第1課時(shí)微生物的分別和培育[學(xué)習(xí)導(dǎo)航

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1.簡述高壓蒸汽滅菌鍋的使用方法及注意事項(xiàng)。

2.掌握制備細(xì)菌培育基的方法。3.學(xué)會利用無菌操作技術(shù)接種與培育大腸桿菌。[重難點(diǎn)擊

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1.培育基的配制方法及常有種類。

2.大腸桿菌的接種與分別培育。一、微生物分別和培育的基本理論1.無菌操作技術(shù)實(shí)驗(yàn)室常利用高溫辦理達(dá)到滅菌成效，包含采納干熱滅菌或濕熱滅菌等方法。(1)干熱滅菌方法是將擬滅菌的物件放在干熱滅菌箱內(nèi)，在160～170℃溫度下加熱1～2h以達(dá)到滅菌的目的。(2)濕熱滅菌方法常采納高壓蒸汽滅菌鍋進(jìn)行，如手提式高壓蒸汽滅菌鍋就是實(shí)驗(yàn)室常用的滅菌儀器之一。高壓蒸汽滅菌鍋的使用包含加水、裝鍋、加熱排氣、保溫保壓、出鍋等步驟。2.配制培育基(1)培育基看法：為人工培育微生物而制備的適合微生物生長、生殖或累積代謝產(chǎn)物的營養(yǎng)基質(zhì)。(2)培育基種類①天然培育基：采納動植物組織或微生物細(xì)胞以及它們的提取物或粗消化物配制而成，如牛肉膏蛋白胨培育基。長處：取材便利、營養(yǎng)豐富、配制簡易；弊端：營養(yǎng)成分難以控制、實(shí)驗(yàn)結(jié)果的重復(fù)性較差。②合成培育基：由正確稱量的分析純等級其余高純度化學(xué)試劑加蒸餾水配制而成，如葡萄糖銨鹽培育基。長處：化學(xué)成分及其含量明確、實(shí)驗(yàn)的可重復(fù)性好；弊端：配制繁瑣、成本較高。(3)培育基成分：一般都含有水、碳源(供給碳元素的物質(zhì))、氮源(供給氮元素的物質(zhì))和無機(jī)鹽等最基本的物質(zhì)。(4)培育基的配制原則：在配制培育基時(shí)，依據(jù)擬培育的微生物的不一樣需要，有時(shí)還要加入維生素等特別的營養(yǎng)物質(zhì)，并要調(diào)理培育基的pH使之滿足微生物生長的需要。3.接種微生物(1)接種的看法：在無菌條件下將微生物接入培育基的操作過程。(2)常用的接種工具：玻璃涂布器、接種針、接種環(huán)等。(3)接種方法①用接種針進(jìn)行穿刺接種。②用接種環(huán)進(jìn)行斜面接種或在固體培育基平板長進(jìn)行劃線接種。③用玻璃涂布器進(jìn)行涂布平板接種等。1.“無菌操作”與人們的生活休戚相關(guān)，無時(shí)無處不在。在平常生活、生產(chǎn)實(shí)踐、自己健康防范中，有哪些“無菌操作”的例子？答案平常生活、生產(chǎn)實(shí)踐、自己健康防范中“無菌操作”的例子分別有：(1)被褥、鞋襪要常曬；肉制品儲蓄時(shí)用鹽腌等。(2)牲口閹割后，要在其傷口處涂抹一些酒精或白酒；初冬楊樹樹干涂刷生石灰水等。(3)打針時(shí)，注射部位要用酒精棉球擦洗，一般要在其傷口處涂抹一些碘酒。2.實(shí)驗(yàn)室常利用高溫辦理達(dá)到滅菌成效，包含采納干熱滅菌或濕熱滅菌等方法。以以下圖高壓蒸汽滅菌鍋的使用為例，研究無菌技術(shù)的方法。(1)高壓蒸汽滅菌的使用原理是什么？答案使用原理：將待滅菌物件放在盛有適當(dāng)水的高壓蒸汽滅菌鍋內(nèi)；把鍋內(nèi)的水加熱煮沸，并把此中原有的冷空氣完全驅(qū)盡后將鍋密閉；再連續(xù)加熱就會使鍋內(nèi)的蒸汽壓逐漸上漲，從而溫度也隨之上漲到100℃以上。(2)簡述手提式高壓蒸汽滅菌鍋的使用步驟。答案加水、裝鍋、加熱排氣、保溫保壓、出鍋等。消毒和滅菌的原理是什么？消毒和滅菌都能殺死所有的微生物嗎？能否合用于所有的生物和物件？答案①都是使微生物的蛋白質(zhì)變性，借此殺死微生物。②滅菌可殺死辦理資猜中的所有微生物(包含芽孢和孢子)，而消毒僅能殺死物體表面或內(nèi)部的部分微生物(一般不包含芽孢和孢子)。③不是，無菌技術(shù)既要考慮成效，又要考慮操作對象的承受能力。比方，活體生物資料、操作者的雙手等只好消毒，而不可以滅菌。(4)無菌技術(shù)除了用來防范實(shí)驗(yàn)室的培育物被其余外來微生物污染外，還有什么目的？答案還可以有效防范污染環(huán)境以及操作者自己被微生物感染。3.微生物的培育離不開培育基，依據(jù)下邊某微生物培育基的配方回答以下問題：成分含量NaNO33gK2HPO41gKCl0.5gMgSO4·7H2O0.5gFeSO40.01gC6H12O630gH2O1000mL青霉素0.1萬單位(1)該培育基的碳源、氮源分別是什么？答案碳源：C6H12O6；氮源：NaNO3。(2)依照物理性質(zhì)用途區(qū)分，該培育基屬于什么培育基？答案依照物理性質(zhì)區(qū)分，該培育基屬于液體培育基；依照用途區(qū)分，則屬于選擇培育基。依據(jù)培育基的原料，所培育微生物的同化作用的種類是異養(yǎng)型，培育的微生物可能是酵母菌或霉菌。(3)在固體培育基中加入的瓊脂能為微生物供給營養(yǎng)嗎？為何？答案不可以，微生物不可以分解瓊脂。(4)一般培育基能培育病毒嗎？為何？答案不可以，因?yàn)椴《局缓眠M(jìn)行活細(xì)胞寄生生活。整合提高(1)消毒與滅菌的差別項(xiàng)目條件結(jié)果常用的方法消毒較為平和的物理學(xué)僅殺死物體上絕大多數(shù)微煮沸花費(fèi)法(在或化學(xué)方法生物(包含病原微生物和有100℃下5～6min害微生物的營養(yǎng)細(xì)胞)可以殺死微生物的營養(yǎng)細(xì)胞和一部分芽孢)、巴氏消毒法、化學(xué)藥劑消毒法激烈的物理學(xué)或化殺死物體內(nèi)外所有的微生干熱滅菌、高壓蒸滅菌學(xué)方法物，包含芽孢和孢子汽滅菌、灼燒滅菌(2)培育基的成分及功能營養(yǎng)因素含義作用主要本源無機(jī)碳源：CO2、構(gòu)成生物體細(xì)胞的物質(zhì)凡能供給所需碳元NaHCO3等；碳源和一些代謝產(chǎn)物，有些素的物質(zhì)有機(jī)碳源：糖類、脂肪是異養(yǎng)生物的能源物質(zhì)酸、花生餅粉、石油等無機(jī)氮源：NH3、銨鹽、凡能供給所需氮元合成蛋白質(zhì)、核酸以及硝酸鹽等；氮源素的物質(zhì)含氮的代謝產(chǎn)物有機(jī)氮源：尿素、牛肉膏、蛋白胨等生長因子(特別生長必不可以少的微維生素、氨基酸、堿基酶和核酸的構(gòu)成成分營養(yǎng)物質(zhì))量有機(jī)物等在生物體內(nèi)含量很不但是優(yōu)異的溶劑，而培育基、大氣、代謝產(chǎn)水高，在低等生物體且可保持生物大分子結(jié)物等內(nèi)含量更高構(gòu)的穩(wěn)固無機(jī)鹽為微生物供給除細(xì)胞內(nèi)的構(gòu)成成分；生培育基、大氣等環(huán)境碳、氮元素之外的理調(diào)理物質(zhì)；某些化能各種重要元素，包自養(yǎng)菌的能源；酶的激括某些大批元素活劑1.高溫滅菌的原理是()每種微生物生長的最適溫度是必定的微生物關(guān)于高溫環(huán)境不適應(yīng)C.高溫破壞了微生物細(xì)胞內(nèi)的蛋白質(zhì)、核酸，影響其生命活動D.高溫降低了環(huán)境中氧的濃度答案C分析高溫的致死作用主若是使微生物的蛋白質(zhì)和核酸等重要生物大分子物質(zhì)發(fā)生不可以逆轉(zhuǎn)的變性。2.以下關(guān)于培育基的說法正確的選項(xiàng)是()培育基是為微生物的生長生殖供給營養(yǎng)的基質(zhì)培育基只有兩類：液體培育基和固體培育基C.除水之外的無機(jī)物只好供給無機(jī)鹽D.無機(jī)氮源不可以能供給能量答案A分析依據(jù)培育基的物理性質(zhì)，可分為液體培育基、半固體培育基和固體培育基，在液體培養(yǎng)基中加入不一樣量的凝固劑如瓊脂可形成半固體或固體培育基；除水之外的無機(jī)物如NH4HCO3，既可以是碳源，也可以是氮源，不不過供給無機(jī)鹽；無機(jī)氮源有時(shí)也能供給能量，如NH3可以為硝化細(xì)菌供給能量。方法鏈接培育基的種類分類標(biāo)準(zhǔn)培育基種類培育基特色作用微生物的分別、計(jì)物理性質(zhì)固體培育基外觀固態(tài)數(shù)等容器放倒不致流出，劇觀察微生物的運(yùn)半固體培育基烈振動則破散動、判定菌種等液體培育基呈液態(tài)常用于工業(yè)生產(chǎn)同意特定種類的微生選擇培育基物生長，同時(shí)克制或阻選擇、分別止其余微生物生長功能依據(jù)微生物的代謝特鑒別培育基點(diǎn)，在培育基中加入某判定種指示劑或化學(xué)藥品工業(yè)上大規(guī)模的微天然培育基化學(xué)成分還不清楚生物發(fā)酵生產(chǎn)成分本源在實(shí)驗(yàn)室用來對微合成培育基化學(xué)成分完整認(rèn)識生物分析二、大腸桿菌的接種與分別培育1.配制牛肉膏蛋白胨培育基配制培育基→調(diào)理pH→分裝→包扎→滅菌→擱置斜面2.斜面接種和培育大腸桿菌斜面接種大腸桿菌的主要目的有菌種轉(zhuǎn)移、擴(kuò)大培育和保存純凈菌種等。詳盡操作步驟：準(zhǔn)備接種→接種環(huán)滅菌→試管口滅菌→挑取少量菌種→劃線接種→培育大腸桿菌→保存菌種3.平板劃線分別和培育大腸桿菌在實(shí)驗(yàn)室中，平板常常被用來培育、分別細(xì)菌等微生物。(1)牛肉膏蛋白胨固體培育基的平板制作加棉塞配制好的培育基裝瓶――→滅菌→倒平板操作(A.打開瓶塞→B.灼燒瓶口滅菌→C.倒培育基→D.倒置平板)。(2)平板劃線分別與培育大腸桿菌①平板劃線法的含義：用帶有微生物的接種環(huán)在平板培育基表面經(jīng)過分區(qū)劃線而純化分別微生物的一種方法。②注意事項(xiàng)：接種和劃線操作時(shí)需要在酒精燈火焰周邊進(jìn)行。1.利用培育基培育微生物時(shí)，第一要把微生物接種到培育基上。以牛肉膏蛋白胨培育基的配制為例，達(dá)成以下相關(guān)問題：(1)以下為細(xì)菌培育基的配制的流程，若將分裝步驟與調(diào)理pH步驟顛倒過來能否可行？配制培育基→調(diào)理pH，數(shù)值為7.2→分裝→包扎→滅菌，常用方法為高壓蒸汽滅菌→擱置斜面，需冷卻至50℃左右答案不可以。若分裝后再調(diào)理pH，會使培育基中口，易被污染。

pH調(diào)理不平均；還可能將培育基弄到試管(2)從防范雜菌污染的角度思慮，平板冷凝后將平板倒置的原由是什么？答案平板冷凝后，皿蓋上會凝固水珠，凝固后的培育基表面的濕度也比較高，將平板倒置，既可以使培育基表面的水分更好地?fù)]發(fā)，又可以防范皿蓋上的水珠落入培育基造成污染。2.斜面接種和培育大腸桿菌(1)以下圖接種方法分別是什么？答案圖1是穿刺接種、圖2是斜面接種、圖3是平板劃線接種。(2)下表是關(guān)于接種操作步驟及其目的或分析說明，請完美下表。序次接種操作步驟分析說明或目的①將接種環(huán)放在火焰上灼燒，直到接種環(huán)將接種環(huán)滅菌，防范污染菌種燒紅②在火焰旁冷卻接種環(huán)，拔去試管棉塞防范雜菌污染菌種③將試管口經(jīng)過分焰灼燒滅菌，防范試管口菌體污染培育基將滅過菌的接種環(huán)伸入菌種管，先將環(huán)④使接種環(huán)冷卻，防范殺死菌種部接觸斜面頂端抽出接種環(huán)時(shí)，帶菌部分不要涉及管壁防范菌種沾于管壁，防范菌種⑤或經(jīng)過分焰被殺死在培育基斜面上由底部向上輕輕劃初步接種。劃破培育基不利于⑥后續(xù)的連續(xù)劃線，長出的菌落“S”型曲線，但不要將培育基表面劃破不標(biāo)準(zhǔn)將試管口與試管塞經(jīng)過分焰2～3次，迅⑦防范雜菌污染速塞緊試管將接過種的試管，放在恒溫箱(37℃)中培育細(xì)菌，觀察接種和培育的⑧培育24_h結(jié)果3.平板劃線分別和培育大腸桿菌在實(shí)驗(yàn)室中，平板常常被用來培育、分別細(xì)菌等微生物。思慮回答以下相關(guān)問題：(1)平板劃線法接種菌種時(shí)，哪些操作可防范雜菌污染？答案①接種前將接種環(huán)放在酒精燈火焰上灼燒。②劃完一個地域后，將接種環(huán)灼燒，冷卻后再劃下一地域。③接種環(huán)沾取菌液時(shí)，要將試管口、棉塞等經(jīng)過分焰。④劃線時(shí)將培育皿打開一條縫隙，將沾有菌種的接種環(huán)迅速伸入平板內(nèi)。(2)在灼燒接種環(huán)以后，為何要等其冷卻后再進(jìn)行劃線？答案防范接種環(huán)溫度太高，殺死菌種。(3)為何在操作的第一步以及每次劃線以前都要灼燒接種環(huán)？答案操作的第一步灼燒接種環(huán)是為了防范接種環(huán)上可能存在的微生物污染培育物。每次劃線前灼燒接種環(huán)是為了殺死前一次劃線結(jié)束后，接種環(huán)上殘留的菌種，使下一次劃線時(shí)，接種環(huán)上的菌種直接本源于前一次劃線的尾端，從而經(jīng)過劃線次數(shù)的增添，使每次劃線時(shí)菌種的數(shù)目逐漸減少，是為了保證菌落是由單一的細(xì)菌生殖而成。(4)在劃線操作結(jié)束時(shí)，仍舊需要灼燒接種環(huán)嗎？為何？答案需要。劃線結(jié)束后灼燒接種環(huán)，能及時(shí)殺死接種環(huán)上殘留的菌種，防范細(xì)菌污染環(huán)境和感染操作者。(5)在做第二次劃線以及此后的操作時(shí)，為何老是從前一次劃線的尾端開始劃線？答案劃線后尾端含有的細(xì)菌數(shù)量較少，每次從前一次的尾端開始劃線可以使細(xì)菌的數(shù)量隨劃線次數(shù)的增添而逐漸減少，最后分別成單個的細(xì)菌。(6)為何最后一次劃線不可以與第一次劃線相連？答案最后一次劃線已經(jīng)將細(xì)菌稀釋成單個的細(xì)胞，假如與第一次劃線相連則增添了細(xì)菌的數(shù)量，達(dá)不到純化的成效。3.關(guān)于制備牛肉膏蛋白胨固體培育基的表達(dá)中，不正確的選項(xiàng)是()配制固體培育基時(shí)一般要加適當(dāng)?shù)沫傊珺.分裝到試管中的液體培育基的高度約為試管高度的C.待培育基冷卻至50℃左右時(shí)進(jìn)行擱置斜面D.擱置斜面時(shí)，斜面長度不超出試管總長的1/2

1/2答案

B分析

在配制固體培育基時(shí)，瓊脂是最常用的凝固劑，

A正確；分裝到試管中的液體培育基的高度約為試管長度的

1/5，B錯誤；待培育基冷卻至

50℃左右時(shí)進(jìn)行擱置斜面，

以防培育基因溫度過高而燙手，也不可以過低，防范凝固后不易倒平板，

C正確；擱置斜面時(shí)，將試管口部枕在高約1cm的木條或其余適合高度的物體上，使其自然傾斜，斜面長度不超出試管總長的1/2，D正確。4.在接種操作的過程中，不正確的選項(xiàng)是()要將接種環(huán)灼燒滅菌取下棉塞后要將試管口灼燒滅菌C.將接種環(huán)伸入試管內(nèi)，先接觸長菌多的部位D.接種后還要將管口滅菌加塞答案C分析接種環(huán)伸入試管內(nèi)后先接觸培育基斜面頂端或其余無菌體的培育基部位，待接種環(huán)冷卻后再接觸長菌部位。5.以下圖是微生物平板劃線表示圖，劃線的序次為12345。以下操作方法正確的選項(xiàng)是()操作前要將接種環(huán)放在火焰邊灼燒滅菌劃線操作須在火焰長進(jìn)行C.在5地域中才可以獲取所需菌落D.在12345地域中劃線前后都要對接種環(huán)滅菌答案D分析在每次劃線前后都要對接種環(huán)進(jìn)行滅菌，接種環(huán)的滅菌方法應(yīng)是在火焰上灼燒，接種時(shí)劃線操作在火焰邊進(jìn)行；在5個地域中，只需有單個活細(xì)菌，經(jīng)過培育即可獲取所需菌落。一題多變(1)平板劃線法所用培育基屬于什么培育基？答案瓊脂固體培育基。(2)如何確認(rèn)制備的培育基能否合格？答案將一個未接種的培育基同接種培育基一起培育，若未接種的培育基無菌落生長，說明制備的培育基合格，不然需要重新制備。(3)假如培育基上長出的菌落互相重疊，則說明存在什么問題？答案說明劃線不充分，應(yīng)當(dāng)重新操作。(4)在第二地域內(nèi)劃線時(shí)，接種環(huán)上的菌種直接本源于哪里？答案接種環(huán)上的菌種直接本源于前一次(第一區(qū)中)劃線的尾端。1.以下圖是滅菌鍋及其局部剖面表示圖，此中甲、乙、丙挨次指()安全閥、排氣閥、壓力表排氣閥、安全閥、壓力表C.安全閥、排氣閥、溫度表D.排氣閥、安全閥、溫度表答案A分析依據(jù)教材P8圖Ⅰ－Ⅰ高壓蒸汽滅菌鍋結(jié)構(gòu)表示圖，可判斷甲、乙、丙分別為安全閥、排氣閥、壓力表。2.在培育基的配制過程中，擁有以下步驟，其正確的序次為()①熔解②調(diào)pH③加棉塞④包扎⑤分裝⑥稱量A.①②⑥⑤③④B.⑥①②⑤③④C.⑥①②⑤④③D.①②⑤④⑥③答案B分析上述步驟中，培育基的配制序次為稱量→熔解→調(diào)pH→分裝→加棉塞→包扎。3.以下相關(guān)平板劃線操作的表達(dá)，不正確的選項(xiàng)是()第一步灼燒接種環(huán)是為了防范接種環(huán)上可能存在的微生物污染培育物每次劃線前，灼燒接種環(huán)是為了殺死前一次劃線結(jié)束后，接種環(huán)上殘留的菌種C.在第二地域內(nèi)劃線時(shí)，接種環(huán)上的菌種直接本源于菌液D.劃線結(jié)束后，灼燒接種環(huán)，能及時(shí)殺死接種環(huán)上殘留的菌種，防范細(xì)菌污染環(huán)境和感染操作者答案C分析平板劃線操作中，接種環(huán)挑取菌種前灼燒的目的是防范接種環(huán)上可能存在的微生物污染培育物，此后每次劃線前灼燒接種環(huán)是為了殺死前一次劃線后殘留的菌種。劃線結(jié)束仍需灼燒接種環(huán)，是為了能及時(shí)殺死接種環(huán)上殘留的菌種，防范細(xì)菌污染環(huán)境和感染操作者。從第二次劃線開始，每次劃線時(shí)接種環(huán)上的菌種直接本源于前一次劃線的尾端。4.以下挨次表示倒平板、接種的地點(diǎn)，以及劃線法接種的路徑表示圖，此中錯誤的選項(xiàng)是()答案D分析倒平板時(shí)，用左手將培育皿打開一條稍大于瓶口的縫隙，右手將錐形瓶中的培育基倒入培育皿，左手馬上蓋上培育皿的皿蓋，防范空氣中的雜菌污染，故A正確；接種時(shí)，左手將培育皿打開一條縫隙，右手將沾有菌種的接種環(huán)迅速伸入平板內(nèi)，故B正確；劃線時(shí)要從前一次劃線的尾端開始進(jìn)行，讓菌種本源于前一次劃線尾端，故C正確，D錯誤。5.下表所示為某微生物培育基的配方，請回答以下問題：成分含量NaNO33gK2HPO41gKCl0.5gMgSO4·7H2O0.5gFeSO40.01gC6H12O630gH2O1000mL青霉素0.1萬單位(1)依照物理性質(zhì)，該培育基屬于____________________培育基。(2)該培育基中的碳源是______________________。無論何種培育基，在各成分都熔解后分裝前，要進(jìn)行的是調(diào)整pH和__________________________，倒平板時(shí)，一般需冷卻至______________左右，在__________________周邊操作。答案(1)液體(2)C6H12O6滅菌50℃酒精燈火焰分析(1)培育基中沒有加入瓊脂，是液體培育基。(2)C6H126為微生物供給碳源，培育基在分裝前要調(diào)整pH和滅菌，倒平板時(shí)，一般需冷卻至O℃左右，在酒精燈火焰周邊操作。課時(shí)作業(yè)[學(xué)考達(dá)標(biāo)]1.在微生物的實(shí)驗(yàn)室培育中，以下各項(xiàng)操作不需要在無菌條件下進(jìn)行的是()A.配制培育基

B.倒平板C.接種

D.培育答案

A分析配制培育基時(shí)不需要無菌操作，因?yàn)榕渲坪蟮呐嘤枰M(jìn)行高壓蒸汽滅菌。2.以下關(guān)于滅菌和消毒的表達(dá)中，不正確的選項(xiàng)是()滅菌是指殺滅環(huán)境中的全部微生物的細(xì)胞、芽孢和孢子消毒和滅菌實(shí)質(zhì)上是同樣的C.接種環(huán)用灼燒法滅菌D.常用的滅菌方法有加熱法、過濾法、紫外線法、化學(xué)藥品法答案B分析消毒是指用較為平和的物理學(xué)或化學(xué)方法殺滅物體上絕大多數(shù)微生物的方法，而滅菌則是指采納激烈的物理學(xué)或化學(xué)方法使物體內(nèi)外所有的微生物永久喪失生長和生殖能力的方法，兩者實(shí)質(zhì)上不一樣。3.將接種后的培育基和一個未接種的培育基都放入37℃恒溫箱的目的是()比較觀察培育基有沒有被微生物利用比較分析培育基上能否生有雜菌C.沒必需放入未接種的培育基D.為下次接種時(shí)再使用答案B分析經(jīng)過設(shè)計(jì)比較實(shí)驗(yàn)，目的是為了檢測培育基制備能否成功，即能否生有雜菌。4.以下相關(guān)倒平板操作錯誤的選項(xiàng)是()將滅過菌的培育皿放在火焰旁的桌面上使打開的錐形瓶瓶口迅速經(jīng)過分焰C.將培育皿打開，培育皿蓋倒放在桌面上D.等候平板冷卻凝固后需要倒過來擱置答案C分析倒平板時(shí)，培育皿的蓋不可以完整打開。5.在微生物的實(shí)驗(yàn)室培育過程中，獲取純凈培育物的要點(diǎn)是()將用于微生物培育的器皿、接種器具和培育基等進(jìn)行滅菌接種純種細(xì)菌C.在適合條件下培育D.防范外來雜菌的入侵答案D分析將用于微生物培育的器皿、接種器具和培育基等進(jìn)行滅菌不過無菌技術(shù)的一個方面，不代表無菌技術(shù)的所有，A錯誤；接種純種細(xì)菌是獲取純凈培育物的前提，B錯誤；接種方法和培育條件不可以防范雜菌的污染，C錯誤；防范外來雜菌的入侵是獲取純凈培育物的要點(diǎn)，正確。6.在平板劃線操作中，錯誤的選項(xiàng)是()將接種環(huán)放在火焰上灼燒，直到接種環(huán)燒紅將燒紅的接種環(huán)在火焰旁邊冷卻C.接種環(huán)在平板上的劃線地點(diǎn)是隨機(jī)的D.在挑取菌種前和接種達(dá)成后均要將試管口經(jīng)過分焰答案C分析接種環(huán)灼燒及接種前后試管口要經(jīng)過分焰，其目的是為了防范雜菌污染，將接種環(huán)先冷卻再接種可以防范高溫燙死菌種，所以A、B、D都是正確的；在平板上劃線時(shí)，要劃三至五條平行線，而不是隨機(jī)劃線，所以C項(xiàng)錯誤。[高考提能]7.防范雜菌入侵，獲取純凈的培育物，是研究和應(yīng)用微生物的前提。以下表達(dá)錯誤的選項(xiàng)是()實(shí)驗(yàn)室里可以用紫外線或化學(xué)藥物進(jìn)行消毒接種環(huán)、接種針等金屬器具，直接在酒精燈火焰的內(nèi)焰部位灼燒滅菌C.在實(shí)驗(yàn)室中，切不可以吃東西、喝水，走開實(shí)驗(yàn)室時(shí)必定要洗手，以防范被微生物感染D.使用后的培育基扔掉前必定要進(jìn)行滅菌辦理，省得污染環(huán)境答案B分析為防范雜菌污染，研究和應(yīng)用微生物時(shí)應(yīng)進(jìn)行消毒和滅菌，實(shí)驗(yàn)室可以用紫外線或化學(xué)藥物進(jìn)行消毒，A項(xiàng)正確；接種環(huán)、接種針等金屬器具，直接在酒精燈火焰的充分燃燒層即外焰部位灼燒滅菌，B項(xiàng)錯誤；在實(shí)驗(yàn)室中，切不可以吃東西、喝水，走開實(shí)驗(yàn)室時(shí)必定要洗手，以防范被微生物感染，C項(xiàng)正確；使用后的培育基扔掉前必定要進(jìn)行滅菌辦理，省得污染環(huán)境，D項(xiàng)正確。8.以下關(guān)于平板劃線操作正確的選項(xiàng)是()使用已滅菌的接種針、培育皿，在操作過程中不再滅菌打開含菌種的試管，需經(jīng)過分焰滅菌，拿出菌種后，需馬上塞上棉塞C.將沾有菌種的接種環(huán)迅速伸入平板內(nèi)，劃三至五條平行線即可D.最后將平板倒置，放在培育箱中答案D分析在平板劃線時(shí)，已滅過菌的接種針在每次劃線后，都一定用灼燒滅菌法滅菌，以防雜菌污染，A錯誤；盛有菌種的試管在打開或重新塞棉塞前，都需經(jīng)過分焰灼燒滅菌，B錯誤；接種時(shí)用帶有微生物的接種環(huán)在平板培育基表面分區(qū)劃線，不可以將沾有菌種的接種環(huán)伸入平板內(nèi)，C錯誤；平板凝固后，須將平板倒置，D正確。9.以下圖為實(shí)驗(yàn)室培育和純化大腸桿菌過程中的部分操作步驟，以下說法錯誤的選項(xiàng)是()①②③步驟操作時(shí)需要在酒精燈火焰旁進(jìn)行步驟①中，待倒入的培育基冷卻后蓋上培育皿的皿蓋C.步驟③中，每次劃線前后都需對接種環(huán)進(jìn)行灼燒辦理D.劃線接種結(jié)束后，將圖④平板倒置后放入培育箱中培育答案B分析培育與純化大腸桿菌的過程中需要在酒精燈的火焰旁進(jìn)行，故A正確；步驟①中倒入培育基后馬上蓋上培育皿的皿蓋，故B錯誤；步驟③接種時(shí)，每次劃線前后都要對接種環(huán)進(jìn)行灼燒辦理，故C正確；劃線接種結(jié)束后，將平板倒置后放入培育箱培育，防范冷凝水污染培育基，故D正確。10.接種是微生物培育和微生物選擇的必需步驟之一。以下關(guān)于接種的表達(dá)中，不正確的選項(xiàng)是()接種平常在酒精燈火焰周邊進(jìn)行接種以前要對接種環(huán)進(jìn)行灼燒滅菌C.接種指無菌條件下將微生物接入培育基的操作D.接種時(shí)接種環(huán)要將培育基的表面劃破答案D分析為了保證無菌操作，整個接種過程都需要在酒精燈火焰旁進(jìn)行，故接種時(shí)接種環(huán)不可以劃破培育基的表面，故D錯誤。11.下表是某種微生物培育基的配方表，請據(jù)表回答下邊的問題：

A、B、C均正確；牛肉膏

蛋白胨

NaCl

瓊脂

蒸餾水0.5g

1g

0.5g

1g

200mL(1)此培育基的營養(yǎng)成分有五類，此中蛋白胨供給的營養(yǎng)物質(zhì)是

____________________。(2)在培育基制備過程中，各種成分熔解后分裝前，一定的操作是

____________。(3)在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)研究上，常需要進(jìn)行微生物的培育和計(jì)數(shù)。如圖是利用

____________法進(jìn)行微生物接種，把齊集的菌種逐漸

____________分別到培育基的表面。為達(dá)到這一目的，操作上應(yīng)注意：________________________________________________(最少答兩項(xiàng))。答案(1)碳源、氮源、維生素(2)調(diào)理pH(3)平板劃線稀釋①每次劃線前要灼燒接種環(huán)；②冷卻后從上一區(qū)劃線尾端開始劃；③首尾區(qū)不重疊(任選兩項(xiàng))分析微生物培育基含有碳源、氮源、水和無機(jī)鹽等營養(yǎng)物質(zhì)，培育基制備過程中各種成分熔解后分裝前，一定調(diào)理pH。12.以下圖顯示微生物的接種實(shí)驗(yàn)中的一些步驟，回答以下問題：(1)圖中接種工具的名稱是____________。(2)解說步驟①和②的操作：步驟①中，為何要將接種工具灼燒至變紅？____________________________________。步驟②中，為何要將接種工具冷卻？__________________________________________。(3)圖示接種方法的目的是___________________________________________________。答案(1)接種環(huán)(2)殺滅接種環(huán)上可能惹起污染的微生物防范燙死接種物(3)使接種物逐漸稀釋，經(jīng)培育后獲取單個菌落分析(1)圖中所用的接種工具是接種環(huán)。(2)步驟①中，將接種工具灼燒至變紅的目的是殺滅接種環(huán)上可能惹起污染的微生物；步驟②中，將接種工具冷卻的目的是防范燙死接種物。(3)圖示接種方法是平板劃線法，目的是使接種物逐漸稀釋，經(jīng)培育后獲取單個菌落。13.請回答以下關(guān)于大腸桿菌培育的問題：(1)在大腸桿菌培育過程中，除考慮營養(yǎng)條件外，還要考慮

________、____________和浸透壓等條件。因?yàn)樵摷?xì)菌擁有體積小、結(jié)構(gòu)簡單、變異種類簡單選擇、

___________________、__________________等長處，所以常作為遺傳學(xué)研究的實(shí)驗(yàn)資料。(2)在微生物培育操作過程中，為防范雜菌污染，需對培育基和培育器皿進(jìn)行

________(消毒、滅菌)；操作者的雙手需要進(jìn)行沖刷和

________(消毒、滅菌

)；靜止空氣中的細(xì)菌可用紫外線殺滅，其原由是紫外線能使蛋白質(zhì)變性，還可以_________________________。(3)培育大腸桿菌時(shí)，在接種前需要檢測培育基能否被污染。關(guān)于固體培育基應(yīng)采納的檢測方法是________________________________________________________________________。(4)若用大腸桿菌進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，使用過的培育基及其培育物一定經(jīng)過

________辦理后才能扔掉，以防范培育物的擴(kuò)散。答案

(1)溫度

酸堿度

易培育

生活周期短(2)滅菌消毒損害DNA的結(jié)構(gòu)(3)將未接種的培育基在適合的溫度下擱置適合的時(shí)間，觀察培育基上能否有菌落產(chǎn)生(4)滅菌[真題體驗(yàn)]14.(2015江·蘇，19)做“微生物的分別與培育”實(shí)驗(yàn)時(shí)，以下表達(dá)正確的選項(xiàng)是()高壓滅