微生物限度檢測用技術培養(yǎng)基生產(chǎn)促進試驗標準操作規(guī)程編碼：版本號：修訂號：00頁號：PAGE7/39起草部門起草人簽名及日期質(zhì)量部審核部門審核人簽名及日期質(zhì)量部綜合辦公室批準人批準人簽名及日期總經(jīng)理發(fā)布部門質(zhì)量部發(fā)放部門質(zhì)量部發(fā)布日期2016年03月15日實施日期2016年04月01日

1.目的建立微生物限度檢驗用計數(shù)培養(yǎng)基生長促進試驗，控制培養(yǎng)基生長、抑制及指示能力檢測操作管理規(guī)定。2.適用范圍 本規(guī)程適用于微生物限度檢測用培養(yǎng)基的質(zhì)量控制。4.術語和定義無5.部門及人員職責5.1.質(zhì)量檢驗人員對實施本標準負責。5.2.質(zhì)量檢驗人員嚴格執(zhí)行本規(guī)定。6.具體內(nèi)容6.1.計數(shù)培養(yǎng)基的生長促進試驗6.1.1.菌種從XX集團股份有限公司質(zhì)量檢驗中心申領菌種，用于微生物限度檢測用計數(shù)培養(yǎng)基生產(chǎn)促進試驗。領用量不超過單次用量的2倍。領用的菌種有：大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌、白色念珠菌黑曲霉；其中大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌和枯草芽孢桿菌用于營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基檢查，黑曲霉菌、白色念珠菌用于玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基檢查。6.1.2.菌液使用新購進培養(yǎng)基用于首次檢測前，進行計數(shù)生長促進試驗。6.1.3.接種培養(yǎng)分別吸取大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌和枯草芽孢桿菌的稀釋液各1ml至兩個無菌平皿中，然后加入約15ml的營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基，搖勻，凝固，在30-350C培養(yǎng)72小時，計數(shù)。分別吸取黑曲霉菌和白色念珠菌的稀釋液各1ml至兩個無菌平皿中，然后加入約15ml的玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基，搖勻凝固，在23-28℃培養(yǎng)5天，計數(shù)。同時，用相應的對照培養(yǎng)基進行對照試驗。如果沒有對照培養(yǎng)基，可采用標準接種物或上一批已通過生長促進試驗的培養(yǎng)基進行對照。6.1.4.結(jié)果判定6.1.4.1.如果使用對照品培養(yǎng)基，則被檢培養(yǎng)基上的菌落平均數(shù)不小于對照培養(yǎng)基上的菌落平均數(shù)的70%，且菌落形態(tài)大小與對照培養(yǎng)基上的菌落一致，判定此批培養(yǎng)基通過生長促進試驗的測試。6.1.4.2.如果使用標準接種物（如50-100cfu/ml的菌液），則被檢培養(yǎng)基上的菌落平均數(shù)與標準接種物的計算數(shù)量差別小于系數(shù)2，即在50%-200%之間。6.1.4.3.如果使用上一批已通過測試的培養(yǎng)基作對照試驗，則被檢培養(yǎng)基上的菌落平均數(shù)應在上一批已通過測試的培養(yǎng)基平均菌落數(shù)的70%之間，且菌落形態(tài)大小與對照培養(yǎng)基上的菌落一致，判定該批培養(yǎng)基通過生長促進試驗的測試。6.1.5.對照培養(yǎng)基的使用6.1.5.1.新購進干粉培養(yǎng)基（含分次購進的同一批號的培養(yǎng)基）在首次配制時使用對照培養(yǎng)基進行生長促進試驗。如果沒有對照培養(yǎng)基，采用標準接種物進行生長促進試驗。6.1.5.2.以后配制的培養(yǎng)基可以使用上一批已通過測試的培養(yǎng)基進行生長促進試驗。6.1.6.檢驗頻次每配制一批培養(yǎng)基均需進行一次生長促進試驗。7.檢查、評估及考核7.1.質(zhì)量部負責取樣用具、取樣室的清潔、滅菌工作的監(jiān)督、檢查及考核工作。7.2.綜合辦公室負責對質(zhì)量部本辦法的執(zhí)行情況進行檢查與考核。8.流程圖無9.附錄附錄1：《微生物限度檢驗中營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基生長促進試驗記錄》附錄2：《微生物限度檢驗中玫瑰紅鈉（或沙氏瓊脂培養(yǎng)基）培養(yǎng)基生長促進試驗記錄》附錄3:《菌液領取使用記錄》10.說明本文件自2016年03月01日起實施，最終解釋權歸質(zhì)量部所有。11.變更記錄序號版本號修訂號變更內(nèi)容生效日期1202100版本變更2021年02月27日22021012016年03月01日345

附錄1 Q/XXXX·401-04-00·C03-006-06-A微生物限度檢驗中營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基生長促進試驗記錄培養(yǎng)基生產(chǎn)廠家：干粉培養(yǎng)基批號：配制培養(yǎng)基批號：培養(yǎng)基購進日期：生長促進試驗日期：4對照培養(yǎng)基（標準接種物、上一批通過測試的培養(yǎng)基）批號：5、試驗用菌液批號：菌種名稱菌種代號菌液批號大腸埃希菌〔CMCC(B)44102〕金黃色葡萄球菌〔CMCC(B)26003〕枯草芽孢桿菌〔CMCC(B)63501〕6、生長促進試驗過程：取上述菌液各1ml，分別接種至裝有約15ml的營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基的兩個平皿中，搖勻。在30-350C培養(yǎng)72小時，點計菌落數(shù)。7、結(jié)果 結(jié)果菌種對照培養(yǎng)基上一批已通過測試的培養(yǎng)基被測試培養(yǎng)基平皿1平皿2平均值平皿1平皿2平均值大腸埃希菌金黃色葡萄球菌枯草芽孢桿菌8、標準：如使用對照培養(yǎng)基或上一批已通過測試的培養(yǎng)基進行對照，則被測培養(yǎng)基的菌落平均值應不少于對照培養(yǎng)基或上一批已通過測試的培養(yǎng)基平均菌落數(shù)的70%；如使用標準接種物，則被測培養(yǎng)基菌落平均值應在25-200之間。9、結(jié)論：檢驗人：復核人：批準人：附錄2 Q/XXXX·401-04-00·C03-006-06-B微生物限度檢驗中玫瑰紅鈉（或沙氏瓊脂培養(yǎng)基）培養(yǎng)基生長促進試驗記錄培養(yǎng)基生產(chǎn)廠家：干粉培養(yǎng)基批號：配制培養(yǎng)基批號：培養(yǎng)基購進日期：生長促進試驗日期：對照培養(yǎng)基（標準接種物、上一批通過測試的培養(yǎng)基）批號：試驗用菌液批號：菌種名稱菌種代號菌液批號白色念珠菌〔CMCC(F)98001〕黑曲霉菌〔CMCC(F)98003〕生長促進試驗過程：取上述菌液各1ml，分別接種至裝有約15ml的玫瑰紅鈉培養(yǎng)基的兩個平皿中，搖勻。在23-280C培養(yǎng)5天，點計菌落數(shù)。結(jié)果 結(jié)果菌種對照培養(yǎng)基上一批已通過測試的培養(yǎng)基被測試培養(yǎng)基平皿1平皿2平均值平皿1平皿2平均值白色念珠菌黑曲霉菌8、標準：如使用對照培養(yǎng)基或上一批已通過測試的培養(yǎng)基進行對照，則被測培養(yǎng)基的菌落平均值應不少于對照培養(yǎng)基或上一批已通過測試的培養(yǎng)基平均菌落數(shù)的70%；如使用標準接種物，則被測培養(yǎng)基菌落平均值應在25-200之間。9、結(jié)論：檢驗人：復核人：批準人：附錄3Q/XXXX·401-04-00·C03-006-06-C菌液領取使用記錄制備單位XX集團股份有限公司質(zhì)檢中心使用單位XX有限公司用途培養(yǎng)基生長促進試驗領取日期年月日領取人發(fā)放人菌液名稱