4/4高效液相色譜儀的維護與保養(yǎng)液相色譜儀應(yīng)該進行適當?shù)木S護保養(yǎng)，維護保養(yǎng)按照維護頻率分為日常維護、每周維護及每月維護。每周維護、每月維護活動均應(yīng)記錄在儀器維護記錄本上。1日常維護1.1溶劑配制所有溶劑應(yīng)為HPLC級，水應(yīng)為二次超純水。溶劑必須經(jīng)過濾膜過濾，過濾水和有機相時應(yīng)該選用不同的濾膜。纖維素膜主要用于水溶液，尼龍濾膜和PTFE膜均是通用型濾膜。常用0.45μm濾膜，如果使用亞二微米顆粒色譜柱，建議使用0.22μm濾膜。溶劑使用前必須脫氣，常用超聲脫氣20-30min。1.2開機準備新鮮的純水和有機溶劑以及方法所需的溶液。按順序打開儀器各組件電源→電腦電源→打開工作站。確認工作站和儀器連接正常，通過工作站或手動打開排氣閥，將需要用到的通道分別100%以流速3ml/min~5ml/min排氣。（所需流量參考日常工作的排氣流量）（多個泵同時排氣簡單對泵造成損耗，不建議！）確認各通道排氣完成后，關(guān)閉排氣閥。用20倍以上的柱體積的有機溶劑沖洗系統(tǒng)。（注意：有機溶劑沖洗前需確認之前關(guān)機時已經(jīng)移除系統(tǒng)中的緩沖鹽）調(diào)用運行方法，使用5~10倍柱體積的方法所需流動相比例平衡系統(tǒng)。平衡系統(tǒng)前用所需方法的流動相比例在排氣閥打開的情況下以3ml/min~5ml/min運行一段時間，讓泵中的流動相比例快速達到所需的流動相比例。更換洗針溶劑、更換密封墊清洗溶劑。1.3試驗中注意1.3.1流動相在選擇A、B、C、D泵放置流動相時，將鹽溶液連接在一個底部梯度閥端口上，有機溶劑連接在一個上部梯度閥端口上。最好使有機溶劑通道位于鹽溶液通道的正上方。最好不要將純水溶液作為流動相的一組，如果使用了水相作為流動相的一組，應(yīng)注意定期更換、過濾溶劑，不應(yīng)超過2天，避免陽光直接照射。如果試驗允許，可向水相中加入0.001-0.0001M的疊氮化鈉。1.3.2色譜柱使用流動相前千萬注意，流動相與色譜柱內(nèi)的保存溶劑和系統(tǒng)內(nèi)存留溶劑的混溶性，避免形成乳化小液滴，從而毀壞柱子?？梢允褂卯惐甲鳛檫^渡溶劑。使用保護柱，延長色譜柱的使用壽命。1.3.2洗針液和清洗密封墊溶液每天觀察洗針液和清洗密封墊的溶液，及時更新。洗針液的選擇依據(jù)樣品的極性，樣品可在洗針液中洗針液中溶解，即達到效果，一般情況下，可裝50%甲醇溶液或者50%乙腈溶液。清洗密封墊的溶液一般為10%異丙醇。如果清洗液和洗針液足夠，則使用5個工作日后需更換新的溶液。1.4關(guān)機試驗結(jié)束后，要把柱子和系統(tǒng)流路沖洗干凈，用有機溶劑保存，然后關(guān)機。具體步驟如下：關(guān)閉檢測器的燈。確認所有的液相色譜管路暢通。例如：Agilent1260LC四元泵系統(tǒng)的A\B\C\D四路管路+sealwash管路+系統(tǒng)中的主路旁路。WatersAlliance系統(tǒng)（包括2690，2695，e2695）的A\B\C\D四路管路+SealWashIn（綠色標簽）+NeedleWash（純綠色管路）。將水相管路中的緩沖鹽移除。（將緩沖鹽的流路更換成純水，系統(tǒng)中用不大于80%比例的水相沖洗移除緩沖鹽。）將水相溶劑更換成有機相（甲醇或乙腈），并將系統(tǒng)中所有流路置換成有機相。關(guān)閉儀器電源和電腦系統(tǒng)。2每周維護2.1定期灌注：儀器一周（5天）不使用時，需將系統(tǒng)用有機溶劑（一般為甲醇）重新填滿。2.2檢查清洗閥濾芯和色譜柱濾芯。清洗閥濾芯被堵塞的表現(xiàn)是有一層黃色或黑色表面、沉淀物，或者打開清洗閥(purge閥)用泵以5mL/min的流量輸送水時它的壓力大于10bar即150psi。2.3檢查溶劑過濾器是否堵塞或變色。若有，采用4.3.2的方法清洗。2.4檢查系統(tǒng)是否有漏液情況、緩沖鹽結(jié)晶情況。若有，采用適當?shù)牡姆椒ㄌ幚怼?.5使用水沖洗所有多通道梯度閥（MCGV）通道，除掉閥端口中所有可能的鹽沉淀物。3每月維護3.1清洗溶劑瓶，清洗完畢放入烘箱中（設(shè)置溫度80℃）滅菌，2小時候取出放置3.2清洗溶劑過濾器：用純水沖洗殘留之溶劑后，玻璃過濾器用濃硝酸（35％）的燒杯里浸超過一小時，再用超純水徹底沖洗過濾器，玻璃過濾器不能用超聲波清洗；不銹鋼溶劑過濾頭可用甲醇超聲波清洗15分鐘，再用超純水徹底沖洗。3.3清洗管路：移除色譜柱，接兩通。分別使用60℃-70℃的純化水（流速：1.0ml/min）、異丙醇（流速：0.5ml/min）、甲醇（流速：1.0ml/min）沖洗4個管路，單個管路沖洗不少于30分鐘。3.4檢測器：檢查氘燈使用時長及氘燈能量，是否滿足準確檢測的需求，依據(jù)實際情況提前購買備用氘燈。4.泵的常見問題及解決方案項目現(xiàn)象原因解決方案1當閥關(guān)閉后，有溶劑從廢液管出口滴出泵頭漏液更換沖洗閥濾芯或沖洗閥2壓力脈動不穩(wěn)定主動入口閥濾芯不干凈更換主動入口閥后，進行滲漏測試以驗證3梯度性能問題，間歇性的壓力波動溶劑過濾頭堵塞清洗或更換溶劑入口過濾芯4濾芯的壓降大于10bar即150psi（5ml/minH2O沖洗閥打開）說明堵塞了濾芯不干凈更換沖洗閥濾芯或沖洗閥5泵頭下側(cè)漏液保留時