PAGEPAGE6/6臨床微生物標本的采集與送檢主要內容：標本采集、運送意義與原則血液標本采集尿標本采集痰標本采集咽拭子標本采集標本拒收的標準與處理方法一、〔一〕標本采集、運送標準化的意義正確的標本采集、運送、保存和處理對于提高培養(yǎng)結果的陽性率以及保證細菌室的工作質量至關重要正確的標本采集和運送是準確的病原學診斷的前提不標準的標本采集、保存和運送是導致細菌培養(yǎng)陽性率低、臨床符合率差的重要原因。標準的標本采集和運送是細菌培養(yǎng)成功的關鍵！〔二〕、微生物檢查的標本采集、運送原則1.及時采集微生物標本作病原學檢查。2.盡量在抗菌藥物使用前或停藥一周后采集標本，如不能停用抗菌藥物，應于下次抗菌藥物應用前采集。應在感染的急性期或傷口局部治療前采集標本。3.選擇正確的部位，并以適當的技術、方法與容器收集足量的標本。4.，將污染情形降至最低。5.收集真正感染病灶處的標本，且防止鄰近區(qū)域微生物的污染。6.采用無菌器材收集標本，并裝于堅固且密合性佳的無菌容器中。容器須滅菌處理，防止?jié)B漏，但不得使用消毒劑。標本中不可添加防腐劑。7.2h如不能及時送檢，應將標本置于適當的儲存環(huán)境待送，但存放一般不能超過24h。8.淋球菌培養(yǎng)等標本應使用專用的纖維拭子，不得使用一般棉拭子。9.混有正常菌群的標本如痰、尿液等，不可置肉湯培養(yǎng)基內送檢。10.〕同一天同一檢測目的的標本〔血液標本除外〕一般只需檢測一次〔份〔三〕、如何提高細菌陽性檢出率？1、標本采集時機；2、標本采集方法；3、標本的質與量；4、標本的運送與保存；5、篩選合格標本〔退檢制度〕；6、高質量、多種別離培養(yǎng)基；7、培養(yǎng)環(huán)境；8、合理的收費制度〔四〕、臨床常見標本血液〔生化、免疫及微生物檢驗〕尿液糞便痰及上呼吸道標本穿刺液標本〔腦脊液、膽汁、胸腹水等〕膿液及創(chuàng)傷感染分泌物標本生殖道標本組織標本?〔五〕、血標本檢驗的意義????血液是臨床最常見的檢驗項目還可判斷病人病情進展程度???為治療疾病提供參考。二、血標本采集方法1、靜脈血標本〔最常用〕2、動脈血標本(血氣分析)3、毛細血管標本〔血常規(guī)〕〔〕靜脈血標本分類及目的①全血標本靜脈血采集操作步驟及要點攜用物至床邊，核對床號戴手套，選擇靜脈，常規(guī)系止血帶、消毒皮膚，囑患者握拳行靜脈穿刺、取血、松止血帶、囑患者松拳、按壓針眼、迅速拔針2～3min②血液注入標本瓶內方法：取下針頭干燥試管〔最常用〕注意事項〔1〕嚴禁在輸液、輸血的針頭處抽取標本，以免影響檢驗結果注意事項〔2〕假設同時抽取幾個項目的血標本，一般注入容器的順序為：血培養(yǎng)瓶→抗凝瓶→干燥試管. 動作要迅準確，防止溶血?！?〕、血標本的微生物學檢查概述：度很低，因此要求臨床多次采集血液標本進行培養(yǎng)，但24h3次。:發(fā)熱(≥38℃)或低溫(≤36℃),寒戰(zhàn),白細胞增多,,,C血小板減少等或同時具備上述幾種體征時而臨床可疑菌血癥應采集血液培養(yǎng)培養(yǎng)。11時抽血。30-602-3份血培養(yǎng)。采血次數①.留置深靜脈導管且疑心導管相關血流感染：至少同時采集211個還是多個血培1套〕②.未留置深靜脈導管的血流感染〔非導管相關疑心血流感染時，獨立的外周靜脈無菌采集2套血培養(yǎng)當疑心骨髓炎、腦膜炎、肺炎和腎盂腎炎合并菌血癥時，在抗菌藥物使用前從不同部位抽取2套血培養(yǎng)1-2周內抽血化膿性腦膜炎、鼠疫或野兔熱患者應在發(fā)熱1-2d內抽血243次或更多次，并可在不同部位，如左、右手臂或頸部243次，如培養(yǎng)陰性應繼續(xù)采樣送檢1-23個不同部位抽血，分別進行培養(yǎng)。亞急性心內膜炎及布魯菌感染的患者，除在24h3-44.抽血套數與血培養(yǎng)陽性率關系：抽血部位及抽血量8-10ml1：5~1：10。Why?,;100CFU/ml，是成人10-1001CFU=1百萬個細菌。血培養(yǎng)的采集程序皮膚消毒程序〔推薦三步法〕:①7030s膚〔1％-230s或1060s70％酒精涂去碘液，待酒精干燥后采血。培養(yǎng)瓶消毒程序：打開塑料瓶蓋用70%酒精消毒血培養(yǎng)瓶橡皮塞，作用60s靜脈穿刺和培養(yǎng)瓶接種程序：可戴乳膠手套固定靜脈〔不可接觸穿刺點血培養(yǎng)瓶中〔不推薦換針頭骨髓標本的微生物學檢查采集部位：骨髓穿刺法從髂骨采集標本。采集時間：在用藥前、發(fā)熱初期或高熱期當骨髓炎時或長期使用抗菌藥物患者，抽取骨髓培養(yǎng)陽性率遠高于血液培養(yǎng)培養(yǎng)基的選擇：黃色4ml，用于未使用抗菌素患者的需氧培養(yǎng)。主要用于小兒。綠色10ml，用于使用抗菌藥物后患者的需氧或無菌體液培養(yǎng)。紫色?建議???不管患者是否使用過抗生素，是做細菌培養(yǎng)還是真菌培成人 綠色瓶 采血量10ml??小兒 黃色瓶 采血量4ml注意事項在室溫，切勿放冰箱存放。③每次領培養(yǎng)瓶不宜過多，以防過期，未使用的培養(yǎng)瓶亦應室溫保存〔15-30℃〕，切勿放冰箱保存。④標簽不能貼于機器碼識別區(qū)，以免儀器無法識別三、尿液標本的采集留取尿液標本作物理、化學、細菌和顯微鏡等檢查以助診斷和觀察療效。〔一〕、尿液標本采集時間：一般原則通常應采集晨起第一次尿液送檢。原則上應選擇在抗菌藥物應用之前采集尿液。結核分枝桿菌感染 留取晨尿或24小時尿的沉渣部分10-15ml作涂片檢查，假設為培養(yǎng)，患者應停藥1-2天后再采樣，以提高陽性率沙門菌、鉤端螺旋體感染 感染后2周左右采集〔二〕、采集方法集尿法結核分枝桿菌檢查時，可用一清潔容器，留2410-15ml送檢導尿法、腎盂尿采集法、膀胱穿刺采集法10ml左右于無菌試管內送檢男性：先用肥皂水清洗尿道口，后用清水沖洗，留取中段尿兒童、嬰兒：先以無菌生理鹽水清洗外陰部或外生殖器，將無菌試管對準尿道口，待尿排出后送檢注意事項嚴格進行無菌操作，因為尿液標本的采集和培養(yǎng)中最大的問題是污染雜菌通常應取晨起第一次尿液送檢多數藥物均通過尿液排泄，因此采集尿液應在用藥前進行能用于培養(yǎng)。四、糞便標本的采集收集糞便標本，做實驗室檢查，有助于評估病人排泄功能及準確評估疾病。（一）采集時間：1．采樣原則 腹瀉病人應在急性期采集3天以內，以提高檢出率，亦最好在用藥之前。22周以后；胃腸炎病人在急性期，早期采集新鮮糞便〔二〕采集方法自然排便采集法 自然排便后，挑取其膿血、粘液部分2-3g，液狀糞便取絮狀物2-3ml，盛于滅菌容器內或保存液中送檢直腸拭子方法 如不易獲得糞便時，或排泄困難的患者及嬰兒，可用直腸拭子采取，即以無菌棉拭子用生理鹽水濕潤后，插入肛門內4-5cm〔幼兒2-3cm〕輕輕轉動取出，插入無菌試管內送檢。注意事項雖糞便含有多種雜菌，但應盡量采用無菌容器。為提高檢出率，要采集新鮮糞便作培養(yǎng)，且應挑取其膿血、粘液部分。五、痰及上呼吸道標本的采集采取分泌物作細菌培養(yǎng)或病毒別離（一）采集時間:痰：一般以晨痰為好；支氣管擴張癥患者，清晨起床后進行體位引流，可采集大量痰標本。集為宜〔二〕采集方法：自然咳痰法：患者清晨起床后，先用朵貝爾氏液〔復方硼砂溶液〕漱口，再以開水或生理鹽水漱口，以減少口腔常居菌群的污染，然后用力自氣管深部咳出第一口痰于無菌痰懷內送檢采集方法：拭子上，送檢上呼吸道標本〔咽拭子防止接觸口腔和舌粘膜注意事項：1.12～324h內多次采集。2.采集標本以清晨為佳，以減少口腔正常菌群的污染，采集前先用漱口液充分漱口。3.做結核分枝桿菌和真菌培養(yǎng)的標本假設不能及時送檢，應放4℃冰箱保存，以免雜菌生長。4.作結核分枝桿菌檢查，痰量要多或留取24小時痰液，以提高陽性檢出率。六、穿刺液標本〔一〕腦脊液采集時間：疑心為腦膜炎的病人，應立即采集腦脊液，最好在用藥前采集采集方法：用腰穿方法采集腦脊液3-5ml，一般放入3個無菌試管，每個試管1-2ml.如果用于檢測細菌或病毒，應≥1ml，如果用于檢測真菌或抗酸桿菌，應≥2ml注意事項：①如果用于檢測細菌，收集腦脊液后，最好能在常溫下15-30否則會使病原菌死亡，尤其是腦膜炎奈瑟菌〔能產生自溶素迅速自溶注意事項：②如果只采集了一管腦脊液，應先送細菌室做細菌培養(yǎng)，再做腦脊液生化、常規(guī)等檢查③腰穿時應嚴格無菌操作④不需要加入防腐劑⑤作腦脊液培養(yǎng)時，建議同時作血培養(yǎng)〔二〕其他穿刺液〔胸腹水、心包液、關節(jié)液、鞘膜液等〕采集時間：當疑心感染存在，應盡早采集標本，一般在患者使用抗菌藥物之前或停止用藥后1-2日采集采集方法：采用無菌方法用注射器抽取體內可疑感染部位的液體，注入無菌試管立即送檢注意事項：①一般要求常溫下15-30下保存外，做其他項目的應常溫保存。②嚴格無菌穿刺。③為了防止穿刺液的凝固，最好在無菌試管中預先加入滅菌肝素，再注入穿刺液④盡可能采集更多的液體，至少1ml〔三〕膿液及創(chuàng)傷感染分泌物標本采集方法：①開放性膿腫和膿性分泌物 先以無菌鹽水沖洗潰瘍外表用2支無菌棉拭子拭取潰瘍深處的分泌物后插入無試管送檢。一支為涂片檢查用，另一支作培養(yǎng)用②大面積燒傷的創(chuàng)面分泌物 用無菌棉拭子取多部位創(chuàng)面的膿液或分泌物，置無菌試管內送檢③封閉性膿腫 消毒局部皮膚或粘膜外表后，用注射器抽取，將膿液注入無菌試管內送檢1212否則不能獲得陽性結果4℃保存；培養(yǎng)淋球菌、腦膜炎奈瑟菌的標本除外用藥前采集標本，嚴格無菌采樣細菌培養(yǎng)標本采集注意事項：采集標本最好能在用藥前采樣，以提高陽性率采集標本時必須注意無菌操作，使用密閉的無菌容器，防止污染雜菌采集的標本中不得加防腐劑或消毒劑采集標本后應盡快送檢，否則病原菌會死亡而影響細菌檢查的正確性標本的儲存使得病原菌別離不出來，下表簡介各類標本儲存的環(huán)境：細菌室對微生物標本拒收的標準與處理方法七、總的拒收標準申請錯誤：如糞便、咳出痰液、尿液、下生殖道標本要求做厭氧培養(yǎng)，陰道分泌物要求做淋球菌涂片請單上注明標本來源和送檢目的等送檢錯誤：送檢延誤；運送培養(yǎng)基錯誤；運送溫度錯誤。容器錯誤：