中華人民共和國國家標準

犌犅５４１３．１９—２０１０

食品安全國家標準

嬰幼兒食品和乳品中游離生物素的測定

犖犪狋犻狅狀犪犾犳狅狅犱狊犪犳犲狋狔狊狋犪狀犱犪狉犱

犇犲狋犲狉犿犻狀犪狋犻狅狀狅犳犳狉犲犲犫犻狅狋犻狀犻狀

犳狅狅犱狊犳狅狉犻狀犳犪狀狋狊犪狀犱狔狅狌狀犵犮犺犻犾犱狉犲狀，犿犻犾犽犪狀犱犿犻犾犽狆狉狅犱狌犮狋狊

２０１００３２６發(fā)布２０１００６０１實施

中華人民共和國衛(wèi)生部發(fā)布

書

犌犅５４１３．１９—２０１０

前言

本標準代替ＧＢ／Ｔ５４１３．１９—１９９７《嬰幼兒配方食品和乳粉游離生物素的測定》。

本標準的附錄Ａ為規(guī)范性附錄。

本標準所代替標準的歷次版本發(fā)布情況為：

———ＧＢ５４１３—１９８５、ＧＢ／Ｔ５４１３．１９—１９９７。

Ⅰ

書

犌犅５４１３．１９—２０１０

食品安全國家標準

嬰幼兒食品和乳品中游離生物素的測定

１范圍

本標準規(guī)定了嬰幼兒食品和乳品中游離生物素的測定方法。

本標準適用于嬰幼兒食品和乳品中游離生物素的測定。

２規(guī)范性引用文件

本標準中引用的文件對于本標準的應用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅所注日期的版

本適用于本標準。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本標準。

３原理

利用植物乳桿菌（犔犪犮狋狅犫犪犮犻犾犾狌狊狆犾犪狀狋犪狉狌犿）對游離生物素的特異性和靈敏性，定量測定出試樣中

待測物質(zhì)的含量。在含有除待測物質(zhì)以外所有營養(yǎng)成分的培養(yǎng)基中，微生物的生長與待測物質(zhì)含量呈

線性關系，根據(jù)透光率與標準工作曲線進行比較，即可計算出試樣中待測物質(zhì)的含量。

４試劑和材料

除非另有規(guī)定，本方法所用試劑均為分析純，水為ＧＢ／Ｔ６６８２規(guī)定的二級水。

４．１菌株：植物乳桿菌（犔犪犮狋狅犫犪犮犻犾犾狌狊狆犾犪狀狋犪狉狌犿），ＡＴＣＣ８０１４。

４．２生物素（ｄＢｉｏｔｉｎ或ＶｉｔａｍｉｎＨ）標準品（Ｃ１０Ｈ１６Ｎ２Ｏ３Ｓ）：純度≥９９％。

４．３培養(yǎng)基。

４．３．１乳酸桿菌瓊脂培養(yǎng)基：見附錄Ａ。

４．３．２乳酸桿菌肉湯培養(yǎng)基：見附錄Ａ。

４．３．３生物素測定用培養(yǎng)基：見附錄Ａ。

注：一些商品化合成培養(yǎng)基效果良好，商品化合成培養(yǎng)基按標簽說明進行配制。

４．４乙醇溶液（５０％）。

４．５硫酸溶液（３％）：量取３ｍＬ硫酸加入到水中，定容至１００ｍＬ。

４．６氫氧化鈉溶液（０．５ｍｏｌ／Ｌ）：稱?。玻埃鐨溲趸c溶于１０００ｍＬ水中。

４．７氯化鈉溶液（９ｇ／Ｌ）：稱?。梗埃缏然c溶解于１０００ｍＬ水中，分裝試管，每管１０ｍＬ。１２１℃滅

菌１５ｍｉｎ。

４．８標準溶液的制備。

４．８．１生物素標準貯備液（１００μｇ／ｍＬ）：稱取生物素標準品（４．２）用乙醇溶液（４．４）定容至生物素濃度

為１００μｇ／ｍＬ，貯于冰箱中。

４．８．２生物素標準中間液（１μｇ／ｍＬ）：吸?。保恚躺锼貥藴寿A備液（４．８．１），用乙醇溶液（４．４）定容至

１００ｍＬ。

４．８．３生物素標準工作液（１０ｎｇ／ｍＬ）：吸取１ｍＬ生物素標準中間液（４．８．２），用乙醇溶液（４．４）定容

至１００ｍＬ。

４．８．４標準曲線工作液：分兩個濃度，高濃度溶液的濃度為０．２ｎｇ／ｍＬ；低