人教版高中生物選修三現(xiàn)代生物科技專題專題二細胞工程2.2.2動物細胞融合與單克隆抗體▲那么,不同動物的體細胞是否也能進行雜交呢?

1970年，有兩位科學家做了一個著名的實驗：人—鼠細胞融合的實驗。

人—鼠細胞是怎樣實現(xiàn)融合的？動物細胞融合的過程、原理及意義又是怎樣的呢？

▲動物細胞融合也稱細胞雜交，是指兩個或多個動物細胞結合形成一個細胞的過程、這個細胞是個單核細胞、稱為雜交細胞。

探究一、動物細胞融合1、什么是動物細胞融合？動物細胞融合與植物原生質體融合的基本原理相同：細胞膜的流動性

誘導動物細胞融合的方法與植物原生質體融合的方法也類似：

▲2、人工誘導動物細胞融合的方法有:___________________________________________________________；與人工誘導植物體細胞雜交的方法相比多了_____________________.化學法（PEG）物理法（離心、震動、電激）生物法（滅活的病毒）生物法（滅活的病毒）滅活的病毒能與細胞膜上糖蛋白發(fā)

生作用、使細胞相互凝集、細胞膜

上的蛋白質分子和脂質分子重新排

布，細胞膜打開，細胞發(fā)生融合.3、▲意義：突破了有性雜交的局限、使遠緣雜交成為可能?！饕猛荆褐圃靻慰寺】贵w植物A細胞植物B細胞去壁原生質體A原生質體B誘導融合融合體再生壁雜種細胞雜種植株細胞培養(yǎng)篩選

（1）動物細胞融合不需要去除細胞壁；

（2）動物細胞融合常使用滅活的病毒，而植物細胞融合不用；（3）植物雜交細胞可以培養(yǎng)成雜種植株，動物細胞融合形成雜交細胞即可?！?、動物細胞融合與植物體細胞雜交有哪些不同？項目植物體細胞雜交動物細胞融合原理融合前處理誘導方法結果意義用途細胞膜的流動性細胞膜的流動性和植物細胞的全能性分散成單個細胞去除細胞壁離心、振動、電激；聚乙二醇；滅活病毒離心、振動、電激；聚乙二醇獲得雜種細胞或細胞產(chǎn)物獲得雜種植株使遠緣雜交成為可能克服遠緣雜交障礙制備單克隆抗體培育作物新品種抗原吞噬細胞攝取處理T細胞暴露、呈遞B細胞直接刺激漿細胞增殖、分化抗體從動物血清中分離淋巴因子單克隆抗體

探究二單克隆抗體制備原理：

缺點：產(chǎn)量低、純度低，特異性差?？乖磸妥⑸鋭游飶膭游锏难逯蟹蛛x抗體1、傳統(tǒng)抗體的獲得及特點：請結合教材53頁回答以下問題2、B淋巴細胞有什么特點？3、若要想獲得大量的單一抗體，如何做呢？B淋巴細胞（漿細胞）能產(chǎn)生抗體，但每一個B淋巴細胞只分泌一種特異性抗體。必須克隆單個B淋巴細胞形成細胞群。4、在體外培養(yǎng)的條件下，一個B淋巴細胞是不可能無限增殖的，那么，怎樣解決這一問題的呢？1975年英國科學家米爾斯坦和科勒的設想5、制備單克隆抗體的依據(jù)：利用

產(chǎn)生特異性抗體的功能。利用無限增殖的特性利用技術將兩種細胞融合獲得雜交瘤細胞。利用技術大量培養(yǎng)雜交瘤細胞B淋巴細胞骨髓瘤細胞動物細胞融合動物細胞培養(yǎng)

原理：細胞免疫、細胞膜的流動性、細胞增殖1、為什么給小鼠注射特定的抗原蛋白(羊的紅細胞)？2、（只考慮兩兩融合）融合細胞有幾種類型？3、①本過程中進行了兩次篩選、目的分別是什么？

②如何進行雜交瘤細胞的抗體檢測及克隆化培養(yǎng)？4、雜交瘤細胞有何特點？探究三：單克隆抗體制備的過程

結合教材53及54頁、分組討論以下問題B淋巴細胞注射特定抗原蛋白骨髓瘤細胞培養(yǎng)骨髓瘤細胞融合在具有篩選作用的培養(yǎng)基上培養(yǎng)專一抗體檢驗陽性克隆上述雜交細胞分開不同雜交細胞，克隆專一抗體，檢驗陽性細胞獲得產(chǎn)生相應抗體的B細胞BB

、B瘤

、瘤瘤（B、瘤）第一次篩選出雜交瘤細胞（多種）?？寺』囵B(yǎng)和抗體檢測克隆化培養(yǎng)和抗體檢測：將雜交瘤細胞稀釋、用多孔細胞培養(yǎng)板，在每孔只有一個雜交瘤細胞的情況下開始培養(yǎng)，檢測各孔上清液中的抗體、那些上清液可與特定抗原結合的培養(yǎng)孔為陽性孔、再將陽性孔的細胞繼續(xù)進克隆化培養(yǎng)和抗體檢測行3-4次稀釋培養(yǎng)、直至確信每個孔中增殖的細胞為單克隆細胞。該過程即為雜交瘤細胞的克隆化培養(yǎng)。第二次篩選出能產(chǎn)生所需專一抗體的雜交瘤細胞雜交瘤細胞特點：該細胞繼承雙親細胞的遺傳特性，既能產(chǎn)生專一抗體又能迅速大量繁殖體外培養(yǎng)小鼠腹腔內(nèi)培養(yǎng)擴大培養(yǎng)

單---指單個的B細胞(即和骨髓瘤細胞雜

交的那一個B細胞);

克隆---指骨髓瘤細胞的大量快速的分裂.單克隆抗體優(yōu)點:

特異性強,靈敏度高、可大量制備

該抗體是由一個

(種)B細胞產(chǎn)生的一種

抗體,只針對一種抗原

發(fā)生作用.1、作為診斷試劑：①用于多種人類疾病和動植物病害的診斷及病原鑒定②利用同位素標記的單克隆抗體、在特定的組織中成像的技術、可定位診斷腫瘤、心血管畸形等疾病探究四：單抗隆抗體的應用具有準確、高效、簡易、快速特點.2、用于治療疾?。褐饕糜诎┌Y治療。3、用于運載藥物---生物導彈：抗癌細胞的單克隆抗體+放射性同位素或化學藥物或細胞毒素。（單克隆抗體：導向、準確找到癌細胞位置，原位殺死癌細胞。）優(yōu)點：療效高、毒副作用小兩個過程動物細胞培養(yǎng)過程單克隆抗體制備過程三個“一”一個誘導細胞融合的新方法－－滅活病毒一個新細胞－－雜交瘤細胞一個優(yōu)勢－－單克隆抗體特異性強、靈敏度高的優(yōu)勢本節(jié)小結B和B-B細