第二十一章超敏反應性疾病及其免疫檢測P2571.超敏反應(hypersensitivity)——又稱為變態(tài)反應(allergy)，是指機體受到某些抗原刺激時，出現(xiàn)以生理功能紊亂或組織細胞損傷為主的異常適應性免疫應答。①起因：必須是再次接觸同一種抗原——變應原。②后果：造成組織細胞損傷和/或生理功能紊亂。

③本質：仍屬(適應性)特異性免疫應答反應。超敏反應的分類

Ⅰ型——過敏反應、速發(fā)型(IgE)

Ⅱ型——細胞毒型或細胞溶解型

(IgG，IgM)

Ⅲ型——免疫復合物型或血管炎型(IgG)

Ⅳ型——遲發(fā)型(Th1，CTL)Ⅰ型超敏反應1．Ⅰ型超敏反應(速發(fā)型)試驗原理

脫顆粒

IgEFceRI變應原炎癥反應

Ⅰ、Ⅳ型超敏反應性疾病常通過

皮膚試驗來尋找過敏原。

避免再次接觸過敏原是防治兩類疾病再次發(fā)生的重要手段。

皮膚試驗當變應原再次進入致敏者皮膚，與吸附在肥大細胞或/和嗜堿性粒細胞上的特異IgE高變區(qū)結合，導致肥大細胞或嗜堿性粒細胞脫顆粒，釋放生物活性介質：如組胺、白三烯、激肽等。在20－30分鐘內局部皮膚出現(xiàn)紅暈、紅斑、風團以及搔癢感，數(shù)小時后消失。出現(xiàn)此現(xiàn)象者判斷為皮試陽性，即對該變應原過敏；未出現(xiàn)紅暈、紅斑、風團者為陰性，即對該變應原不過敏。皮內試驗方法

Ⅰ型超敏反應皮內試驗

（1）前臂內側皮膚注入,注射量一般為0.01-0.02mL，使皮膚形成直徑約2－3mm的皮丘。（2）同時進行數(shù)種變應原皮試時，兩種皮試變應原的間距應為2.5-5cm。（3）注射后于15－25分鐘觀察有無風團和紅暈反應。（4）Ⅰ型超敏反應皮試時可引起全身反應，故注射后應嚴密觀察，一旦發(fā)生嚴重反應，應及時搶救。

Ⅰ型超敏反應皮內試驗風團和紅暈大小的分級法級別紅暈（cm）風團（cm）

<0.5無反應或小于對照

+1.1~2.00.3~0.5++2.1~3.00.6~0.9+++3.1~4.01.0~1.5,或有偽足++++>4.0>1.5，或有多個偽足變應原皮膚試驗挑刺試驗（pricktest)主要用于檢測Ⅰ型超敏反應方法：試驗時將抗原及對照液滴于受檢者前臂內側皮膚，然后在該處用針尖透過抗原液滴與皮膚呈45度進針點刺，1min后擦去抗原液，15min后觀察結果。以出現(xiàn)紅暈風團為陽性。較皮內試驗安全、敏感性低，假陽性少。Ⅰ型超敏反應皮膚試驗臨床意義

1．尋找變應原2．預防藥物或疫苗過敏血清IgE檢測

IgE是介導Ⅰ型超敏反應的抗體，檢測血清總IgE和特異性IgE對診斷Ⅰ型超敏反應性疾病及確定其變應原均很有價值。*IgE——親細胞性抗體可通過其Fc段與肥大細胞和嗜堿性粒細胞表面上的IgE

Fc受體結合而使機體處于致敏狀態(tài)。血清總IgE檢測血清總IgE水平是針對各種抗原誘導產生的IgE的總和。正常情況下血清IgE含量很低，僅在20-200U/ml水平。臨床上一般選用敏感性較高的化學發(fā)光法及酶聯(lián)免疫吸附法、免疫比濁法、放射免疫等進行檢測。1．放射免疫吸附試驗

此試驗是將抗IgE抗體吸附到固相載體上，用以檢測血清IgE(抗原)，故又稱固相放射免疫測定。

臨床上常用雙抗體夾心法，載體多用濾紙，將已知抗IgE抗體偶聯(lián)到經溴化氰活化的濾紙上,使其與待測血清中IgE進行反應，洗滌后加入125I標記的抗人IgE，再經洗滌后測定濾紙片的放射活性。其測定值與標本中的IgE含量呈正相關。2．酶聯(lián)免疫測定法測定血清IgE也可用雙抗體夾心ELISA法該法方便、實用，敏感性、特異性好無同位素污染，也不需要特殊儀器臨床上應用較廣洗滌三次終止液血清總IgE檢測臨床意義

正常人血清IgE水平為20－200Iu／ml(1Iu=2.4ng)Ⅰ型超敏反應性疾病、寄生蟲感染、急慢性肝炎等可使IgE升高血清IgE的量受多種因素的影響，如年齡、種族、地域、環(huán)境、遺傳及檢測方法等。分析血清IgE結果必須考慮當?shù)厝巳旱腎gE水平特異性IgE測定

特異性IgE是指能與某種過敏原特異結合的IgE（sIgE)。檢測時是將純化的特異變應原包被,采用間接法檢測血清中IgE(Ab)。常用檢測方法:放射免疫技術酶聯(lián)免疫技術

1．放射變應原吸附試驗（radioallergosorbenttest,RAST）

將純化的變應原吸附于固相載體上，加入待測血清(一抗）及參考標準品，再與同位素標記的抗人IgE抗體(二抗)反應，最后測定固相的放射活性。利用參考標準品做出標準曲線，求出待測血清中與變應原相結合的特異IgE含量。

2．酶聯(lián)免疫測定法

試驗原理及步驟基本與RAST

只是將同位素標記抗人IgE改為加酶標記的抗人IgE，再加入底物，利用酶催化底物生成有色產物顯色來判斷結果

特異性IgE檢測臨床意義

特異性IgE的增高對診斷Ⅰ型超敏反應疾病更具有重要價值采用間接法檢測特異性IgE時特異性高、敏感性強、影響因素少，同時也可確定變應原Ⅳ型超敏反應1．Ⅳ型超敏反應(遲發(fā)型)試驗原理

皮膚試驗用皮內注射、皮膚斑貼等方法使變應原進入已致敏機體，體內致敏的CD4+Th1再次遇到相應抗原后，釋放出大量細胞因子，如IL-2、IFN-γ、TNF、IL-3、GM-CSF,（1）活化巨噬細胞及NK，增強吞噬細胞作用；（2）吸引WBC到達Ag所在部位，促進吞噬；（3）促進T細胞增生和分泌細胞因子，加重局部炎癥反應，最后造成局部以單核細胞和淋巴細胞浸潤為主的炎癥反應。

48-72小時后局部出現(xiàn)紅腫、硬結或水泡，以此來判斷變應原是否引起機體Ⅳ型超敏反應或了解機體的細胞免疫功能。

Ⅳ型超敏反應皮膚試驗結核菌素皮試指用1:2000濃度的舊結核菌素（OT）或PPD0.1ml作Ag，于前臂內側皮內注射，48-72h后注射局部出現(xiàn)紅腫、硬結等局部炎癥反應。該實驗為典型的感染性遲發(fā)型超敏反應。

該試驗設計是基于人群中96%的人均感染過結核菌（被結核抗原致敏），致敏淋巴細胞再次接觸抗原（如OT)后，釋放細胞因子，使局部產生以巨噬細胞、淋巴細胞浸潤為主的炎癥反應（表面為紅腫硬結）。陽性（直徑>0.5cm)：表明曾感染過結核菌，細胞免疫功能好陰性(直徑<0.5cm)

：表明細胞免疫功能差或從未感染過結核菌強陽性（直徑>2.5cm)：表明現(xiàn)處于結核的活動期

Ⅳ型超敏反應皮膚斑貼試驗（patchtest）

主要用于尋找接觸性皮炎（屬Ⅳ型超敏反應）的過敏原。取數(shù)層1cm2紗布浸蘸變應原溶液，貼敷于受檢者前臂內側，蓋以玻璃紙或蠟紙，再用紗布固定48－72h觀察結果敏感度不高，假陽性少

Ⅳ型超敏反應皮試結果判定標準

反應結果皮內斑貼無反應（）無反應或小于對照無反應或小于對照弱陽性（+）僅有紅腫輕度紅腫、搔癢陽性（++）紅腫伴硬結（0.5－1cm）明顯紅腫，時有紅斑強陽性（+++