大型溞活動(dòng)抑制實(shí)驗(yàn)大型溞活動(dòng)抑制實(shí)驗(yàn)1內(nèi)容簡(jiǎn)介1實(shí)驗(yàn)?zāi)康呐c內(nèi)容2實(shí)驗(yàn)原理3實(shí)驗(yàn)材料與方法4習(xí)題或思考8實(shí)驗(yàn)步驟5注意事項(xiàng)7結(jié)果與討論6內(nèi)容簡(jiǎn)介1實(shí)驗(yàn)?zāi)康呐c內(nèi)容2實(shí)驗(yàn)原理3實(shí)驗(yàn)材料與方法4習(xí)21.簡(jiǎn)介大型溞(DaphniaMagna)是水生生態(tài)系統(tǒng)食物鏈的重要環(huán)節(jié)，以其為指示生物評(píng)價(jià)污染物毒性具有靈敏度高、繁殖率高、重復(fù)性好等優(yōu)點(diǎn)，已被廣泛采納為標(biāo)準(zhǔn)水生指示生物，而且實(shí)驗(yàn)測(cè)定方法國(guó)際上比較規(guī)范。1.簡(jiǎn)介大型溞(DaphniaMagna)是水生生31.簡(jiǎn)介

大型溞(Daphniamagna)的生命周期分為：卵、幼溞、青年溞、成溞，其壽命依賴條件有很大的變化，每年的大多數(shù)時(shí)期，種群幾乎完全是由雌性組成。圖1大型溞雌性與雄性個(gè)體照片

1.簡(jiǎn)介大型溞(Daphniamagna)4

2.實(shí)驗(yàn)?zāi)康呐c內(nèi)容觀察正常大型溞游動(dòng)的情況使用倒置顯微鏡觀察正常大型溞結(jié)構(gòu)和雌雄的區(qū)別測(cè)定化合物對(duì)大型溞的24h活動(dòng)抑制的EC50值實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/p>

實(shí)驗(yàn)內(nèi)容

了解大型溞的生命周期變化觀察正常和畸形大型溞的結(jié)構(gòu)掌握大型溞急性毒性實(shí)驗(yàn)方法2.實(shí)驗(yàn)?zāi)康呐c內(nèi)容觀察正常大型溞游動(dòng)的情況實(shí)驗(yàn)?zāi)康膶?shí)驗(yàn)內(nèi)53.實(shí)驗(yàn)原理

劑量反應(yīng)關(guān)系指不同劑量外源化學(xué)物質(zhì)與其引起的效應(yīng)發(fā)生率之間的關(guān)系。量反應(yīng)關(guān)系曲線有直線型、拋物線型和S曲線型，見圖2。S曲線型較為常見。3.實(shí)驗(yàn)原理劑量反應(yīng)關(guān)系指不同劑量外源化學(xué)物質(zhì)與其引6

4.實(shí)驗(yàn)材料與方法根據(jù)具體情況選擇受試化合物(農(nóng)藥、醫(yī)藥等)。氯化鈣；硫酸鎂；碳酸氫鈉；氯化鉀；鹽酸；氫氧化鈉。實(shí)驗(yàn)儀器

實(shí)驗(yàn)試劑

溶解氧測(cè)定儀、水硬度儀、生化培養(yǎng)箱、倒置顯微鏡、超聲波清洗儀、pH計(jì)、燒杯等4.實(shí)驗(yàn)材料與方法根據(jù)具體情況選擇受試化合物(農(nóng)藥、醫(yī)藥等7

4.實(shí)驗(yàn)材料與方法毒性實(shí)驗(yàn)方法本實(shí)驗(yàn)參照采用國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)ISO6341-1982和OECD202的大型溞活動(dòng)抑制測(cè)定方法，測(cè)定物質(zhì)或廢水對(duì)大型溞的半數(shù)效應(yīng)濃度(24h-EC50)，用于判斷物質(zhì)和廢水的毒性程度。4.實(shí)驗(yàn)材料與方法毒性實(shí)驗(yàn)方法本實(shí)驗(yàn)參照采用國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)85.實(shí)驗(yàn)步驟

1234準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn)化合物的

配制預(yù)實(shí)驗(yàn)正式實(shí)驗(yàn)5.實(shí)驗(yàn)步驟1234準(zhǔn)預(yù)正9

5.實(shí)驗(yàn)步驟準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn)試驗(yàn)用水：適于培養(yǎng)溞類的任何水，無論是天然水或標(biāo)準(zhǔn)稀釋水，都可用于測(cè)試試驗(yàn)?；衔锏呐渲婆渲瀑A備液時(shí)，難溶于水的物質(zhì)可用適當(dāng)?shù)姆椒▽⑵淙芙饣蚍稚?，包括采用超聲波裝置和使用對(duì)溞低毒的助溶劑，并應(yīng)加設(shè)助溶劑對(duì)照試驗(yàn)。

預(yù)試驗(yàn)在正式實(shí)驗(yàn)之前，先進(jìn)行較大范圍濃度系列的初步試驗(yàn)，為正式試驗(yàn)設(shè)置受試物的濃度提供依據(jù)。5.實(shí)驗(yàn)步驟準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn)化合物的配制預(yù)試驗(yàn)10

5.實(shí)驗(yàn)步驟

正式實(shí)驗(yàn)

根據(jù)預(yù)試驗(yàn)的結(jié)果，至少設(shè)五個(gè)濃度組，必須設(shè)置空白對(duì)照。每個(gè)濃度組和對(duì)照組要用25只溞，分成5組，每組5只。實(shí)驗(yàn)溫度18~22℃。在自然光照下進(jìn)行，光暗比為12:12。記錄24h溞類累計(jì)活動(dòng)抑制數(shù)。在實(shí)驗(yàn)開始和結(jié)束時(shí)，應(yīng)測(cè)定實(shí)驗(yàn)用水的pH值，溶解氧，硬度等。5.實(shí)驗(yàn)步驟正式實(shí)驗(yàn)11

6.結(jié)果與討論以表格形式記錄預(yù)實(shí)驗(yàn)和正式實(shí)驗(yàn)的結(jié)果。概率單位圖解法估算EC50，并利用統(tǒng)計(jì)分析軟件的概率回歸分析方法計(jì)算EC50和95％置信區(qū)間

。6.結(jié)果與討論以表格形式記錄預(yù)實(shí)驗(yàn)和正式實(shí)驗(yàn)的結(jié)果。概率單12

7.注意事項(xiàng)為了保證大型溞對(duì)毒物良好的敏感性，溞齡最好在6-24h之間。實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)，實(shí)驗(yàn)溶液中的溶解氧濃度應(yīng)高于空氣飽和值的60％。實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)，對(duì)照組中活動(dòng)受抑制溞類數(shù)應(yīng)少于10％。

受試物實(shí)測(cè)濃度不能低于設(shè)置濃度的80％。定期測(cè)定參比物的24hEC50，以檢查供試溞的敏感性。滿足參比物質(zhì)重鉻酸鉀的24hEC50值≤2.0mg/L，溞敏感度符合要求。7.注意事項(xiàng)為了保證大型溞對(duì)毒物良好的敏感性，溞齡最好在613

8.習(xí)題與思考EC50是否還有其它的計(jì)算方法？如果有，哪種更好一些？2.對(duì)于水溶解性差的物質(zhì)，助溶劑的使用是否能保證數(shù)據(jù)的可靠性？8.習(xí)題與思考EC50是否還有其它的計(jì)算方法？如果有，哪種14ThankYou!ThankYou!15大型溞活動(dòng)抑制實(shí)驗(yàn)大型溞活動(dòng)抑制實(shí)驗(yàn)16內(nèi)容簡(jiǎn)介1實(shí)驗(yàn)?zāi)康呐c內(nèi)容2實(shí)驗(yàn)原理3實(shí)驗(yàn)材料與方法4習(xí)題或思考8實(shí)驗(yàn)步驟5注意事項(xiàng)7結(jié)果與討論6內(nèi)容簡(jiǎn)介1實(shí)驗(yàn)?zāi)康呐c內(nèi)容2實(shí)驗(yàn)原理3實(shí)驗(yàn)材料與方法4習(xí)171.簡(jiǎn)介大型溞(DaphniaMagna)是水生生態(tài)系統(tǒng)食物鏈的重要環(huán)節(jié)，以其為指示生物評(píng)價(jià)污染物毒性具有靈敏度高、繁殖率高、重復(fù)性好等優(yōu)點(diǎn)，已被廣泛采納為標(biāo)準(zhǔn)水生指示生物，而且實(shí)驗(yàn)測(cè)定方法國(guó)際上比較規(guī)范。1.簡(jiǎn)介大型溞(DaphniaMagna)是水生生181.簡(jiǎn)介

大型溞(Daphniamagna)的生命周期分為：卵、幼溞、青年溞、成溞，其壽命依賴條件有很大的變化，每年的大多數(shù)時(shí)期，種群幾乎完全是由雌性組成。圖1大型溞雌性與雄性個(gè)體照片

1.簡(jiǎn)介大型溞(Daphniamagna)19

2.實(shí)驗(yàn)?zāi)康呐c內(nèi)容觀察正常大型溞游動(dòng)的情況使用倒置顯微鏡觀察正常大型溞結(jié)構(gòu)和雌雄的區(qū)別測(cè)定化合物對(duì)大型溞的24h活動(dòng)抑制的EC50值實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/p>

實(shí)驗(yàn)內(nèi)容

了解大型溞的生命周期變化觀察正常和畸形大型溞的結(jié)構(gòu)掌握大型溞急性毒性實(shí)驗(yàn)方法2.實(shí)驗(yàn)?zāi)康呐c內(nèi)容觀察正常大型溞游動(dòng)的情況實(shí)驗(yàn)?zāi)康膶?shí)驗(yàn)內(nèi)203.實(shí)驗(yàn)原理

劑量反應(yīng)關(guān)系指不同劑量外源化學(xué)物質(zhì)與其引起的效應(yīng)發(fā)生率之間的關(guān)系。量反應(yīng)關(guān)系曲線有直線型、拋物線型和S曲線型，見圖2。S曲線型較為常見。3.實(shí)驗(yàn)原理劑量反應(yīng)關(guān)系指不同劑量外源化學(xué)物質(zhì)與其引21

4.實(shí)驗(yàn)材料與方法根據(jù)具體情況選擇受試化合物(農(nóng)藥、醫(yī)藥等)。氯化鈣；硫酸鎂；碳酸氫鈉；氯化鉀；鹽酸；氫氧化鈉。實(shí)驗(yàn)儀器

實(shí)驗(yàn)試劑

溶解氧測(cè)定儀、水硬度儀、生化培養(yǎng)箱、倒置顯微鏡、超聲波清洗儀、pH計(jì)、燒杯等4.實(shí)驗(yàn)材料與方法根據(jù)具體情況選擇受試化合物(農(nóng)藥、醫(yī)藥等22

4.實(shí)驗(yàn)材料與方法毒性實(shí)驗(yàn)方法本實(shí)驗(yàn)參照采用國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)ISO6341-1982和OECD202的大型溞活動(dòng)抑制測(cè)定方法，測(cè)定物質(zhì)或廢水對(duì)大型溞的半數(shù)效應(yīng)濃度(24h-EC50)，用于判斷物質(zhì)和廢水的毒性程度。4.實(shí)驗(yàn)材料與方法毒性實(shí)驗(yàn)方法本實(shí)驗(yàn)參照采用國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)235.實(shí)驗(yàn)步驟

1234準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn)化合物的

配制預(yù)實(shí)驗(yàn)正式實(shí)驗(yàn)5.實(shí)驗(yàn)步驟1234準(zhǔn)預(yù)正24

5.實(shí)驗(yàn)步驟準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn)試驗(yàn)用水：適于培養(yǎng)溞類的任何水，無論是天然水或標(biāo)準(zhǔn)稀釋水，都可用于測(cè)試試驗(yàn)?；衔锏呐渲婆渲瀑A備液時(shí)，難溶于水的物質(zhì)可用適當(dāng)?shù)姆椒▽⑵淙芙饣蚍稚?，包括采用超聲波裝置和使用對(duì)溞低毒的助溶劑，并應(yīng)加設(shè)助溶劑對(duì)照試驗(yàn)。

預(yù)試驗(yàn)在正式實(shí)驗(yàn)之前，先進(jìn)行較大范圍濃度系列的初步試驗(yàn)，為正式試驗(yàn)設(shè)置受試物的濃度提供依據(jù)。5.實(shí)驗(yàn)步驟準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn)化合物的配制預(yù)試驗(yàn)25

5.實(shí)驗(yàn)步驟

正式實(shí)驗(yàn)

根據(jù)預(yù)試驗(yàn)的結(jié)果，至少設(shè)五個(gè)濃度組，必須設(shè)置空白對(duì)照。每個(gè)濃度組和對(duì)照組要用25只溞，分成5組，每組5只。實(shí)驗(yàn)溫度18~22℃。在自然光照下進(jìn)行，光暗比為12:12。記錄24h溞類累計(jì)活動(dòng)抑制數(shù)。在實(shí)驗(yàn)開始和結(jié)束時(shí)，應(yīng)測(cè)定實(shí)驗(yàn)用水的pH值，溶解氧，硬度等。5.實(shí)驗(yàn)步驟正式實(shí)驗(yàn)26

6.結(jié)果與討論以表格形式記錄預(yù)實(shí)驗(yàn)和正式實(shí)驗(yàn)的結(jié)果。概率單位圖解法估算EC50，并利用統(tǒng)計(jì)分析軟件的概率回歸分析方法計(jì)算EC50和95％置信區(qū)間

。6.結(jié)果與討論以表格形式記錄預(yù)實(shí)驗(yàn)和正式實(shí)驗(yàn)的結(jié)果。概率單27

7.注意事項(xiàng)為了保證大型溞對(duì)毒物良好的敏感性，溞齡最好在6-24h之間。實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)，實(shí)驗(yàn)溶液中的溶解氧濃度應(yīng)高于空氣飽和值的60％。實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)，對(duì)照組中活動(dòng)受抑制溞類數(shù)應(yīng)少于10％。

受試物實(shí)測(cè)濃度不能低于設(shè)置濃度的80％。定期測(cè)定參比物的24hEC50，以檢查供試溞的敏感性。滿足參比物質(zhì)重鉻酸鉀的24h