ICS6502001

B16..

中華人民共和國國家標準

GB/T28981—2012

齒蘭環(huán)斑病毒檢疫鑒定方法

Detectionandidentificationofodontoglossumringspotvirus

2012-12-31發(fā)布2013-06-01實施

中華人民共和國國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗檢疫總局發(fā)布

中國國家標準化管理委員會

GB/T28981—2012

前言

本標準按照給出的規(guī)則起草

GB/T1.1—2009。

本標準由全國植物檢疫標準化技術(shù)委員會提出并歸口

(SAC/TC271)。

本標準起草單位中華人民共和國寧波出入境檢驗檢疫局中華人民共和國上海出入境檢驗檢疫

:、

局中國檢驗檢疫科學(xué)研究院中華人民共和國浙江出入境檢驗檢疫局

、、。

本標準主要起草人聞偉剛陳先鋒楊翠云郭立新魯潔張永江張明哲徐瑛崔俊霞張慧麗

:、、、、、、、、、。

Ⅰ

GB/T28981—2012

齒蘭環(huán)斑病毒檢疫鑒定方法

1范圍

本標準規(guī)定了齒蘭環(huán)斑病毒血清學(xué)和分子生物學(xué)特征的檢測方法

。

本標準適用于種子種球花卉和種苗等植物材料中齒蘭環(huán)斑病毒的檢測也適用于蚜蟲等傳播媒

、、,

介中該病毒的檢測

。

2齒蘭環(huán)斑病毒基本信息

中文名齒蘭環(huán)斑病毒

:

學(xué)名

:odontoglossumringspotvirus

縮寫

:ORSV

屬煙草花葉病毒屬Tobamovirus齒蘭環(huán)斑病毒其他信息參見附錄

(),A。

3方法原理

利用基于抗原抗體反應(yīng)的雙抗夾心酶聯(lián)免疫吸附測定

(Doubleantibodysandwichenzyme-linked

體外合成技術(shù)的反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈式反應(yīng)

immunosorbentassay,DAS-ELISA)、DNA(Reverse

實時熒光反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈式反應(yīng)

transcriptionpolymerasechainreaction,RT-PCR)、(real-time

進行檢測鑒定

fluorescentRT-PCR)。

4儀器設(shè)備用具和試劑

、

41儀器設(shè)備

.

儀實時熒光儀超凈工作臺電子天平感量電泳儀電泳槽凝膠成像系統(tǒng)

PCR、PCR、、(:0.001g)、、、、

高速冷凍離心機超低溫冰箱高壓滅菌鍋小型食品加工機微波爐酶標儀

、(-80℃)、、、、。

42用具

.

可調(diào)式微量移液器及相應(yīng)的無吸頭無

(2μL、10μL、100μL、200μL、1000μL、5000μL)RNase、

離心管管和研缽等

RNase、PCR。

43試劑

.

主要試劑和緩沖液見附錄和附錄

BC。

5檢測

51樣品制備

.

取種子種球鱗片或畸形變色癥狀的葉片等植物組織