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組織學(xué)緒論一Introductionofhistology組織學(xué)緒論DepartmentofhistologyandembryologyshanximedicaluniversityJingya景雅組織學(xué)緒論一、組織學(xué)學(xué)科特點(diǎn)形態(tài)學(xué)科,顯微解剖學(xué)研究機(jī)體(細(xì)胞、組織、器官)微細(xì)結(jié)構(gòu)與功能的關(guān)系toolslightmicroscopeelectronmicroscopehistologyconfocalmicroscopelightmicroscope光鏡結(jié)構(gòu)mastcellsFigure4-29.Electronmicrographofpancreaticacinarcell:condensingvacuole(C),receivingasmallquantityofsecretoryproduct(arrow)fromavesiclemadeintheGolgicomplex(G).M,mitochondrion;RER,roughendoplasmicreticulum;S,maturecondensedsecretory(zymogen)granule.x40,000.透射電子顯微鏡電鏡結(jié)構(gòu)激光共聚焦掃描顯微鏡confocallaserscanningmicroscope,CLSM激光光源掃描聚焦定位準(zhǔn)確標(biāo)本熒光標(biāo)記熒光圖像清晰計(jì)算機(jī)圖像處理二、組織學(xué)研究?jī)?nèi)容
組織學(xué)研究三層次細(xì)胞水平組織水平器官水平(一)、細(xì)胞水平研究細(xì)胞是機(jī)體結(jié)構(gòu)和功能的基本單位,數(shù)量、種類多,形態(tài)各異,形態(tài)決定功能,不同形態(tài)細(xì)胞具有不同功能。根據(jù)形態(tài)學(xué)特點(diǎn)判斷細(xì)胞功能。細(xì)胞水平:光鏡細(xì)胞形態(tài),在組織中排列方式核形態(tài),(判斷細(xì)胞形態(tài)依據(jù))細(xì)胞質(zhì)染色:嗜酸性或嗜堿性細(xì)胞水平:電鏡細(xì)胞膜細(xì)胞器:種類數(shù)量特殊結(jié)構(gòu):微絨毛,纖毛,突起RER,golgicomplex,SER線粒體,lysosome,分泌顆粒Ribosome細(xì)胞核:常染色質(zhì),異染色質(zhì)(二)組織水平研究
細(xì)胞是機(jī)體結(jié)構(gòu)和功能單位,但在多細(xì)胞生物,沒有細(xì)胞之間的相互配合,細(xì)胞無法完成其功能。細(xì)胞要發(fā)揮其功能,必須組織在一起,構(gòu)成特定的細(xì)胞群體,才能完成相應(yīng)的功能。這種特定的細(xì)胞群體就是組織。
形態(tài)或功能相互關(guān)聯(lián)的細(xì)胞由細(xì)胞外基質(zhì)結(jié)合在一起,構(gòu)成執(zhí)行一定功能的細(xì)胞群體稱組織。tissuesarecomposedofaggregatesorgroupsofcellsandextracellularmatrixorganizedtoperformoneormorespecificfunctionstissue細(xì)胞形態(tài)或功能相互關(guān)聯(lián)的細(xì)胞組織在一起,執(zhí)行該組織的功能合成該組織的細(xì)胞外基質(zhì)extracellularmatrixfiber-纖維groundsubstancetissuefluid(三)、器官水平研究
根據(jù)形態(tài)和功能不同,構(gòu)成人體不同器官的組織分四種,稱四種基本組織四種基本組織上皮組織結(jié)締組織肌組織神經(jīng)組織以不同比例與方式結(jié)合形成不同器官和系統(tǒng)despiteitscomplicaxity,humanbodiscomposedoffourbasictissuetypes根據(jù)細(xì)胞排列方式識(shí)別組織,組織在器官中的分布特點(diǎn)識(shí)別器官。上皮組織:細(xì)胞排列緊密,細(xì)胞外基質(zhì)很少結(jié)締組織:細(xì)胞種類多,排列稀疏,大量細(xì)胞外基質(zhì)肌組織:細(xì)胞長(zhǎng)纖維狀骨骼肌平滑肌神經(jīng)組織:細(xì)胞突起多,無細(xì)胞外基質(zhì)三、組織學(xué)研究常用方法(一)光鏡石蠟切片應(yīng)用光學(xué)顯微鏡觀察組織切片是研究組織學(xué)常用方法,經(jīng)常觀察的是石蠟包埋后的組織切片,基本原理:用石蠟取代組織中水分,使組織具有一定硬度,便于切片。1.取材、固定5mm3固定常用固定液:乙醇、甲醛防止腐敗、自溶、盡量使組織結(jié)構(gòu)保持在生活狀態(tài)2.脫水、透明脫水:乙醇置換組織中水分透明:二甲苯置換組織中乙醇3.浸蠟、包埋浸蠟:石蠟置換二甲苯組織有硬度包埋:形成石蠟包埋塊,便于切片4.切片石蠟切片機(jī)厚度:5--10μm切片機(jī)microtomeglassslidetissueblockparaffinknifetissuesection(二)、常用染色方法未經(jīng)染色切片無反差,無法觀察,染色后便于觀察,常用染料為有機(jī)化合物,分兩類:染料酸性染料:伊紅Eosin:carriesanetnegativecharge堿性染料:蘇木精Hematoxylin:carriesanetpositivecharge
嗜酸性(Acidophilia):組織細(xì)胞對(duì)酸性染料親和力強(qiáng)嗜堿性(Basophilia):組織細(xì)胞對(duì)堿性染料親和力強(qiáng)中性(Neutrophilia):對(duì)堿性和酸性染料親和力都不強(qiáng)affinitiesfordyesreflectcellmorphologicalandfunctioncharacteristics1.H.E染色蘇木精:核紫藍(lán)色,核糖體,RER伊紅:胞質(zhì)粉紅色,線粒體,分泌顆粒2.組織化學(xué)(histochemistry):通過化學(xué)或物理反應(yīng)原理顯示組織或細(xì)胞內(nèi)化學(xué)成分,通常是使其形成有色終末產(chǎn)物,以便在鏡下觀察,可進(jìn)行定位和定量PAS反應(yīng)(periodicacid-schiffreaction)顯示多糖,糖原、蛋白多糖多糖乙二醇基過碘酸氧化HIO4乙二醛基+亞硫酸品紅紫紅色沉淀PASreactionH.Ecounterstaining3.Immunohistochemistry
利用抗原抗體反應(yīng)原理,檢測(cè)組織細(xì)胞內(nèi)多肽、蛋白質(zhì)的技術(shù)。特點(diǎn):靈敏度高、特異性強(qiáng)Antigen:組織內(nèi)待測(cè)物質(zhì)Antibody和抗原特異結(jié)合可以被標(biāo)記熒光素鐵蛋白過氧化物酶特異抗原刺激后漿細(xì)胞產(chǎn)生提取抗原注射抗原標(biāo)記染色提取抗體(三)電子顯微鏡術(shù)1.transmissionelectronmicroscopy取材:組織小,取材快固定:戊二醛。鋨酸脫水:丙酮包埋:環(huán)氧樹脂切片:超薄切片機(jī),50-80nm重金屬鹽染色:檸檬酸鉛,醋酸鈾觀察:黑白圖像
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