標(biāo)準(zhǔn)解讀
《GB/T 28075-2011 薩氏假單胞桿菌菜豆生致病型 檢疫鑒定方法》是一項(xiàng)國家標(biāo)準(zhǔn),專門針對(duì)薩氏假單胞桿菌(Pseudomonas syringae pv. phaseolicola)的檢測與鑒定。該標(biāo)準(zhǔn)適用于對(duì)疑似感染了這種病原體的植物樣本進(jìn)行檢疫鑒定,尤其是針對(duì)菜豆等易感作物。其主要內(nèi)容涵蓋了從樣品采集、處理到最終結(jié)果分析的一整套流程。
首先,在樣品采集方面,標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了如何正確地從田間或?qū)嶒?yàn)室環(huán)境中選取合適的植物材料作為測試對(duì)象,并強(qiáng)調(diào)了采樣時(shí)需要注意避免交叉污染的重要性。接下來是關(guān)于樣品處理的具體步驟,包括但不限于清洗、剪切以及培養(yǎng)基的選擇和使用方法等細(xì)節(jié)說明。
隨后,進(jìn)入到了核心部分——病原菌的分離與純化過程。這里詳細(xì)介紹了多種可用于從植物組織中提取并純化目標(biāo)微生物的技術(shù)手段及其操作要點(diǎn)。此外,還列舉了幾種常用的培養(yǎng)條件及時(shí)間要求,確保能夠有效地獲得單一菌落以供后續(xù)研究之用。
緊接著是對(duì)分離得到的細(xì)菌進(jìn)行形態(tài)學(xué)觀察和生理生化特性測試的部分。通過顯微鏡下直接觀察細(xì)胞結(jié)構(gòu)特征,結(jié)合特定條件下生長情況的變化來初步判斷是否為所要尋找的目標(biāo)種類;同時(shí),利用一系列化學(xué)反應(yīng)實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步驗(yàn)證其代謝活性模式是否符合已知資料中對(duì)該類型假單胞桿菌的描述。
最后一步則是借助分子生物學(xué)技術(shù)如PCR擴(kuò)增特定基因片段等手段完成最終確認(rèn)工作。這部分內(nèi)容不僅提供了具體的引物序列信息,還明確了實(shí)驗(yàn)過程中需要嚴(yán)格遵守的各項(xiàng)參數(shù)設(shè)置指導(dǎo)原則,從而保證結(jié)果準(zhǔn)確可靠。
整個(gè)標(biāo)準(zhǔn)文件通過系統(tǒng)化的流程設(shè)計(jì)和技術(shù)規(guī)范制定,旨在為從事相關(guān)領(lǐng)域工作的研究人員提供一套科學(xué)合理且易于執(zhí)行的操作指南,有助于提高薩氏假單胞桿菌菜豆生致病型檢疫鑒定工作的效率與準(zhǔn)確性。
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....
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- 現(xiàn)行
- 正在執(zhí)行有效
- 2011-12-30 頒布
- 2012-06-01 實(shí)施
文檔簡介
ICS6502001
B16..
中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)
GB/T28075—2011
薩氏假單胞桿菌菜豆生致病型
檢疫鑒定方法
DetectionandidentificationofPseudomonassavastanoipv.
phaseolicolaBurkholderGardanetal.
()
2011-12-30發(fā)布2012-06-01實(shí)施
中華人民共和國國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局發(fā)布
中國國家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì)
中華人民共和國
國家標(biāo)準(zhǔn)
薩氏假單胞桿菌菜豆生致病型
檢疫鑒定方法
GB/T28075—2011
*
中國標(biāo)準(zhǔn)出版社出版發(fā)行
北京市朝陽區(qū)和平里西街甲號(hào)
2(100013)
北京市西城區(qū)三里河北街號(hào)
16(100045)
網(wǎng)址
:
服務(wù)熱線
/p>
年月第一版
20124
*
書號(hào)
:155066·1-44631
版權(quán)專有侵權(quán)必究
GB/T28075—2011
前言
本標(biāo)準(zhǔn)按照給出的規(guī)則起草
GB/T1.1—2009。
本標(biāo)準(zhǔn)使用重新起草法參考國際種子檢驗(yàn)協(xié)會(huì)的
(InternationalSeedTestingAssociation,ISTA)
第號(hào)標(biāo)準(zhǔn)豌豆中薩氏假單胞桿菌菜豆生致病型的檢測編制與
SeedHealthTestingMethods7-023《》,
標(biāo)準(zhǔn)的一致性程度為非等效
7-023:2008。
本標(biāo)準(zhǔn)由全國植物檢疫標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)提出并歸口
(SAC/TC271)。
本標(biāo)準(zhǔn)起草單位中華人民共和國廈門出入境檢驗(yàn)檢疫局中華人民共和國上海出入境檢驗(yàn)檢
:、
疫局
。
本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人林石明陳青黃蓬英易建平廖富榮吳媛陳紅運(yùn)王宏毅
:、、、、、、、。
Ⅰ
GB/T28075—2011
薩氏假單胞桿菌菜豆生致病型
檢疫鑒定方法
1范圍
本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了薩氏假單胞桿菌菜豆生致病型的生物學(xué)血清學(xué)和分子生物學(xué)的檢測鑒定方法
、。
本標(biāo)準(zhǔn)適用于植物種子苗木等繁殖材料及其產(chǎn)品中薩氏假單胞桿菌菜豆生致病型的檢測與鑒定
、。
2薩氏假單胞桿菌菜豆生致病型基本信息
中文名薩氏假單胞桿菌菜豆生致病型菜豆暈疫病菌
:()。
學(xué)名Pseudomonassavastanoiphaseolicola
:pv.(Burkholder,1926)Gardan,Bollet,Abu
Ghorrah,Grimont&Grimont,1992。
病害英文名
:haloblightofbean
同物異名Bacteriummedicaginisphaseolicola
:var.(Burkholder)Link&Hull,1927
Bacteriumpuerariae
Hedges,1927
Phytomonasmedicaginisphaseolicola
(Sackett)var.Burkholder,1926
Phytomonaspuerariae
(Hedges)Bergeyetal.,1930
Pseudomonasmedicaginisphaseolicola
var.(Burkholder)Stapp&Kotte,1929
Pseudomonasmedicaginisphaseolicola
f.sp.(Burkholder)Dowson,1957
Pseudomonasmedicaginis
Burkholder,1926
Pseudomonasphaseolicola
(Burkholder)Dowson,1943
Pseudomonassyringaephaseolicola
pv.(Burkholder)Young,Dye&Wilkie,1978
Xanthomonasmedicaginisvar.phaseolicola(Burkholder)Elliot,1951
屬原核生物界變形細(xì)菌門變形細(xì)菌綱假單
Procaryotes、Proteobacteria、γ-Gammaproteobacteria、
胞桿菌目假單胞桿菌科假單胞桿菌屬Pseudomonas
Pseudomonadales、Pseudomonadaceae、。
薩氏假單胞桿菌菜豆生致病型的其他信息參見附錄
A。
3方法原理
依據(jù)病菌在培養(yǎng)基上生長的菌落形態(tài)碳源的利用情況基于抗原抗體反應(yīng)的雙抗夾心酶聯(lián)免疫吸
、、
附測定基于體外合成技術(shù)的聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)以及病菌接種后的致病特征
(DAS-ELISA)、DNA(PCR)
等進(jìn)行檢測鑒定
。
4主要試劑
本標(biāo)準(zhǔn)的檢測鑒定方法主要使用以下試劑
:
蛋白胨氯化鈉硫酸鎂磷酸氫二鉀蔗糖酪胺酸甘油硼酸頭孢氨芐萬古霉素溴酚藍(lán)放線
、、、、、、、、、、、
菌酮或制霉菌素三氯甲烷異戊醇異丙醇鹽酸十二烷基硫酸鈉
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