開題報(bào)告題目亳芍愈傷組織誘導(dǎo)過程中培養(yǎng)條件的優(yōu)化題目類型研究類題目來源科研研究背景（含國(guó)內(nèi)外相關(guān)研究現(xiàn)狀及綜述）與意義（1）背景亳芍即白芍，亳州地產(chǎn)藥材，指芍藥科植物芍藥或其變種毛果芍藥栽培品的根。亳芍為毛茛科多年生草本植物，花大而美麗，一般種植3—5年，9—10月采挖，去泥后放入開水中煮5—15分鐘，撈出后去皮曬干即可。加工后的芍藥呈粉白色或白色，故又稱“白芍”。生長(zhǎng)于海拔1500-2800米的山地、溪谷疏林中或山坡路邊。產(chǎn)于浙江、安徽、貴州、云南、四川和西藏等省區(qū)。亳州芍藥，《藥典》稱亳芍。性微寒，味微苦而酸。其根入藥有平抑肝陽，斂陰養(yǎng)血，收汗緩中之功效。有鎮(zhèn)痛、鎮(zhèn)靜、解痙的作用，主治月經(jīng)不調(diào)、經(jīng)前腹痛、盜汗、頭痛等。亳芍的產(chǎn)量約占全國(guó)的70%以上。亳芍種植面積逐年增加，而土地面積不變，連作不可避免。長(zhǎng)期的連作帶來了嚴(yán)重的病蟲害，尤為突出的是亳芍灰霉病和葉斑病。每年6月連續(xù)陰雨之后，長(zhǎng)出霉?fàn)钗铮ú≡訉?shí)體）；初期亳芍葉上出現(xiàn)褐色斑點(diǎn)，莖部同時(shí)出現(xiàn)褐色、梭形病斑，致使莖部腐爛，植株折斷，重則引起全株倒伏，8—9月，葉片上的斑點(diǎn)擴(kuò)大至逐漸枯萎脫落，導(dǎo)致全株死亡。亳芍葉斑病又名輪紋病，主要危害亳芍葉片。發(fā)病初期葉正面為褐色近圓形病斑，后逐漸擴(kuò)大，呈同心輪紋狀。病斑多時(shí)，互相連接成為大斑，使葉片枯死。天氣潮濕時(shí)，病斑上長(zhǎng)出黑色霉?fàn)钗铩Ｒ话阆虏咳~片先發(fā)病，逐漸向上部葉片擴(kuò)展。發(fā)病嚴(yán)重時(shí)，致使葉片焦枯，提早落葉，植株生長(zhǎng)勢(shì)衰弱，影響產(chǎn)量和質(zhì)量?；诖朔N現(xiàn)狀，研究者認(rèn)為愈傷組織的誘導(dǎo)培養(yǎng)研究迫在眉睫，以科學(xué)手段指導(dǎo)亳芍向高產(chǎn)量與高質(zhì)量方向發(fā)展。（2）意義芍藥作為大宗傳統(tǒng)中藥材，其使用量非常大。而芍藥苷作為一種重要的生理活性物質(zhì)，能有效抑制自身免疫反應(yīng)，對(duì)類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎具有確切療效，且目前已有藥品作為商用。但是，由于其的生長(zhǎng)周期較長(zhǎng)需3-5年成材，其受到地理、季節(jié)和氣候，以及栽培管理水平等多種因素的影響，藥材的質(zhì)量和產(chǎn)量存在較大波動(dòng)，不利于產(chǎn)品的穩(wěn)定生產(chǎn)和質(zhì)量控制。這些原因限制了芍藥苷的提取及應(yīng)用應(yīng)用。此外，藥材中芍藥苷的含量不高，導(dǎo)致分離和生產(chǎn)成本較高，也影響了芍藥苷藥物的大規(guī)模應(yīng)用。利用不同組織培養(yǎng)方法，得到培養(yǎng)物，為后續(xù)藥用成分提取提供原料。研究的主要內(nèi)容與方法研究主要內(nèi)容第一部分對(duì)于研究不同毫芍取材時(shí)間、材料的放置時(shí)間和培養(yǎng)基激素配比對(duì)芍藥組織培養(yǎng)的影響進(jìn)行研究分析。第二部分在選取個(gè)體中等、尚未完全展開的地下毫芍嫩芽。在相同材料的前提下，分析放置時(shí)間越長(zhǎng)短的毫芍材料成活率分析其褐化率。第三部分對(duì)于不同放置時(shí)間的地下嫩芽，考慮污染率和褐化率，選擇不同的處理其組織細(xì)胞失水，細(xì)胞活性降低，從而抵抗病菌的能力進(jìn)行相關(guān)分析其消毒的效果。第四部分對(duì)于芍藥莖尖愈傷組織誘導(dǎo)擴(kuò)大培養(yǎng)以芽基部愈傷組織為試驗(yàn)材料，選用MS為基本培養(yǎng)基，在不同濃度的BA、NAA中組合，進(jìn)行相關(guān)的研究觀察。第五部分對(duì)于毫芍愈傷組織誘導(dǎo)進(jìn)行的研究分析。（1）主要內(nèi)容及擬解決的問題①．材料處理取生長(zhǎng)約10cm左右的幼嫩莖段，以自來水沖洗表面灰塵，10-15min后，將莖截成2cm左右的小段，在無菌條件下，置于75%酒精溶液中浸泡15s左右，再用0.5%HgCl消毒10min左右，無菌水沖洗7-8次。②．培養(yǎng)基配比以MS培養(yǎng)基為基本培養(yǎng)基，加2%蔗糖，瓊脂1%，PH值調(diào)節(jié)至7.以不同植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑:IAA（吲哚乙酸，異生長(zhǎng)素，茁長(zhǎng)素3-吲哚乙酸等）,6-BA(萘乙酸），GA（赤霉素），分別配成不同培養(yǎng)基，用于培養(yǎng)愈傷組織。③．剝?nèi)デo尖:在解剖鏡下仔細(xì)剝離莖尖，切取0.2-0.4mm左右莖尖④．接種:接種在無菌培養(yǎng)基中，每瓶接種2個(gè)莖尖⑤．放入培養(yǎng)室培養(yǎng)⑥．觀察培養(yǎng)結(jié)果⑦．總結(jié)數(shù)據(jù)，得出結(jié)論擬解決問題:植物組織經(jīng)過脫分化形成過程是不可見光的，應(yīng)該在無光的條件下進(jìn)行，形成愈傷組織的再分化才可以見光，進(jìn)行光合作用。培養(yǎng)基的配比，莖尖的接種過程應(yīng)該在無菌條件下進(jìn)行，避免操作不當(dāng)，導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)結(jié)果不理想，或者實(shí)驗(yàn)失敗。（2）擬采取的研究方法、技術(shù)路線1.文獻(xiàn)收集法文獻(xiàn)收集法參考本文研究毫芍目標(biāo)查找文獻(xiàn)信息，尋找大量和愈傷組織有關(guān)的文獻(xiàn)內(nèi)容，在整理以及研究以上成果之后，進(jìn)行實(shí)踐調(diào)查以及研究，學(xué)習(xí)其中具有價(jià)值的理論，利用研究國(guó)內(nèi)當(dāng)前毫芍愈傷組織存在的各種問題，尋找值得學(xué)習(xí)內(nèi)容，確定科學(xué)的研究角度開展深入分析。2.案例分析法本文主要以亳芍愈傷組織誘導(dǎo)過程中培養(yǎng)條件的優(yōu)化為例子進(jìn)行深入研究，盡量在理論研究結(jié)果上增加論據(jù)，確保本文研究具有一定的實(shí)踐價(jià)值。歸納演繹法用知網(wǎng)與萬方的主要參考查找相關(guān)的毫芍愈傷組織誘導(dǎo)過程中培養(yǎng)條件進(jìn)行主要文獻(xiàn)參考資料的歸納并進(jìn)行相關(guān)的總結(jié)分析。技術(shù)路線:植物體MS培養(yǎng)基植物體MS培養(yǎng)基愈傷組織愈傷組織加富培養(yǎng)基加富培養(yǎng)基發(fā)育莖發(fā)育莖實(shí)驗(yàn)結(jié)果檢測(cè)實(shí)驗(yàn)結(jié)果檢測(cè)研究條件和可能存在的問題（1）研究條件①.愈傷組織接種條件需要在無菌條件下②.培養(yǎng)基的配置需要在無菌條件下③.培養(yǎng)愈傷組織條件：以日光燈為照射光源，每天光照12小時(shí)左右，溫度在25℃左右可能存在的問題無菌實(shí)驗(yàn)條件不完善選取的愈傷組織分化能力不強(qiáng)，影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果培育過程中，出現(xiàn)操作不當(dāng)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果論文（設(shè)計(jì)）進(jìn)度計(jì)劃（1）確定選題，填寫開題報(bào)告

2020年12月—2020年12月

（2）進(jìn)行課題滅菌條件實(shí)驗(yàn)

2020年12月—2021年01月

（3）進(jìn)行課題愈傷組織誘導(dǎo)實(shí)驗(yàn)

2021年01月—2021年03月

（4）整理數(shù)據(jù)，數(shù)據(jù)分析，撰寫論文初稿

2021年03月—2020年03月

（3）補(bǔ)充實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，論文第二次修改

2021年03月—2021年04月

（4）論文第三、四次修改

2021年04月—2021年04月

（5）論文定稿、裝訂和答辯

2021年04月—2021年05月參考文獻(xiàn)[1]Wu,

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-56指導(dǎo)教師意見簽字：