第二十一章超敏反應(yīng)性疾病及其免疫檢測(cè)P2571.超敏反應(yīng)(hypersensitivity)——又稱為變態(tài)反應(yīng)(allergy)，是指機(jī)體受到某些抗原刺激時(shí)，出現(xiàn)以生理功能紊亂或組織細(xì)胞損傷為主的異常適應(yīng)性免疫應(yīng)答。①起因：必須是再次接觸同一種抗原——變應(yīng)原。②后果：造成組織細(xì)胞損傷和/或生理功能紊亂。

③本質(zhì)：仍屬(適應(yīng)性)特異性免疫應(yīng)答反應(yīng)。超敏反應(yīng)的分類

Ⅰ型——過(guò)敏反應(yīng)、速發(fā)型(IgE)

Ⅱ型——細(xì)胞毒型或細(xì)胞溶解型

(IgG，IgM)

Ⅲ型——免疫復(fù)合物型或血管炎型(IgG)

Ⅳ型——遲發(fā)型(Th1，CTL)Ⅰ型超敏反應(yīng)1．Ⅰ型超敏反應(yīng)(速發(fā)型)試驗(yàn)原理

脫顆粒

IgEFceRI變應(yīng)原炎癥反應(yīng)

Ⅰ、Ⅳ型超敏反應(yīng)性疾病常通過(guò)

皮膚試驗(yàn)來(lái)尋找過(guò)敏原。

避免再次接觸過(guò)敏原是防治兩類疾病再次發(fā)生的重要手段。

皮膚試驗(yàn)當(dāng)變應(yīng)原再次進(jìn)入致敏者皮膚，與吸附在肥大細(xì)胞或/和嗜堿性粒細(xì)胞上的特異IgE高變區(qū)結(jié)合，導(dǎo)致肥大細(xì)胞或嗜堿性粒細(xì)胞脫顆粒，釋放生物活性介質(zhì)：如組胺、白三烯、激肽等。在20－30分鐘內(nèi)局部皮膚出現(xiàn)紅暈、紅斑、風(fēng)團(tuán)以及搔癢感，數(shù)小時(shí)后消失。出現(xiàn)此現(xiàn)象者判斷為皮試陽(yáng)性，即對(duì)該變應(yīng)原過(guò)敏；未出現(xiàn)紅暈、紅斑、風(fēng)團(tuán)者為陰性，即對(duì)該變應(yīng)原不過(guò)敏。皮內(nèi)試驗(yàn)方法

Ⅰ型超敏反應(yīng)皮內(nèi)試驗(yàn)

（1）前臂內(nèi)側(cè)皮膚注入,注射量一般為0.01-0.02mL，使皮膚形成直徑約2－3mm的皮丘。（2）同時(shí)進(jìn)行數(shù)種變應(yīng)原皮試時(shí)，兩種皮試變應(yīng)原的間距應(yīng)為2.5-5cm。（3）注射后于15－25分鐘觀察有無(wú)風(fēng)團(tuán)和紅暈反應(yīng)。（4）Ⅰ型超敏反應(yīng)皮試時(shí)可引起全身反應(yīng)，故注射后應(yīng)嚴(yán)密觀察，一旦發(fā)生嚴(yán)重反應(yīng)，應(yīng)及時(shí)搶救。

Ⅰ型超敏反應(yīng)皮內(nèi)試驗(yàn)風(fēng)團(tuán)和紅暈大小的分級(jí)法級(jí)別紅暈（cm）風(fēng)團(tuán)（cm）

<0.5無(wú)反應(yīng)或小于對(duì)照

+1.1~2.00.3~0.5++2.1~3.00.6~0.9+++3.1~4.01.0~1.5,或有偽足++++>4.0>1.5，或有多個(gè)偽足變應(yīng)原皮膚試驗(yàn)挑刺試驗(yàn)（pricktest)主要用于檢測(cè)Ⅰ型超敏反應(yīng)方法：試驗(yàn)時(shí)將抗原及對(duì)照液滴于受檢者前臂內(nèi)側(cè)皮膚，然后在該處用針尖透過(guò)抗原液滴與皮膚呈45度進(jìn)針點(diǎn)刺，1min后擦去抗原液，15min后觀察結(jié)果。以出現(xiàn)紅暈風(fēng)團(tuán)為陽(yáng)性。較皮內(nèi)試驗(yàn)安全、敏感性低，假陽(yáng)性少。Ⅰ型超敏反應(yīng)皮膚試驗(yàn)臨床意義

1．尋找變應(yīng)原2．預(yù)防藥物或疫苗過(guò)敏血清IgE檢測(cè)

IgE是介導(dǎo)Ⅰ型超敏反應(yīng)的抗體，檢測(cè)血清總IgE和特異性IgE對(duì)診斷Ⅰ型超敏反應(yīng)性疾病及確定其變應(yīng)原均很有價(jià)值。*IgE——親細(xì)胞性抗體可通過(guò)其Fc段與肥大細(xì)胞和嗜堿性粒細(xì)胞表面上的IgE

Fc受體結(jié)合而使機(jī)體處于致敏狀態(tài)。血清總IgE檢測(cè)血清總IgE水平是針對(duì)各種抗原誘導(dǎo)產(chǎn)生的IgE的總和。正常情況下血清IgE含量很低，僅在20-200U/ml水平。臨床上一般選用敏感性較高的化學(xué)發(fā)光法及酶聯(lián)免疫吸附法、免疫比濁法、放射免疫等進(jìn)行檢測(cè)。1．放射免疫吸附試驗(yàn)

此試驗(yàn)是將抗IgE抗體吸附到固相載體上，用以檢測(cè)血清IgE(抗原)，故又稱固相放射免疫測(cè)定。

臨床上常用雙抗體夾心法，載體多用濾紙，將已知抗IgE抗體偶聯(lián)到經(jīng)溴化氰活化的濾紙上,使其與待測(cè)血清中IgE進(jìn)行反應(yīng)，洗滌后加入125I標(biāo)記的抗人IgE，再經(jīng)洗滌后測(cè)定濾紙片的放射活性。其測(cè)定值與標(biāo)本中的IgE含量呈正相關(guān)。2．酶聯(lián)免疫測(cè)定法測(cè)定血清IgE也可用雙抗體夾心ELISA法該法方便、實(shí)用，敏感性、特異性好無(wú)同位素污染，也不需要特殊儀器臨床上應(yīng)用較廣洗滌三次終止液血清總IgE檢測(cè)臨床意義

正常人血清IgE水平為20－200Iu／ml(1Iu=2.4ng)Ⅰ型超敏反應(yīng)性疾病、寄生蟲(chóng)感染、急慢性肝炎等可使IgE升高血清IgE的量受多種因素的影響，如年齡、種族、地域、環(huán)境、遺傳及檢測(cè)方法等。分析血清IgE結(jié)果必須考慮當(dāng)?shù)厝巳旱腎gE水平特異性IgE測(cè)定

特異性IgE是指能與某種過(guò)敏原特異結(jié)合的IgE（sIgE)。檢測(cè)時(shí)是將純化的特異變應(yīng)原包被,采用間接法檢測(cè)血清中IgE(Ab)。常用檢測(cè)方法:放射免疫技術(shù)酶聯(lián)免疫技術(shù)

1．放射變應(yīng)原吸附試驗(yàn)（radioallergosorbenttest,RAST）

將純化的變應(yīng)原吸附于固相載體上，加入待測(cè)血清(一抗）及參考標(biāo)準(zhǔn)品，再與同位素標(biāo)記的抗人IgE抗體(二抗)反應(yīng)，最后測(cè)定固相的放射活性。利用參考標(biāo)準(zhǔn)品做出標(biāo)準(zhǔn)曲線，求出待測(cè)血清中與變應(yīng)原相結(jié)合的特異IgE含量。

2．酶聯(lián)免疫測(cè)定法

試驗(yàn)原理及步驟基本與RAST

只是將同位素標(biāo)記抗人IgE改為加酶標(biāo)記的抗人IgE，再加入底物，利用酶催化底物生成有色產(chǎn)物顯色來(lái)判斷結(jié)果

特異性IgE檢測(cè)臨床意義

特異性IgE的增高對(duì)診斷Ⅰ型超敏反應(yīng)疾病更具有重要價(jià)值采用間接法檢測(cè)特異性IgE時(shí)特異性高、敏感性強(qiáng)、影響因素少，同時(shí)也可確定變應(yīng)原Ⅳ型超敏反應(yīng)1．Ⅳ型超敏反應(yīng)(遲發(fā)型)試驗(yàn)原理

皮膚試驗(yàn)用皮內(nèi)注射、皮膚斑貼等方法使變應(yīng)原進(jìn)入已致敏機(jī)體，體內(nèi)致敏的CD4+Th1再次遇到相應(yīng)抗原后，釋放出大量細(xì)胞因子，如IL-2、IFN-γ、TNF、IL-3、GM-CSF,（1）活化巨噬細(xì)胞及NK，增強(qiáng)吞噬細(xì)胞作用；（2）吸引WBC到達(dá)Ag所在部位，促進(jìn)吞噬；（3）促進(jìn)T細(xì)胞增生和分泌細(xì)胞因子，加重局部炎癥反應(yīng)，最后造成局部以單核細(xì)胞和淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)為主的炎癥反應(yīng)。

48-72小時(shí)后局部出現(xiàn)紅腫、硬結(jié)或水泡，以此來(lái)判斷變應(yīng)原是否引起機(jī)體Ⅳ型超敏反應(yīng)或了解機(jī)體的細(xì)胞免疫功能。

Ⅳ型超敏反應(yīng)皮膚試驗(yàn)結(jié)核菌素皮試指用1:2000濃度的舊結(jié)核菌素（OT）或PPD0.1ml作Ag，于前臂內(nèi)側(cè)皮內(nèi)注射，48-72h后注射局部出現(xiàn)紅腫、硬結(jié)等局部炎癥反應(yīng)。該實(shí)驗(yàn)為典型的感染性遲發(fā)型超敏反應(yīng)。

該試驗(yàn)設(shè)計(jì)是基于人群中96%的人均感染過(guò)結(jié)核菌（被結(jié)核抗原致敏），致敏淋巴細(xì)胞再次接觸抗原（如OT)后，釋放細(xì)胞因子，使局部產(chǎn)生以巨噬細(xì)胞、淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)為主的炎癥反應(yīng)（表面為紅腫硬結(jié)）。陽(yáng)性（直徑>0.5cm)：表明曾感染過(guò)結(jié)核菌，細(xì)胞免疫功能好陰性(直徑<0.5cm)

：表明細(xì)胞免疫功能差或從未感染過(guò)結(jié)核菌強(qiáng)陽(yáng)性（直徑>2.5cm)：表明現(xiàn)處于結(jié)核的活動(dòng)期

Ⅳ型超敏反應(yīng)皮膚斑貼試驗(yàn)（patchtest）

主要用于尋找接觸性皮炎（屬Ⅳ型超敏反應(yīng)）的過(guò)敏原。取數(shù)層1cm2紗布浸蘸變應(yīng)原溶液，貼敷于受檢者前臂內(nèi)側(cè)，蓋以玻璃紙或蠟紙，再用紗布固定48－72h觀察結(jié)果敏感度不高，假陽(yáng)性少

Ⅳ型超敏反應(yīng)皮試結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn)

反應(yīng)結(jié)果皮內(nèi)斑貼無(wú)反應(yīng)（）無(wú)反應(yīng)或小于對(duì)照無(wú)反應(yīng)或小于對(duì)照弱陽(yáng)性（+）僅有紅腫輕度紅腫、搔癢陽(yáng)性（++）紅腫伴硬結(jié)（0.5－1cm）明顯紅腫，時(shí)有紅斑強(qiáng)陽(yáng)性（+++