PAGE5PAGE1目的：為檢驗(yàn)醋酸地塞米松規(guī)定一個標(biāo)準(zhǔn)的程序，以便獲得準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。范圍：適用于醋酸地塞米松的檢驗(yàn)。職責(zé)：檢驗(yàn)室主任、檢驗(yàn)員。規(guī)程：1．性狀：本品為白色或類白色的結(jié)晶或結(jié)晶性粉末,無臭，味微苦。本品在丙酮中易溶，在甲醇或無水乙醇中溶解，在乙醇或氯仿中略溶，在乙醚中極微溶解，在水中不溶。1.1熔點(diǎn):本品按熔點(diǎn)測定法(SOP-QC-307-00)測定，熔點(diǎn)為223-233℃，熔融時同時分解為符合規(guī)定。1.2比旋度:取本品精密稱取250mg置25ml量瓶中，加二氧六環(huán)溶解并定量稀釋至刻度，搖勻，依法測定(SOP-QC-310-00)，比旋度為+82°至88°為符合規(guī)定。計(jì)算:a:旋光儀讀數(shù)；w:樣品稱重量(g)；B:水分含量(%)。1.3吸收系數(shù):取本品，精密稱取150mg置100ml量瓶中，加乙醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，再精吸1ml置100ml量瓶中，加乙醇稀釋至刻度，搖勻，照分光光度法(SOP-QC-301-00)，在240nm的波長處測定吸收度，吸收系數(shù)E1cm1%為343-371，為符合規(guī)定。2.鑒別2.1試劑與儀器2.1.1甲醇 2.1.2硫酸溶液(1→2)2.1.3堿性酒石酸銅 2.1.4乙醇制氫氧化鉀試液2.1.50.01mol/L氫氧化鈉溶液2.1.6茜素氟藍(lán)試液2.1.712%醋酸鈉的稀醋酸溶液2.1.8硝酸亞鈰試液2.1.9移液管（2ml，1ml，10ml）2.1.10紅外光譜儀2.1.11電爐2.1.12試管，燒杯，量筒2.1.13電子天平2.1.14錐形瓶（500ml）2.1.15 小型三用水箱 2.2項(xiàng)目與步驟2.2.1取本品約10mg加甲醇1ml微溫溶解后，加熱的堿性酒石酸銅試液1ml，即生成紅色沉淀。2.2.2取本品50mg加乙醇制氫氧化鉀試液2ml，置水溶中加熱5分鐘，放冷，加硫酸溶液(1→2)2ml緩緩煮沸1分鐘，即發(fā)生醋酸乙酯的香氣為符合規(guī)定。2.2.3取本品，照紅外分光光度法(SOP-QC-302-00)測定，紅外吸收圖譜應(yīng)與對照的圖譜（光譜集546圖）一致為符合規(guī)定。2.2.4本品顯有機(jī)氟化物的鑒別反應(yīng):取供試品約7mg，照氧瓶燃燒(SOP-QC-317-00)進(jìn)行有機(jī)破壞，用水20ml與0.01mol/L氫氧化納溶液6.5ml為吸收液，俟燃燒完畢后，充分振搖,取吸收液2ml加茜素氟藍(lán)試液0.5ml，再加12%醋酸鈉的稀醋酸溶液0.2ml用水稀釋至4ml，加硝酸亞鈰試液0.5ml即顯藍(lán)紫色，同時做空白對照試驗(yàn)為符合規(guī)定。3檢查3.1試劑與儀器3.1.1氯仿-甲醇(9:1)3.1.2二氯甲烷-醋酸甲酯-水(100:50:50)3.1.3堿性四氮唑藍(lán)試液3.1.4亞硒酸3.1.5硝酸溶液（3→10）3.1.6氨試液3.1.7鹽酸羥胺溶液(1→2)3.1.8二氨基荼試液3.1.9環(huán)已烷3.1.10無水硫酸鈉3.1.11碘化鉀3.1.12鹽酸溶液(1→2)3.1.13硫代硫酸鈉3.1.14淀粉指示液3.1.15容量瓶（10ml，100ml，250ml）3.1.16層析缸3.1.17微量進(jìn)樣器3.1.18硅膠G薄層板3.1.19噴霧器3.1.20移液管（1ml，5ml）3.1.21錐形瓶（100ml）3.1.22燒杯，量筒3.1.23碘量瓶3.1.24堿性滴定管3.1.25分液漏斗,漏斗架3.1.26鐵架臺3.1.27電爐3.1.28紫外分光光度計(jì)3.1.29恒溫烘箱3.1.30稱量瓶3.1.31坩堝3.1.32電子天平3.2項(xiàng)目與步驟3.2.1其他甾體:取本品精密稱取100mg置10ml量瓶中，加氯仿-甲醇(9:1)溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液，精密稱取1ml置100ml量瓶中，加氯仿-甲醇(9:1)溶解并稀釋至刻度，作為對照品的溶液。照薄層色譜法(SOP-QC-301-00)試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5μl分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，另取二氯甲烷-醋酸甲酯-水(100:50:50)，振搖混合，放置使分層，取下層澄清液為展開劑，展開后，晾干，在105℃干燥10分鐘，放冷，噴以堿性四氮唑藍(lán)試液，立即檢視，供試品溶液如顯雜質(zhì)斑點(diǎn)，其顏色與對照溶液的主斑點(diǎn)比較，不得更深為符合規(guī)定。3.2.2干燥失重: 取本品精密稱取1.0g,置稱量瓶中，照干燥失重測定法(SOP-QC-325-00)，在105℃干燥至恒重，減失重量不得過0.5%為符合規(guī)定。3.2.3熾灼殘?jiān)?取本品,照熾灼殘?jiān)鼨z查法(SOP-QC-327-00)檢查，不得過0.1%為符合規(guī)定。3.2.4硒: 取本品0.10g,依法檢查(SOP-QC-359-00),(0.0050%)為符合規(guī)定。4含量測定4.1試劑與儀器4.1.1C18硅膠色譜柱 4.1.2醋酸地塞米松對照品4.1.3甲睪酮對照品 4.1.4甲醇4.1.5容量瓶（50ml，25ml）、單標(biāo)移液管（5ml） 4.1.6電子天平（萬分之一克），稱量瓶4.1.7高效液相色譜儀4.2檢驗(yàn)步驟: 按高效液相色譜法(SOP-QC-306-00)檢測。4.2.1色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用C18硅膠色譜柱，流動相為甲醇-水（70：30）；流速為1ml/min，檢測波長為240nm，量取醋酸地塞米松對照溶液與內(nèi)標(biāo)溶液的混合對照液[*]20μl注入液相色譜儀，醋酸地塞米松峰與內(nèi)標(biāo)物質(zhì)峰的分離度不得少于1.5，理論板數(shù)按醋酸地塞米松峰計(jì)算，應(yīng)不低于1500。4.2.2內(nèi)標(biāo)溶液的制備: 取甲睪酮20mg，精密稱定置100ml量瓶中，加流動相溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為內(nèi)標(biāo)溶液。4.2.3醋酸地塞米松對照溶液與樣品溶液的制備及測定:醋酸地塞米松對照溶液與內(nèi)標(biāo)物溶液的混合對照溶液的制備[*]取醋酸地塞米松對照品約13mg，精密稱定，置50ml量瓶中，加甲醇35ml使溶解，用水稀釋至刻度，搖勻，精密量取此溶液與內(nèi)標(biāo)溶液各5ml置25ml量瓶中，用流動相稀釋至刻度，搖勻，作為混合對照溶液。樣品溶液與內(nèi)標(biāo)溶液的混合樣品溶液的制備用測定取樣品約13mg，精密稱定，置50ml量瓶中，加甲醇35ml溶解，用水稀釋至刻度，搖勻，精密量取此溶液與內(nèi)標(biāo)溶液各5ml，置25ml量瓶中，用流動相稀釋至刻度，搖勻，取20μl注入液相色譜儀，將醋酸地塞米松的混合對照溶液按同法測定，按下式計(jì)算本品中醋酸地塞米松（C22H31FO6）的折干含量，應(yīng)在97.0%～102.0%。為符合規(guī)定。Cd=Cw/(1－B%)Cd:本品的折干含量；Cw:本品的濕品含量；B%:本品的含水百分?jǐn)?shù)； Ws:內(nèi)標(biāo)物的稱樣量（g）；As:內(nèi)標(biāo)物溶液中甲睪酮的峰面積或峰高；A1:樣品中地醋酸地塞米松磷的峰面積或峰高；W1:樣品的稱樣量（g）;f:為校正因子;As,Ws同上式意義；A2:醋