第九章革蘭陰性球菌奈瑟菌屬（Neisseria）奈瑟氏菌屬是一群革蘭陰性球菌，常成雙排列，無鞭毛，無芽胞，有菌毛。人類為奈瑟氏菌屬的自然宿主，在奈瑟菌屬10個種中，對人致病的只有腦膜炎奈瑟菌和淋病奈瑟菌，兩種細菌DNA序列有70％的同源性，其余8個種視為條件致病菌。主要區(qū)別點為，淋病奈瑟菌寄居于尿道黏膜，引起泌尿生殖系統(tǒng)疾??；而腦膜炎奈瑟菌和其他奈瑟菌均存在于鼻咽腔黏膜。腦膜炎奈瑟菌有多糖成分。第一節(jié)腦膜炎奈瑟菌N.meningitismeningococcus1.1生物學性狀——形態(tài)腦膜炎奈瑟菌純培養(yǎng)的鏡下形態(tài)（革蘭染色）腦膜炎奈瑟菌為革蘭染色陰性，常呈雙排列，直徑約為0.6-0.8μm的雙球菌。單個菌體呈腎形或豆形。成雙排列時，兩個凹面相對。無鞭毛，不形成芽胞。新分離菌株大多有莢膜和菌毛。在腦脊液(CSF)直接涂片中，常位于中性粒細胞內外。1.1生物學性狀——培養(yǎng)專性需氧，但在5%~10%CO2條件下生長最佳。營養(yǎng)要求高，需血液血清，最常用巧克力平板。形成光滑透明“露滴樣”菌落?？僧a生自溶酶，需及時轉種，培養(yǎng)物如不及時轉種，超過48h可死亡。腦膜炎奈瑟菌在巧克力瓊脂平板上的菌落特征腦膜炎奈瑟菌在巧克力平板上形成圓形、凸起、濕潤、光滑、透明露滴狀菌落。

血平板：成分：普通營養(yǎng)瓊脂（或哥倫比亞瓊脂），脫纖維羊血制法：取所需要量的普通營養(yǎng)瓊脂，加蒸餾水溶解后，高壓滅菌。冷卻至50度，加入一定量（5%）羊血，傾注平板。用途：適于各類細菌的生長。腦膜炎奈瑟菌在血瓊脂平板上的菌落特征腦膜炎奈瑟菌在培養(yǎng)基上形成圓形隆起、表面有光澤、透明或半透明、直徑約1mm～5mm的露滴樣粘液型菌落。無色素形成。血平板上無溶血現(xiàn)象。1.1生物學性狀——生化反應可產生自溶酶，人工培養(yǎng)時若不及時移種，48h后菌體自溶。大多數(shù)腦膜炎奈瑟菌分解葡萄糖和麥芽糖，產酸，不產氣。氧化酶和觸酶實驗陽性。1.1生物學性狀——抗原構造根據莢膜多糖抗原不同，分為13個血清群。目前我國流行的血清群，95%以上A群，B群次之，C群較少見，但致病力最強。1.1生物學性狀——致病性及免疫性致病物質莢膜（抗吞噬作用，增強細菌侵襲力）菌毛（黏附細胞表面，利于進一步侵襲）內毒素（主要致病物質）所致疾病流行性腦膜炎（簡稱流腦）人類是唯一的易感宿主，常存在于患者或帶菌者的鼻咽腔黏膜中，主要通過飛沫直接從空氣中傳播。致病機制目前尚未完全清楚。免疫性6月～2歲年齡組嬰兒免疫力最低，是易感人群1.2.1標本采集與分離培養(yǎng)1.病人腦脊液、血液和出血點滲出液的分離培養(yǎng)腦脊液離心取上清液檢測腦膜炎奈瑟菌特異抗原，沉淀物直接接種巧克力瓊脂平板，5%CO2，37℃培養(yǎng)，同時直接染色鏡檢。病人急性期靜脈血用葡萄糖血清肉湯增菌，5%CO2，37℃培養(yǎng)24-72h。每日從肉湯培養(yǎng)物中取樣分離培養(yǎng)，余下的血液分離血清檢查抗原和抗體效價，病人恢復期血液血清也檢測抗體效價。新鮮出血點滲出物接種巧克力平板，同時直接染色鏡檢。2.健康者咽拭子的分離培養(yǎng)咽拭子直接接種含多粘菌素B和萬古霉素的巧克力平板。1.2.2腦膜炎奈瑟菌的鑒定生化鑒定（光滑露珠樣菌落）

氧化酶：+DNA酶：-營養(yǎng)瓊脂生長：-葡萄糖：+麥芽糖：+1.3鑒定標準1.菌體和菌落特征典型。2.生化反應為分解葡萄糖、麥芽糖產酸不產氣。3.普通培養(yǎng)基上不生長。4.能與腦膜炎球菌分群診斷血清發(fā)生凝集反應。1.4防治原則綜合性預防措施隔離病人、檢查帶菌者、預防性投藥，室內通風流腦疫苗：6個月-2歲接種兩次，間隔1月A群腦膜炎球菌多糖抗原。制備疫苗青霉素、磺胺大劑量治療腦膜炎接種第二節(jié)淋病奈瑟菌Gonococcus2.1生物學性狀——形態(tài)革蘭染色陰性，0.6-0.8μm腎形、成雙排列有菌毛，無芽胞和鞭毛，新分離株有莢膜2.1生物學性狀——形態(tài)男性急性淋病患者的尿道分泌物標本直接涂片淋球菌（n.gonorrhoeae）為嚴格的人體寄生菌，常存在于急性尿道炎與陰道炎的膿性分泌物的白細胞中，形態(tài)染色類似于腦膜炎球菌。圖片顯示白細胞內擠滿了革蘭陰性雙球菌，此種表現(xiàn)為典型的淋病柰瑟菌的特征。2.1生物學性狀——培養(yǎng)專性需氧，首次分離時，需供給5%CO2。營養(yǎng)要求高，常用巧克力平板。抵抗力弱，不耐干燥和寒冷，對一般消毒劑敏感，對磺胺、青霉素較敏感，但易產生耐藥性。2.1生物學性狀——生化反應生化反應只分解葡萄糖，產酸不產氣，不分解其它糖類。不分解麥芽糖，區(qū)別于腦膜炎球菌。氧化酶及觸酶試驗均陽性。淋病奈瑟菌在血瓊脂平板上的菌落特征淋病柰瑟菌在血瓊脂平板上，菌落較小、光滑凸起，無色透明或呈灰白色淋病奈瑟菌在巧克力瓊脂平板上的菌落特征淋病奈瑟菌在巧克力瓊脂平板上，菌落較小，凸起，光滑，圓形，無色或灰白色與腦膜炎奈瑟菌相似，營養(yǎng)要求更高，只能在巧克力平板及專用培養(yǎng)基上生長，形成灰白色細小S型呈滴露樣菌落2.1生物學性狀——主要菌體表面抗原構造菌毛與粘附有關，免疫原性不強脂多糖抗原經常變異，相應抗體不能防止再感染外膜蛋白PI：主要外膜蛋白，將淋病奈瑟菌分為18個血清型PII：吸附易感細菌的蛋白2.1生物學性狀——致病物質及所致疾病致病物質菌毛脂多糖（內毒素）淋病人類是淋球菌唯一的天然宿主。成人淋病絕大多數(shù)通過性接觸感染，是重要的性傳播疾?。╯exuallytransmitteddisease，STD），目前我國流行的發(fā)病率最高的性傳播疾病。新生兒淋球菌性眼結膜炎“膿漏眼”2.2細菌學檢查標本采集與注意事項

男性急性尿道炎患者尿道膿性分泌物；慢性尿道炎患者要求在尿道口內3-4cm處采樣；前列腺炎患者采前列腺液。女性尿道炎患者采尿道分泌物；宮頸炎患者在宮頸口內1-1.5cm處取樣。取時用特制棉簽旋轉數(shù)周，并停留數(shù)秒種后取出。最好床旁接種，或立即置運送培養(yǎng)基中，盡快送至實驗室接種培養(yǎng)。保暖（運送時35oC保溫）、保濕、立即送檢檢驗方法直接涂片鏡檢對男性尿道炎患者鏡下見大量白細胞，其內有革蘭陰性雙球菌可判為陽性。分離培養(yǎng)與鑒定巧克力色培養(yǎng)基快速診斷法：觀察典型菌落。ELISA法、核酸雜交、PCR技術生化反應免疫學實驗藥敏實驗淋病奈瑟菌鑒定依據：1.涂片染色為革蘭陰性雙球菌；

2.巧克力平板上為半透明、灰白色、凸起滴露狀菌落；3.氧化酶及觸酶均陽性；

4.只分解葡萄糖，產酸不產氣；5.血清學試驗陽性。2.3細菌鑒別1.與腦膜炎奈瑟菌鑒別腦膜炎球菌可發(fā)酵葡萄糖，麥芽糖產酸，淋球菌只分解葡萄糖產酸，還可用血清學試驗加以鑒別。2.與其他奈瑟菌鑒別一般沒有必要鑒別。利用細菌形態(tài)、色素、糖發(fā)酵試驗。2.4防治原則預防淋病應防止不正當?shù)膬尚躁P系。新生兒1%硝酸銀滴眼，或紅霉素、四環(huán)素眼藥膏。藥物首選青霉素，但多有耐藥性，應用新型青霉素族抗生素。比較內容腦膜炎奈瑟菌淋病奈瑟菌生物學性狀形態(tài)結構G－雙球菌；有莢膜、菌毛(新)同左培養(yǎng)特性高營養(yǎng)、5%CO2露滴狀、自溶酶高營養(yǎng)、5%CO2

生化反應分解葡萄糖、麥芽糖只分解葡萄糖抗原與分類莢膜多糖群特異Ag外膜蛋白型特異Ag脂多糖Ag核蛋白Ag菌毛蛋白Ag脂多糖Ag外膜蛋白Ag(PⅠ、PⅡ、PⅢ)抵抗力冷、熱、干燥、消毒劑均敏感同左致病性致病物質莢膜、菌毛、內毒素莢膜、菌毛、外膜蛋白、IgA1所致疾病流行性腦脊膜炎