犐犆犛６５．１２０

犅４６

中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)

犌犅／犜２２２５９—２００８

飼料中土霉素的測(cè)定

高效液相色譜法

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２００８０８０１發(fā)布２００８１１０１實(shí)施

中華人民共和國國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局

發(fā)布

中國國家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì)

書

犌犅／犜２２２５９—２００８

前言

本標(biāo)準(zhǔn)的附錄Ａ為資料性附錄。

本標(biāo)準(zhǔn)由全國飼料工業(yè)標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)提出并歸口。

本標(biāo)準(zhǔn)起草單位：農(nóng)業(yè)部飼料質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)測(cè)試中心（南京）。

本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：宋慧敏、耿士偉、馮三令、儲(chǔ)瑞武、馮群科、賈書靜。

Ⅰ

書

犌犅／犜２２２５９—２００８

飼料中土霉素的測(cè)定

高效液相色譜法

１范圍

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了飼料中土霉素含量的高效液相色譜測(cè)定方法。

本標(biāo)準(zhǔn)適用于配合飼料、濃縮飼料、添加劑預(yù)混合飼料中土霉素的測(cè)定，檢出限為０．５ｍｇ／ｋｇ，定量

限為２ｍｇ／ｋｇ。

２規(guī)范性引用文件

下列文件中的條款通過本標(biāo)準(zhǔn)的引用而成為本標(biāo)準(zhǔn)的條款。凡是注日期的引用文件，其隨后所有

的修改單（不包括勘誤的內(nèi)容）或修訂版均不適用于本標(biāo)準(zhǔn)，然而，鼓勵(lì)根據(jù)本標(biāo)準(zhǔn)達(dá)成協(xié)議的各方研究

是否可使用這些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本適用于本標(biāo)準(zhǔn)。

ＧＢ／Ｔ６６８２分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法（ＧＢ／Ｔ６６８２—１９９２，ｎｅｑＩＳＯ３６９６：１９８７）

ＧＢ／Ｔ１４６９９．１飼料采樣

ＧＢ／Ｔ２０１９５動(dòng)物飼料試樣的制備

３原理

試樣中土霉素經(jīng)酸性溶液提取后，注入高效液相色譜儀反相色譜系統(tǒng)中進(jìn)行分離，用紫外檢測(cè)器

（或二極管陣列檢測(cè)器）檢測(cè)，外標(biāo)法計(jì)算土霉素的含量。

４試劑和溶液

除特殊說明外，所用試劑均為分析純，水為蒸餾水，色譜用水符合ＧＢ／Ｔ６６８２中一級(jí)用水規(guī)定。

４．１鹽酸：優(yōu)級(jí)純。

４．２鹽酸溶液（０．０５ｍｏｌ／Ｌ）：取鹽酸（４．１）４．５ｍＬ，溶解于１０００ｍＬ水中。

４．３乙腈：色譜純。

４．４磷酸二氫鈉。

４．５磷酸。

４．６磷酸鹽緩沖液：取磷酸二氫鈉（４．４）１．２ｇ，加水使溶解并稀釋至１０００ｍＬ，用磷酸（４．５）調(diào)ｐＨ值

至３．５０，搖勻，過濾。

４．７土霉素標(biāo)準(zhǔn)品：純度應(yīng)大于９７．０％。

４．８土霉素標(biāo)準(zhǔn)貯備液：準(zhǔn)確稱取已知純度的土霉素標(biāo)準(zhǔn)品２０ｍｇ，置于１００ｍＬ棕色容量瓶中，用鹽

酸溶液（４．２）溶解定容、搖勻，其濃度為０．２ｍｇ／ｍＬ。貯存于４℃冰箱中，溶液有效期１個(gè)月。

４．９土霉素標(biāo)準(zhǔn)曲線工作液：分別準(zhǔn)確移取標(biāo)準(zhǔn)貯備液（４．８）０．０５、０．５０、２．５０、７．５０、１２．５、２５ｍＬ于

１００ｍＬ棕色容量瓶中，用水