產(chǎn)生氣泡。6、配分別膠和濃縮膠時，TEMED最終加入，TEMED可以催化過硫酸銨產(chǎn)生自由基，從而加速丙烯酰胺凝膠的聚合。7、運用后用蒸餾水、去離子水沖洗灌膠架和灌膠臺。

3、電泳模具裝配留意事項

1、確保凝膠盒夾心的短玻板朝內(nèi)對著U形墊子的凹口。2、內(nèi)槽加滿緩沖液，

外槽緩沖液沒過電極4、上樣留意事項用注射器或者移液器加樣時盡量貼壁。蓋上電泳槽蓋時，槽蓋上的小孔確定要對準(zhǔn)電泳槽對應(yīng)的凸出部分5、電泳儀運用留意事項1、蓋上電泳槽蓋時，確保蓋上的插頭和微型槽插孔上的顏色一樣。2、電源線按正確的電極插入電泳