第九章

尿液分析儀

UrineAnalyzer

一、概述

（一）干化學(xué)試劑帶歷史回顧

20世紀(jì)五十年代始，在Dr.Alfred.Helen.Free博士領(lǐng)導(dǎo)下，用葡萄糖氧化酶和過(guò)氧化物酶為基礎(chǔ)檢測(cè)葡萄糖，開(kāi)創(chuàng)了“浸與讀”干化學(xué)法新紀(jì)元，為以后試劑帶研制開(kāi)拓了一條新路。

70年代以來(lái)，各國(guó)都分別研制半自動(dòng)/全自動(dòng)尿液分析儀，代表的品牌有：Bayer公司Clinitek系列；B.M公司Miditron

Supertron等型號(hào)；日本京都株式會(huì)社MA-4210型號(hào)；韓國(guó)盈東制藥株式會(huì)社Uriscan-S型；中國(guó)桂林醫(yī)療電子儀器廠Uritest100、200型。（二）尿干化學(xué)分析儀

在測(cè)試膜塊中，含電解質(zhì)共聚體、指示劑和緩沖劑。當(dāng)尿比重高時(shí)，電解質(zhì)共聚體釋放出H+增多，使Pka下降，pH值降低，BTB為分子型，呈黃色；反之，當(dāng)尿比重低時(shí)，共聚體釋放出H+減少，使Pka增多，pH升高，BTB為離子型，呈藍(lán)綠色。[原理]

成人：1.015-1.025隨機(jī)尿：1.003-1.030首次晨尿：>1.020

新生兒：隨機(jī)尿：1.002～1.004

[參考范圍]

尿M+X-多尿M+X-少

O-CH3

CH2—CH—CH——CH—

COOHCOOHn

H+多H+少

BTBBTB

Pka(pH)Pka(pH)

分子型離子型

黃色藍(lán)綠色

4.干化學(xué)法只能用于尿比重過(guò)高或過(guò)低病人的篩選。5.本法不宜用于新生兒比重測(cè)定。6.干化學(xué)法、比重計(jì)法、折射儀法三者結(jié)果存在一定差距。

[注意事項(xiàng)]

尿比重高低與尿內(nèi)所含溶質(zhì)量成正比，與尿量成反比，與尿顏色深淺平行。1.增高。2.減低。3.等張尿：反映腎實(shí)質(zhì)有嚴(yán)重?fù)p害。4.監(jiān)測(cè)腎結(jié)石病人的尿理學(xué)變化。5.協(xié)助分析尿紅細(xì)胞形態(tài)學(xué)變化是否與比重有關(guān)。[臨床意義]

(二).酸堿度（pH）

[原理]

在測(cè)試膜塊中含有甲基紅（pH4.6～6.2）和溴麝香草酚草藍(lán)（pH6.0～7.6）兩種指示劑，適量配伍后可反映pH4.5～9.0的變異范圍。

1.尿標(biāo)本必須新鮮，擱置過(guò)久可導(dǎo)致pH值改變。

2.嚴(yán)格按規(guī)定時(shí)間浸泡試劑帶。

3.干化學(xué)法檢測(cè)pH值是半定量結(jié)果，觀察時(shí)一定要結(jié)合臨床資料分析。[注意事項(xiàng)]

1.了解體內(nèi)酸堿平行情況。強(qiáng)酸性尿。堿性尿。2.通過(guò)尿pH值動(dòng)態(tài)觀察，指導(dǎo)臨床用藥。3.監(jiān)控尿pH值的變化對(duì)其它膜塊區(qū)反應(yīng)的干擾。[臨床意義](三).葡萄糖(Glu)

[原理]

膜塊的葡萄糖氧化酶（GOD）與尿液中的葡萄糖（Glu）作用生成葡萄糖酸和過(guò)氧化氫（H2O2），后者再被過(guò)氧化氫酶（POD）催化，釋放出新生態(tài)氧（O），再作用于色源呈現(xiàn)不同的顏色變化，其深淺程度與葡萄糖量呈正比。

1.干化學(xué)法是酶促反應(yīng)，測(cè)定結(jié)果與反應(yīng)時(shí)間、溫度有關(guān)。2.試劑帶應(yīng)貯放于陰涼、干燥處，在有效期內(nèi)使用。3.本法屬半定量過(guò)篩試驗(yàn)，與濕化學(xué)法存在檔次差異。[注意事項(xiàng)]

1.生理性糖尿：見(jiàn)于食餌性糖尿、應(yīng)激性糖尿、妊娠性糖尿。2.病理性糖尿：見(jiàn)于真性糖尿、腎性糖尿，其他糖尿。[臨床意義]

[原理]

酮體是脂肪酸經(jīng)β-氧化后的產(chǎn)物,是乙酰乙酸、丙酮、β-羥丁酸的總稱。干化學(xué)法主要是檢測(cè)乙酰乙酸。

(四)酮體（Ket）

膜塊內(nèi)含的亞硝基鐵氰化鈉在堿性條件下與尿液中乙酰乙酸起反應(yīng)產(chǎn)生紫色化合物。

1.尿標(biāo)本必須新鮮，及時(shí)送檢。2.本法不與β-羥丁酸起反應(yīng)，與酮體粉法存在差異，應(yīng)予注意。3.各廠商生產(chǎn)試劑帶對(duì)酮體檢測(cè)成分不同。4.不同病因，不同病情酮體成分不同。[注意事項(xiàng)]

陽(yáng)性見(jiàn)于糖尿病酮癥酸中毒，感染性疾?。ǚ窝住?、結(jié)核等發(fā)熱期）、嚴(yán)重嘔吐、腹瀉、長(zhǎng)期饑餓、禁食、全身麻醉（氯仿、乙醚）后，磷中毒，服用降糖靈等。

[臨床意義]

(五).蛋白(Pro)

[原理]

膜塊中含溴酚藍(lán)、檸檬酸緩沖系統(tǒng)和表面活性劑。在一定的條件下溴酚藍(lán)產(chǎn)生出陰離子，與陽(yáng)離子的蛋白質(zhì)結(jié)合發(fā)生顏色變化。

[檢測(cè)范圍]150～>20000mg/L

[靈敏度]150～300mg/L（Alb）

[參考范圍]

陰性（<100mg/L）

1.生理性蛋白尿：

(1)功能性(2)病理性蛋白尿輕度中度重度

[臨床意義]

(六).膽紅素（BIL）

尿液中膽紅素的存在常提示肝細(xì)胞性疾病或肝內(nèi)、肝外膽道阻塞。

[原理]

根據(jù)重氮反應(yīng)原理，由于試劑帶組成不同，生成偶聯(lián)產(chǎn)物不同。

1.

尿標(biāo)本避免陽(yáng)光照射。2.尿含高維生素C和亞硝酸鹽時(shí)可抑制偶氮反應(yīng)，引致假陰性。3.

尿含氯丙嗪，鹽酸偶氮吡啶的代謝產(chǎn)物時(shí)可致假陽(yáng)性。

[注意事項(xiàng)]

陽(yáng)性見(jiàn)于肝細(xì)胞性黃疸（肝炎、肝硬化）和梗阻性黃疸（結(jié)石、腫瘤、先天性膽道閉鎖）。

[臨床意義]

尿膽原是尿紅素進(jìn)入腸道后經(jīng)細(xì)胞水解，還原作用下脫去葡萄糖醛酸和加氫后形成的。（七）尿膽原（UBG）

[原理]

根據(jù)干化學(xué)試劑帶組成成分的不同，測(cè)定原理有所不同。1.醛化反應(yīng)（Multistix?10SG）尿膽原+對(duì)二甲氨荃苯甲醛[H]+櫻紅色縮合物2.偶聯(lián)反應(yīng)（Combur10Test?M）尿膽原+對(duì)二甲苯重氮四氟化硼胭脂紅色重氮鹽偶氮化合物。

MultistixTM10SG試劑帶：2mg/L（32umol/L）Combur10Test?M試劑帶：4mg/L（64umol/L）

[參考范圍]〈1mg/L（3-6umol/L）

[檢測(cè)范圍]

1.尿標(biāo)本避免陽(yáng)光照射。2.尿中含膽紅素原、吲哚、膽紅素、吩噻嗪可致假陽(yáng)性。3.預(yù)先給患者服用碳酸氫鈉堿化尿液后收集午后2-4h尿標(biāo)本，可提高檢出率。4.對(duì)梗阻性黃疸患者，不宜用本法測(cè)定。[注意事項(xiàng)]

溶血性黃疸：顯著增加肝原性黃疸：輕度增加梗阻性黃疸：減少/缺如

[臨床意義]

(八).亞硝酸鹽（NIT）

當(dāng)尿路受大腸埃希氏菌感染時(shí)，可將硝酸鹽還原成亞硝酸鹽。故檢測(cè)時(shí)亞硝酸鹽是間接檢測(cè)尿路細(xì)菌感染的快速過(guò)篩檢查。[原理]

根據(jù)重氮-偶聯(lián)反應(yīng)原理

1.MultistixTM10SG試劑帶：

N-（1-萘基）乙二胺

HNO2+對(duì)氨基苯砷酸重氮化合物

偶氮化物

（粉紅色）

2.Combur10Test?M試劑帶：

羥基-1.2.34四氫并喹啉

HNO2+氨苯磺胺重氮化合物

偶氮化物

（淺紫色）

[檢測(cè)范圍]>0.3mg/L[靈敏度]0.3-0.6mg/L[參考范圍]陰性（<0.3mg/L）

1.尿亞硝酸鹽有三個(gè)條件：1)尿路感染細(xì)菌必須有硝酸鹽還原酶2)尿液中含適量硝酸鹽3)尿液在膀胱中停留時(shí)間>4h2.高比重尿含大量維生素C，硝基呋喃。使用利尿劑，抗菌素可致假陰性[注意事項(xiàng)]

3.陳舊尿、污染尿、色素尿，尿含非那吡啶可致假陽(yáng)性

[臨床意義]

泌尿道感染常為陽(yáng)性。[注意事項(xiàng)](九).血液

[原理]

尿液中紅細(xì)胞和游離血紅蛋白含有亞鐵血紅素具有過(guò)氧化物酶的作用，在供氫（電子）體的情況下能催化供氫體脫氫（氧化），同時(shí)使過(guò)氧化氫（H2O2）還原為水。試劑帶的供氫體是聯(lián)苯胺其本身不含發(fā)基團(tuán)，故無(wú)色。當(dāng)其脫氫后，分子結(jié)構(gòu)發(fā)生改變，出現(xiàn)了發(fā)色基因而顯色。其顏色深淺與RBC/Hb呈比例關(guān)系。AH2-H2O2過(guò)氧化物酶A+2H2O

完整紅細(xì)胞10——>200個(gè)/ul游離血紅蛋白300——6000ug/L

[靈敏度]

完整紅細(xì)胞5——>15個(gè)/ul游離血紅蛋白150——600ug/L

[參考范圍]

陰性[檢測(cè)范圍]

1.尿標(biāo)本要新鮮，容器要清潔。2.細(xì)菌尿，易熱酶干擾，尿中含肌紅蛋白、次氯酸鹽、氧化型清潔劑污染可致假陽(yáng)性。3.高蛋白尿、高比重尿、高濃度維生素，低pH（<5.0），尿含福馬林、卡普托利及尿樣品未混勻……等可致假陰性。

[注意事項(xiàng)]

陽(yáng)性常表示尿液中有血液存在。見(jiàn)于泌尿道結(jié)石，結(jié)核，腫瘤，創(chuàng)傷，腎炎等；也可以以游離血紅蛋白形式出現(xiàn)，其存在常表示腎臟、輸尿管、膀胱、尿道有損傷致紅細(xì)胞遭到破壞，或由于貯留在膀胱的尿濃度很稀導(dǎo)致紅細(xì)胞溶解。在血型不合輸血反應(yīng)時(shí)，在尿中可檢出游離血紅蛋白。

[臨床意義]

(十).白細(xì)胞

[原理]吲哚酯酚酯酶吲哚酚+重氮鹽氧化縮合紫色化合物[檢測(cè)范圍]

5-500個(gè)leu/ul

[靈敏度]

5-15個(gè)leu/ul[參考范圍]

陰性

1.本法主要檢測(cè)粒細(xì)胞酯酶。2.尿中含福爾馬林，呋喃坦啶，大量膽紅素，氧化型清潔劑可致假陽(yáng)性。3.

高比重尿，尿中含頭孢霉素，慶大霉素，四環(huán)素，硼酸，草酸可致假陰性。

[臨床意義]

陽(yáng)性常表示泌尿道感染。

[注意事項(xiàng)]

1．所用的試劑帶必須優(yōu)質(zhì)穩(wěn)定。要求：l

一定要有失效期，必須在有效期內(nèi)使用。l

參照廠商規(guī)定在一定條件下妥善保存。l

使用時(shí)一次只取出所需要的試劑帶。

l

不可合并各瓶中的試劑帶。

l不可觸摸試劑帶上各反應(yīng)檢測(cè)塊。三、干化學(xué)法檢查應(yīng)注意的幾個(gè)問(wèn)題

2．標(biāo)本必須新鮮。

3．注意干化學(xué)法與濕化學(xué)法之間的差異。

4．尿干化學(xué)測(cè)定結(jié)果受多因素影響。分析結(jié)果時(shí)要排除產(chǎn)生假陽(yáng)性、假陰性的原因。

5．干化學(xué)法檢測(cè)RBC，WBC僅可作為“過(guò)篩”試驗(yàn)。目前還沒(méi)有檢測(cè)管型的干化學(xué)法。

四、質(zhì)量控制

尿液分析應(yīng)在分析前、分析中、分析后實(shí)行全過(guò)程的質(zhì)量控制。檢查方法規(guī)范化：*標(biāo)本采集規(guī)范*檢查方法規(guī)范*報(bào)告方式規(guī)范*判斷標(biāo)準(zhǔn)規(guī)范*使用器材、試劑的規(guī)范

室內(nèi)質(zhì)控：

*質(zhì)控尿*復(fù)核制度

*陽(yáng)性率，陰性率*數(shù)據(jù)貯存

*結(jié)果相互矛盾的復(fù)核

室間質(zhì)控：

*參加室間評(píng)價(jià)活動(dòng)

*尿沉渣涂片調(diào)查

*交叉檢查，現(xiàn)場(chǎng)檢查

*定期或不定期交流學(xué)習(xí)

(一).室內(nèi)質(zhì)控物

1．人工尿制備

正常人新鮮尿→高壓滅菌→取上清尿液→加入各分析成份及防腐劑→預(yù)試合格后分裝于10ml棕色安瓿備用。

(二).質(zhì)控方法

1．做好試劑帶的質(zhì)量管理。2．每天用高、低值兩種質(zhì)控尿與常規(guī)標(biāo)本進(jìn)行平行試驗(yàn)，結(jié)果用質(zhì)控管理圖記錄。3．當(dāng)發(fā)現(xiàn)質(zhì)控結(jié)果不符時(shí)，除核查試劑帶外，還應(yīng)注意質(zhì)控尿液是否過(guò)期或混濁，進(jìn)行綜合分析。4．在一天內(nèi)最好使用同一份質(zhì)控品，能用“正常”和“異?！眱煞N質(zhì)控物進(jìn)行試驗(yàn)則更好。

(二).質(zhì)控方法

5．質(zhì)控物某一膜塊測(cè)定結(jié)果與“靶值”相差±1個(gè)膜塊內(nèi)是允許的，否則為“失控”。6．質(zhì)控物的測(cè)定結(jié)果由“正?！弊?yōu)椤爱惓！被蛳喾矗鶠椤笆Э亍薄?．對(duì)尿液分析儀應(yīng)選用技術(shù)性能優(yōu)良符合要求的產(chǎn)品；使用時(shí)應(yīng)嚴(yán)格遵守操作規(guī)程，使用后對(duì)儀器做好全面清理，保養(yǎng)；使用期間定期校正，保證儀器處于最佳狀態(tài)。

1。用質(zhì)控物進(jìn)行質(zhì)控

在

控

失

控

↓

↓

開(kāi)始進(jìn)行標(biāo)本測(cè)定

進(jìn)行第二步

2．檢查質(zhì)控物是否失效、是否正確儲(chǔ)存、是否污染

是這些問(wèn)題

沒(méi)有明確說(shuō)明

↓

↓

使用新的質(zhì)控物重新試驗(yàn)

重新試驗(yàn)

在

控

失

控

↓

↓

丟棄舊的質(zhì)控物繼行試驗(yàn)

進(jìn)行第三步

4．

3．配制新的質(zhì)控物

在

控

失

控

↓

↓

丟棄舊的質(zhì)控物繼續(xù)試驗(yàn)

進(jìn)行第四步4。同一批號(hào)的新試劑帶，并且用新的質(zhì)控物

在

控

失

控

↓

↓

丟棄失效的試劑

更換另一批號(hào)的新帶繼續(xù)試驗(yàn)

試劑帶重新試驗(yàn)

在

控

失

控