ICS1330013020

;

A80..

中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)

GB/T27854—2011

化學(xué)品土壤微生物氮轉(zhuǎn)化試驗(yàn)

Chemicals—Soilmicroorganisms—Nitrogentransformationtest

2011-12-30發(fā)布2012-08-01實(shí)施

中華人民共和國(guó)國(guó)家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局發(fā)布

中國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì)

GB/T27854—2011

前言

本標(biāo)準(zhǔn)按照給出的規(guī)則起草

GB/T1.1—2009。

本標(biāo)準(zhǔn)與經(jīng)濟(jì)合作與發(fā)展組織化學(xué)品測(cè)試導(dǎo)則土壤微生物氮轉(zhuǎn)化測(cè)試英文版技

OECD216《》()

術(shù)性內(nèi)容相同

。

本標(biāo)準(zhǔn)做了下列結(jié)構(gòu)和編輯性修改

:

將原文的前言部分調(diào)整作為引言

———;

將術(shù)語(yǔ)和定義從原文的附錄調(diào)整為正文內(nèi)容

———;

將計(jì)量單位改為我國(guó)法定計(jì)量單位

———。

本標(biāo)準(zhǔn)由全國(guó)危險(xiǎn)化學(xué)品管理標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)提出并歸口

(SAC/TC251)。

本標(biāo)準(zhǔn)起草單位廣東省微生物分析檢測(cè)中心湖北出入境檢驗(yàn)檢疫局環(huán)境保護(hù)部化學(xué)品登記中

:、、

心中國(guó)檢驗(yàn)檢疫科學(xué)研究院廣東德美精細(xì)化工股份有限公司東莞圣源環(huán)保科技有限公司

、、、。

本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人梅承芳曾國(guó)驅(qū)許玫英郭堅(jiān)周紅陳會(huì)明肖億金郭玉良

:、、、、、、、。

Ⅰ

GB/T27854—2011

引言

本試驗(yàn)方法用于評(píng)估化學(xué)品單次暴露后對(duì)土壤微生物氮轉(zhuǎn)化活性的長(zhǎng)期影響本試驗(yàn)主要依據(jù)歐

。

洲及地中海地區(qū)植物保護(hù)組織推薦的試驗(yàn)方法[1]同時(shí)參考了來(lái)自德國(guó)聯(lián)邦生物科研機(jī)構(gòu)[2]美國(guó)環(huán)保

,、

局[3]環(huán)境毒物學(xué)與化學(xué)學(xué)會(huì)[4]及國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)化組織[5]的試驗(yàn)方法年的土壤沉積物工作

、。1995,OECD/

組在意大利就本試驗(yàn)中使用土壤的類(lèi)型和數(shù)量達(dá)成了一致意見(jiàn)[6]有關(guān)土壤樣品的采集處

Belgirate。、

理和儲(chǔ)存等主要參考了的指南文件[7]以及工作組的建議

ISOBelgirate。

在對(duì)受試物的毒性進(jìn)行評(píng)估時(shí)例如在需要提供農(nóng)作物保護(hù)產(chǎn)品對(duì)于土壤微生物菌群的潛在負(fù)面

,,

影響時(shí)或者當(dāng)土壤微生物有可能暴露于除農(nóng)作物保護(hù)產(chǎn)品以外的其他化學(xué)品時(shí)需要測(cè)定受試物對(duì)土

,,

壤微生物活性的影響氮轉(zhuǎn)化試驗(yàn)就是用于測(cè)試這些化學(xué)品對(duì)于土壤微生物菌群的影響如果受試物

。。

為農(nóng)用化學(xué)品如農(nóng)作物保護(hù)產(chǎn)品化肥林產(chǎn)化學(xué)品則需進(jìn)行氮轉(zhuǎn)化試驗(yàn)和碳轉(zhuǎn)化試驗(yàn)如果受試

(、、),。

物是非農(nóng)用化學(xué)品則只需進(jìn)行氮轉(zhuǎn)化試驗(yàn)然而如果測(cè)得化學(xué)品氮轉(zhuǎn)化試驗(yàn)的值落在商用硝

,。,EC50

化作用抑制劑如氯三氯甲基吡啶的值范圍內(nèi)則需通過(guò)進(jìn)行碳轉(zhuǎn)化試驗(yàn)以獲得進(jìn)一步的

(2--6-)EC50,

信息

。

土壤由復(fù)雜的非均一的生物和非生物混合體構(gòu)成微生物在沃土有機(jī)物的降解和轉(zhuǎn)化過(guò)程中扮

、。

演著重要的角色且不同種類(lèi)的微生物對(duì)于土壤肥力的各方面均有貢獻(xiàn)而對(duì)于這些生化過(guò)程的任何

,。

長(zhǎng)期干預(yù)都將干擾營(yíng)養(yǎng)循環(huán)進(jìn)而改變土壤肥力所有肥沃的土壤中都存在碳和氮的轉(zhuǎn)化盡管不同土

,。,

壤中參與這些轉(zhuǎn)化過(guò)程的微生物群落各不相同但其轉(zhuǎn)化途徑在本質(zhì)上都是一致的

,。

本試驗(yàn)用以考察有氧表層土中受試物對(duì)于氮轉(zhuǎn)化過(guò)程的長(zhǎng)期負(fù)面影響該試驗(yàn)方法也可用于評(píng)價(jià)

。

受試物對(duì)于土壤微生物菌群碳轉(zhuǎn)化過(guò)程的影響硝酸鹽的形成通常發(fā)生在碳氮鍵斷裂之后因此當(dāng)

。-。,

對(duì)照組和處理組的硝酸鹽生成率相同時(shí)可以推斷其主要的碳降解途徑是完整且有效的試驗(yàn)選用的

,。

培養(yǎng)基如紫花苜蓿粉末應(yīng)具有合適的碳氮比通常在至的范圍內(nèi)這樣試驗(yàn)過(guò)程中微生

(),12/116/1。

物細(xì)胞的碳饑餓現(xiàn)象才會(huì)減少且即使微生物群落受到了化學(xué)品的破壞也可能會(huì)在內(nèi)恢復(fù)

“”,,100d。

本試驗(yàn)主要針對(duì)那些可以預(yù)期其在土壤中實(shí)際受納量的物質(zhì)例如農(nóng)作物保護(hù)產(chǎn)品在田間的施用

,,

率是已知的對(duì)農(nóng)用化學(xué)品根據(jù)其預(yù)計(jì)的施用率在試驗(yàn)時(shí)采用兩種劑量即可農(nóng)用化學(xué)品可以以其

。,。

活性成分或作為產(chǎn)品的形式進(jìn)行試驗(yàn)然而該試驗(yàn)不僅僅適用于農(nóng)用化學(xué)品通過(guò)同時(shí)改變

(a.i.)。,。

試驗(yàn)時(shí)土壤中受試物的量和數(shù)據(jù)評(píng)估的方式本方法同樣適用于那些在土壤中的受納量還無(wú)法確定的

,

化學(xué)品因此對(duì)非農(nóng)用化學(xué)品需要測(cè)定一系列不同濃度對(duì)氮轉(zhuǎn)化的影響根據(jù)得到的試驗(yàn)數(shù)據(jù)繪制

。,,。

劑量效應(yīng)曲線并計(jì)算x值其中x定義為氮轉(zhuǎn)化抑制百分率

-,EC,。

Ⅱ

GB/T27854—2011

化學(xué)品土壤微生物氮轉(zhuǎn)化試驗(yàn)

1范圍

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了化學(xué)品土壤微生物氮轉(zhuǎn)化試驗(yàn)的方法概述儀器設(shè)備試驗(yàn)系統(tǒng)試驗(yàn)程序質(zhì)量保證

、、、、

與質(zhì)量控制數(shù)據(jù)與報(bào)告

、。

本標(biāo)準(zhǔn)適用于評(píng)估化學(xué)品單次暴露后對(duì)土壤微生物氮轉(zhuǎn)化活性的長(zhǎng)期負(fù)面影響

。

2術(shù)語(yǔ)和定義

下列術(shù)語(yǔ)和定義適用于本文件

。

21

.

氮轉(zhuǎn)化nitrogentransformation

微生物通過(guò)氨化和硝化作用將含氮有機(jī)物最終降解為無(wú)機(jī)終產(chǎn)物硝酸鹽的過(guò)程

,。

22

.

效應(yīng)濃度effectiveconcentrationECx

,

引起氮轉(zhuǎn)化的抑制百分率為x時(shí)土壤中受試物的濃度

。

23

.

半數(shù)效應(yīng)濃度medianeffectiveconcentrationEC50

,

引起氮轉(zhuǎn)化的抑制百分率為時(shí)土壤中受試物的濃度

50%。

3方法概述

過(guò)篩的土壤與植物碎片混合后用受試物處理或不加處理對(duì)照組若受試物是農(nóng)用化學(xué)品則至

()。,

少選用個(gè)測(cè)試濃度濃度設(shè)置可以參考受試物預(yù)計(jì)在田間施用的最高濃度在培養(yǎng)和

2,。0d、7d、14d

后從處理組和對(duì)照組中取出一定量的土壤樣品用合適的溶劑浸提并測(cè)定提取液中硝酸鹽的含

28d,,

量比較處理組與對(duì)照組的硝酸鹽形成率計(jì)算處理組相對(duì)于對(duì)照組的百分比差異所有試驗(yàn)至少持

。,。

續(xù)如果第天處理組和對(duì)照組的差異不小于則試驗(yàn)可延至最長(zhǎng)若受試物是非農(nóng)

28d,2825%,100d。

用化學(xué)品則將一系列不同濃度的受試物加到土壤樣品中并在第天測(cè)定處理組和對(duì)照組中硝酸鹽

,,28

的產(chǎn)生量利用回歸模型對(duì)系列濃度的試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行分析并計(jì)算x值即和或

。,EC(EC50、EC25/EC10