微病毒感染的檢查方法與防治原則第一頁，共二十九頁，2022年，8月28日目的與要求了解病毒的診斷，抗病毒治療，病毒感染的預防。第二頁，共二十九頁，2022年，8月28日第一節(jié)病毒感染的檢查方法第三頁，共二十九頁，2022年，8月28日病毒感染的檢查檢測內(nèi)容查病毒查特異性抗體病毒顆粒病毒抗原病毒核酸病毒酶類：如逆轉(zhuǎn)錄酶電鏡直接觀察光鏡檢查包涵體分離培養(yǎng)第四頁，共二十九頁，2022年，8月28日一、標本的采集與送檢原則基本與細菌相似，但應(yīng)注意：

1.標本用“雙抗”或兩性霉素B處理

2.低溫保存，盡快送檢

3.血清學診斷采雙份血清第五頁，共二十九頁，2022年，8月28日二、病毒的分離與鑒定（一）病毒的分離培養(yǎng)

細胞培養(yǎng)（cell

culture）

雞胚接種（egginoculation）

動物接種（animalinoculation）第六頁，共二十九頁，2022年，8月28日1.雞胚培養(yǎng)

采用孵化9～14天的雞胚

絨毛尿囊膜

痘苗病毒、人類皰疹病毒

尿囊腔接種部位流感病毒、腮腺炎病毒

羊膜腔

流感病毒的初次分離

卵黃囊嗜神經(jīng)病毒

第七頁，共二十九頁，2022年，8月28日第八頁，共二十九頁，2022年，8月28日1、雞胚培養(yǎng)優(yōu)點：易管理，不帶微生物，成本較低缺點：操作程序復雜第九頁，共二十九頁，2022年，8月28日第十頁，共二十九頁，2022年，8月28日2.動物接種

應(yīng)用：尚無敏感細胞的病毒培養(yǎng)

動物：兔、鼠、黑猩猩、猴等

優(yōu)點：結(jié)果易觀察，可建立動物模型缺點：有飼養(yǎng)條件要求，費用高，動物體內(nèi)常帶有潛伏病毒第十一頁，共二十九頁，2022年，8月28日病毒的分離培養(yǎng)

3.細胞培養(yǎng)

單層細胞培養(yǎng)（monolayercellculture）

分類懸浮細胞培養(yǎng)（suspendedcellculture）原代細胞（primarycell）細胞種類二倍體細胞（diploidcell）傳代細胞系（continuouscellline）第十二頁，共二十九頁，2022年，8月28日病毒的細胞培養(yǎng)細胞培養(yǎng)瓶單層細胞第十三頁，共二十九頁，2022年，8月28日1．病毒增殖鑒定

(1)細胞病變效應(yīng)（cytopathiceffect,

CPE）

①細胞變圓、聚集、壞死、溶解或脫落等（多數(shù)病毒）；②形成多核巨細胞或稱融合細胞（麻疹病毒、巨細胞病毒、呼吸道合胞病毒等）；③在培養(yǎng)細胞中形成包涵體（狂犬病病毒、麻疹病毒等）。（二）病毒的鑒定

第十四頁，共二十九頁，2022年，8月28日①細胞變圓、聚集、壞死、溶解或脫落第十五頁，共二十九頁，2022年，8月28日麻疹病毒感染細胞呼吸道合胞病毒感染細胞②形成多核巨細胞或稱融合細胞(1)細胞病變效應(yīng)(cytopathiceffect,CPE)第十六頁，共二十九頁，2022年，8月28日③形成包涵體(inclusionbody)(1)細胞病變效應(yīng)(cytopathiceffect,CPE)第十七頁，共二十九頁，2022年，8月28日腮腺炎病毒感染細胞(2)紅細胞吸附（hemadsorption）病毒囊膜表面血凝素(HA)＋紅細胞表面HA受體第十八頁，共二十九頁，2022年，8月28日(3)干擾現(xiàn)象（interference）風疹病毒＋人胚腎細胞病毒增殖，CPE(－)?？刹《荆伺吣I細胞病毒增殖，CPE(＋)＋人胚腎細胞風疹病毒？埃可病毒CPE(-)—風疹病毒(+)

?？刹《?-)CPE(+)—風疹病毒(-)

?？刹《?+)第十九頁，共二十九頁，2022年，8月28日2.病毒數(shù)量與感染性測定1.蝕斑形成試驗

（plaqueformationtest）

2.50％組織細胞感染量（50％tissueculture

infectiousdose,TCID50）感染性病毒量第二十頁，共二十九頁，2022年，8月28日2.病毒形態(tài)學鑒定電子顯微鏡：設(shè)備、操作復雜，應(yīng)用受限光學顯微鏡：可見大病毒（痘類病毒），對一般病毒檢測意義不大第二十一頁，共二十九頁，2022年，8月28日3.病毒血清學鑒定

用已知的抗體，鑒定病毒種、型、亞型

(1)血凝抑制試驗--—正粘病毒型與亞型鑒定病毒＋雞紅細胞＝凝集（血凝試驗）病毒＋特異性抗體＋雞紅細胞＝不凝集

（血凝抑制試驗）

(2)免疫標記法（FIA、EIA、RIA）

——多種病毒鑒定第二十二頁，共二十九頁，2022年，8月28日三、病毒分子生物學鑒定抗原變異病毒基因的鑒定核酸擴增核酸雜交基因芯片基因測序第二十三頁，共二十九頁，2022年，8月28日四、病毒感染的血清學診斷應(yīng)用：①采取標本分離病毒為時已晚②目前尚無分離此病毒的方法或難以分離的病毒③為證實所分離的病毒的臨床意義④進行血清流行病學調(diào)查等第二十四頁，共二十九頁，2022年，8月28日1.中和試驗（neutralizingtest）病毒＋中和抗體

病毒失去感染性

特點：特異性高，抗體維持時間長應(yīng)用：人群免疫情況的調(diào)查臨床診斷少用第二十五頁，共二十九頁，2022年，8月28日五、病毒感染的快速診斷數(shù)小時內(nèi)出結(jié)果病毒顆粒病毒成分（抗原或核酸）早期抗體檢測（IgM）第二十六頁，共二十九頁，2022年，8月28日病毒的快速診斷光鏡-----包涵體電鏡免疫熒光ELISA分子生物學技術(shù)雜交SouthernblotPCRNorthernblot第二十七頁，共二十九頁，2022年，8月28日第二節(jié)病毒感染的防治原則第二十八頁，共二十九頁，2022年，8月28日滅活疫苗（inactivatedvaccine）活疫苗（livingvaccine）重組載體疫苗（recombinantca