ICS.65.120B46中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB/T14702—2002代替GB/T14702-1993飼料中維生素B。的測(cè)定高效液相色譜法DeterminationofvitaminBeinfeedsHigh-performanceofliquidchromatography2002-10-31發(fā)布2003-04-01實(shí)施中華人民共和發(fā)布國(guó)家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局

GB/T14702-2002前本標(biāo)準(zhǔn)修訂了GB/T14702—1993《飼料中維生素B。的測(cè)定方法》較修訂前具有高效、快捷、準(zhǔn)礁的特點(diǎn)。本標(biāo)準(zhǔn)參考“化學(xué)分析協(xié)會(huì)”第六十七期發(fā)表的《復(fù)合預(yù)混料中抗壞血酸煙酰胺、吡哆醇、硫膠素及核黃素的液相色譜分析方法》而制定本標(biāo)準(zhǔn)與GB/T14702—1993的主要技術(shù)差異：標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了高效液相色譜法測(cè)定飼料中的維生素B。確定了試樣的提取條件、色譜條件、重復(fù)性要求;確定了適用范圍為維生素B。含量大于30mg/kg的復(fù)合預(yù)混合飼料及維生素預(yù)混合飼料本標(biāo)準(zhǔn)由全國(guó)飼料工業(yè)標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)提出并歸口本標(biāo)準(zhǔn)起草單位：國(guó)家飼料質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)中心(北京)。本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：李蘭、陳必芳、索德成、楊文軍。本標(biāo)準(zhǔn)所代替標(biāo)準(zhǔn)的歷次版本發(fā)布情況為：GB/T14702—1993.

GB/T14702-2002飼料中維生素B。的測(cè)定高效液相色譜法范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了用高效液相色譜儀測(cè)定飼料中維生素B，含量的方法本標(biāo)準(zhǔn)適用于維生素B。含量大于30mg/kg的復(fù)合預(yù)混合飼料、維生素預(yù)混合飼料的測(cè)定。規(guī)范性引用文件下列文件中的條款通過(guò)本標(biāo)準(zhǔn)的引用而成為本標(biāo)準(zhǔn)的條款。凡是注日期的引用文件.其隨后所有的修改單(不包括勒誤的內(nèi)容)或修訂版均不適用于本標(biāo)準(zhǔn).然而·鼓勵(lì)根據(jù)本標(biāo)準(zhǔn)達(dá)成協(xié)議的各方研究是否可使用這些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本適用于本標(biāo)準(zhǔn)GB/T6682分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法GB/T14699.1飼料采樣方法3原理試樣中維生素B。經(jīng)酸性提取液超聲提取后,注人高效液相色譜儀反相色譜系統(tǒng)中進(jìn)行分離，用紫外檢測(cè)器(或二極管矩陣檢測(cè)器)檢測(cè),外標(biāo)法計(jì)算維生素B。的含量。試劑和溶液除特殊說(shuō)明外.所用試劑均為分析純.水為蒸留水,色譜用水為去離子水.符合GB/T6682.1中級(jí)用水規(guī)定。4.1乙二胺四乙酸二鈉(EDTA)4.22庚烷磺酸鈉(PICB,）優(yōu)級(jí)純4.3冰乙酸，優(yōu)級(jí)純4.44三乙胺，色譜純。4.55甲醇·色譜純。4.6鹽酸溶液;c(HCI)=0.1mol/L4.7提取液：在已裝入約700mL/L去離子水的1000ml容量瓶中·加入50mgEDTA(4.1)待全部溶解后，加入25mL冰乙酸(4.3)、5mL三乙胺(4.4),用去離子水定容至刻度搖勺。取860mL上述溶液與140mL甲醇混合·即得。4.8流動(dòng)相：在已裝入約700mL去離子水的1000mL容量瓶中，稱(chēng)人50mg(精確至0.001g)EDTA(4.1)、1.1g(精確至0.001g)庚烷磺酸鈉(4.2）,待全部溶解后加入25mL冰乙酸(4.3)、5mL三乙胺(4.4).用去離子水定容至刻度搖勾。用冰乙酸、三乙胺調(diào)節(jié)該溶液pH至3.40±0.02,過(guò)0.45m濾膜：取該溶液860ml與140mL甲醇(4.5)混合，超聲脫氣，待用。4.9維生素B，標(biāo)準(zhǔn)溶液：“）維生素B.標(biāo)準(zhǔn)財(cái)備液：準(zhǔn)確稱(chēng)取維生素B.0.0500g于100mL棕色容量瓶中，加鹽酸溶液