犐犆犛６５．０２０．３０

犅４０

中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)

犌犅／犜２４８６３—２０１０

畜禽細(xì)胞體外培養(yǎng)與

冷凍保存技術(shù)規(guī)程

犜犲犮犺狀犻犮犪犾狉犲犵狌犾犪狋犻狅狀狅犳犳犪狉犿犪狀犻犿犪犾狊犮犲犾犾犮狌犾狋狌狉犲犪狀犱犮狉狔狅狆狉犲狊犲狉狏犪狋犻狅狀

２０１００６３０發(fā)布２０１１０１０１實施

中華人民共和國國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗檢疫總局

發(fā)布

中國國家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會

書

犌犅／犜２４８６３—２０１０

前言

本標(biāo)準(zhǔn)由中華人民共和國農(nóng)業(yè)部提出。

本標(biāo)準(zhǔn)由全國畜牧業(yè)標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會（ＳＡＣ／ＴＣ２７４）歸口。

本標(biāo)準(zhǔn)起草單位：中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院北京畜牧獸醫(yī)研究所。

本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：關(guān)偉軍、馬月輝、李向臣、李晗、閆雷、趙倩君、宮雪蓮。

Ⅰ

書

犌犅／犜２４８６３—２０１０

畜禽細(xì)胞體外培養(yǎng)與

冷凍保存技術(shù)規(guī)程

１范圍

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了畜禽體細(xì)胞保存方法。

本標(biāo)準(zhǔn)適用于豬、牛、羊、馬、驢、雞、鴨、鵝等畜禽細(xì)胞體外培養(yǎng)與保存。

２規(guī)范性引用文件

下列文件中的條款通過本標(biāo)準(zhǔn)的引用而成為本標(biāo)準(zhǔn)的條款。凡是注日期的引用文件，其隨后所有

的修改單（不包括勘誤的內(nèi)容）或修訂版均不適用于本標(biāo)準(zhǔn)，然而，鼓勵根據(jù)本標(biāo)準(zhǔn)達(dá)成協(xié)議的各方研究

是否可使用這些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本適用于本標(biāo)準(zhǔn)。

ＧＢ／Ｔ６６８２分析實驗室用水規(guī)格和試驗方法

３術(shù)語和定義

下列術(shù)語和定義適用于本標(biāo)準(zhǔn)。

３．１

體細(xì)胞體外培養(yǎng)犻狀狏犻狋狉狅狊狅犿犪狋犻犮犮犲犾犾犮狌犾狋狌狉犲

將體細(xì)胞在模擬體內(nèi)生存環(huán)境的體外條件中進(jìn)行培養(yǎng)，使細(xì)胞生長增殖，并保留其完整結(jié)構(gòu)和功能

特性的方法。

３．２

原代細(xì)胞培養(yǎng)狆狉犻犿犪狉狔犮犲犾犾犮狌犾狋狌狉犲

將體細(xì)胞在模擬體內(nèi)生存環(huán)境中進(jìn)行培養(yǎng)，使細(xì)胞生長增殖達(dá)到可傳代狀態(tài)的培養(yǎng)方法。

３．３

細(xì)胞冷凍保存犮犲犾犾犮狉狔狅狆狉犲狊犲狉狏犪狋犻狅狀

將體外培養(yǎng)細(xì)胞與凍存液按一定比例混勻后，按設(shè)定的降溫速率降溫，使其于液氮中長期保存的

過程。

４工作區(qū)條件

工作區(qū)一般要由準(zhǔn)備室、緩沖間、無菌室、細(xì)胞保存室組成。

其中，緩沖間面積應(yīng)不小于３ｍ２，并設(shè)有更衣柜和紫外燈，紫外燈的強度為不少于１．５Ｗ／ｍ３。紫

外線燈管距地面不應(yīng)超過２．５ｍ，每次照射時間為２０ｍｉｎ～３０ｍｉｎ。無菌室無菌等級的最低標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)達(dá)

到萬級。

５主要儀器、設(shè)備

超凈工作臺、冰箱、鼓風(fēng)干燥箱、高壓蒸汽消毒器、液氮生物容器、離心機、電子天平、ＣＯ２