儀器分析中的樣品處理演(Yan)示文稿第一頁，共六十九頁。優(yōu)選儀器分析中的(De)樣品處理第二頁，共六十九頁。儀器(Qi)分析的四個基本程序樣品的采集樣品的處理－分析試(Shi)樣的制備上機分析數(shù)據(jù)處理

第三頁，共六十九頁。樣品(Pin)處理的目的將微量或痕量的欲測組分富集將干擾(Rao)欲測組分的物質去除將無法被儀器分析的欲測組分轉化成可被儀器分析的物質第四頁，共六十九頁。樣品處理在(Zai)儀器分析中的

必要性和重要性分析樣品必須滿足所用分析儀器的要求樣品處理將直接影響分析結果的可靠性和準確性整個分析過程中樣品處理花費的時(Shi)間和精力最多

第五頁，共六十九頁。樣品處(Chu)理應遵守的原則采集的樣品要能滿足分析測試的目的，采集的樣品要有代表性，故在采樣的時間和地點，采樣的方法，采樣的量等方面作充分考(Kao)慮。第六頁，共六十九頁。采樣裝置應保證采樣時樣品組成不發(fā)生變化。樣品處理前應首先了解分析測試的目的和欲測組分的物理、化學性能，對樣品的基本情況(如：物理性能、化學組成等等)也應有所了解，以便選擇適當?shù)摹⒑侠淼奶幚矸?Fang)法。第七頁，共六十九頁。樣品處理過程中要防止和避免欲測組分發(fā)生化學變化，如必須將欲測組分進行轉換時，所使用的化學反應必須是已知的和能定量完成的。樣品處理過程中要防止和避免欲測組分的沾污或丟失，在處理過程中應盡可能減(Jian)少無關物質的引入。

第八頁，共六十九頁。樣品處理所使用的方法應盡可能簡單易行，所使用的裝置尺寸應與處理的樣品量相適應。樣品處理時應同時處理2個或2個以(Yi)上平行樣品，并帶一個空白，用以(Yi)檢查樣品處理過程中是否存在問題。第九頁，共六十九頁。樣品的采集方(Fang)法氣(Qi)體樣品的采集直接采集：剛性容器采用預抽真空法采樣，柔性容器采用泵采樣。富集采集－固體吸附法、溶液吸收法、冷阱收集法。液體樣品的采集直接采集：可直接用棕色玻璃瓶采集，樣品灌滿并溢出后封好，瓶中不應有氣泡，需要時應加適當?shù)谋４鎰８患杉何絼┪?。第十頁，共六十九頁。固體樣品的(De)采集

直接采集：考慮樣品的均勻性和代表性，采樣量要大些，然后進行縮分。大氣中懸浮顆粒物樣品的采集根據(jù)所需采集顆粒物大小選擇適當?shù)臑V膜或濾筒采集。第十一頁，共六十九頁。樣品處理的常用技術(Shu)（方法）灰化和消解

主要用于有機物中金屬元素的分析，通過高溫氧化或強氧化劑（如濃硫酸、硝酸、高氯(Lv)酸、王水等等）氧化的方法將有機物中的大量碳除去。酸溶、堿溶和熔融

利用酸溶、堿溶或熔融的方法，將固體樣品或灰化和消解后的產物轉化為溶液，以便儀器分析或進行下一步的處理。第十二頁，共六十九頁。萃取

將樣品中欲測組分抽提到另一相中，使(Shi)其與干擾組分分離，并可同時進行富集?？煞譃橐合噍腿　獙⒐腆w、液體或氣體樣品中欲測組分抽提到溶劑中；固相萃取—將液體或氣體樣品中欲測組分吸附在固體上；氣相萃?。斂占夹g）—將固體或液體樣品中欲測組分抽提到氣體中；超臨界流體萃取—將固體樣品中欲測組分抽提到超臨界流體中。第十三頁，共六十九頁。蒸餾

利用欲測組分與干擾組分的沸點不同而(Er)進行分離，亦可同時進行富集?？煞譃楹唵握麴s、分餾（精餾）、減壓蒸餾和水汽蒸餾等。第十四頁，共六十九頁。沉淀、結晶和重結晶

利用欲測組分與干擾組分在不同溶劑中的溶解度不同而進行分離，亦可同時進行富集?？蓪⒂麥y組分沉淀，干擾組分留在溶液中；亦可將干擾組分沉淀，欲測組分留在溶液中?？衫酶淖內芤旱臏囟?、濃度、pH值、溶劑的組成(Cheng)來改變欲測組分和干擾組分的溶解度，使其分離；亦可加入某些物質，使欲測組分或干擾組分沉淀或共沉淀（結晶或共結晶）而得到分離?？衫弥亟Y晶的方法得到很純的化合物，以便利用某些儀器進行準確的結構分析。第十五頁，共六十九頁。膜分離

利用欲測組分與干擾組分對不同膜的透(Tou)過性不同而分離。其分離過程可分為滲析、超濾和電滲析。膜分離也被稱為膜萃取。衍生化

利用已知的、能定量完成的化學反應，將不能被儀器分析或檢測的欲測組分轉化成可被儀器分析或檢測的物質，或將不能與干擾組分分離的欲測組分轉化成能分離的物質使兩者分離。第十六頁，共六十九頁。熱解吸利用控制加熱速度和溫度的方法使欲測組分從固體樣品或固相萃取所用的固體吸附劑中解吸出來(Lai)，從而與干擾組分分離。熱裂解主要用于高分子化合物分析，通過控制加熱速度和溫度使高分子化合物發(fā)生分解，生成小分子碎片，分析這些分解產物，推斷原高分子化合物的組成和結構。第十七頁，共六十九頁。電解

利用欲測組分與干擾物質的電解電位不同，通過電解的方法將欲測組分與干擾物質分離，并可以(Yi)進行富集。如在作極譜分析或庫侖分析時，可通過電解進行預分離和預富集。色譜

不同運行模式的色譜本身就是一種分析儀器，可以用來對欲測組分進行分析測試。不同運行模式的色譜又是一種分離技術，可將欲測組分與干擾物質分離，然后用其他分析儀器進行脫機或聯(lián)機分析。在樣品處理中最常用的是柱色譜和薄層色譜。第十八頁，共六十九頁。膜分離技術(Shu)在樣品處理中的應用工(Gong)作原理

利用不同高分子膜對不同化合物的滲透性有所不同，將欲測組分與樣品基體和干擾組分分離。在樣品處理中常用的膜分離技術有：滲析、超濾和電滲析。下表給出這三種膜分離的分離機理和應用。第十九頁，共六十九頁。分離過程驅動力分離機理應用膜結構滲析濃度梯度擴散速度不同分離高或低分子量物質，分離極性或非極性物質對稱、多孔/無孔超濾壓力梯度篩分分離高或低分子量物質不對稱、多孔（1-100nm）電滲析電位差離子選擇性通過去除水中的鹽對稱、離子選擇性第二十頁，共六十九頁。裝置

目前樣品處理中常用(Yong)的膜分離裝置有兩種類型：1.平面膜：下圖給出平面膜與質譜或色譜分析聯(lián)用結構圖

排出樣品(氣體/液體)流動相泵泵質譜或色譜分離膜六通閥第二十一頁，共六十九頁。2.中空(Kong)纖維膜：下圖給出中空纖維膜分離裝置結構圖中空纖(Xian)維膜吹掃氣體樣品出口樣品入口捕集裝置或分析儀器第二十二頁，共六十九頁。應用

由于膜分離技術具有裝置結構簡單、操作程序方便、無需有機溶劑處理、可與各種分析儀器直接連接，易于實現(xiàn)自動化和在線操作等，所以膜分離技術的可應用于各類儀器分析的樣品處理。下面介(Jie)紹一個應用實例：利用膜分離和氣相色譜聯(lián)用測定血漿中的乙醇。第二十三頁，共六十九頁。吹(Chui)掃氣體入口吹掃氣(Qi)體出口氣相色譜樣品瓶中空纖維膜血樣品和水

膜-氣相色譜連接結構圖0.3m-0.5m長的空心毛細管第二十四頁，共六十九頁。乙(Yi)醇，6.4mg/ml血液樣品中乙醇的膜萃取-氣相色譜測(Ce)定結果第二十五頁，共六十九頁。測定血中(Zhong)乙醇三種方法的比較處理方法取樣量/ml處理條件和時間進樣方式測定范圍/%相對誤差/%頂空技術5~1560℃，60min離線0.1~0.52.73(單點)固相微萃取5~1560℃，60min離線未做未做膜萃取0.2~250℃，1~2min在線0.1~0.8-9.4~11第二十六頁，共六十九頁。膜分離技術可以與各(Ge)種捕集技術相結合，使欲測組分得到富集。樣品瓶中空纖維膜微捕集管樣品和水吹掃氣體出口氣相色譜或質譜儀器冷卻板

膜萃取-微捕集串聯(lián)(Lian)與氣相色譜或質譜聯(lián)(Lian)機結構圖第二十七頁，共六十九頁。吹(Chui)掃/捕集技術

在樣品處理中的應用工作原理

吹掃—捕集技術實質上是一種連續(xù)氣體萃取技術（屬于動態(tài)頂空技術），吹掃氣（一般使用氮氣）通過液體或固體樣品，將樣品中(Zhong)的可揮發(fā)組分（其中(Zhong)包括欲測組分）帶出，然后用冷凍或固體吸附劑吸附的方法，將欲測組分捕集下來，再通過熱解吸的方法，將欲測組分解吸下來，進入分析儀器分析。第二十八頁，共六十九頁。裝置

目前已有多種商品化的吹掃—捕集裝置，各裝置在結構上雖有不同，但其流程和(He)工作原理基本一致，下圖給出吹掃—捕集方法的流程圖：第二十九頁，共六十九頁。吹掃和捕集方法流程圖示A吹掃(萃取)；B解吸(進(Jin)樣)；C烘烤清洗1—溫除水系統(tǒng)2—冷阱3—冷除水系統(tǒng)4—熱阱5—檢測器6—除熱水器吹掃(Sao)氣放空烘烤氣樣品排放GC載氣排氣123456ABC第三十頁，共六十九頁。

國外的吹掃—捕集裝置中捕集部分一般有低(Di)溫裝置（冷阱），解吸時的升溫速度也是很快的，瞬間即可達到解吸溫度，裝置的價格也是很高昂的。國內太極公司研制的TJ-618樣品處理裝置也是一種吹掃—捕集裝置，它的解吸升溫速度不是很快，但是它采用一種特殊技術來減少由于升溫過程而引起的進樣帶展寬，從而使裝置的成本大大降低，該裝置的價格僅為國外同類產品的1/3—1/2。下面給出幾種產品性能的對比。第三十一頁，共六十九頁。性能指(Zhi)標

PerkinElmer公司TEKMAR公司太極公司樣品管材料不銹鋼、玻璃、預先填充吸附劑不銹鋼、玻璃、預先填充吸附劑石英、玻璃、預先填充吸附劑通訊控制可控制啟動、停止、GC可控制啟動、停止、GC可控制啟動、停止、載氣流速、GC通訊接口RS-232RS-232RS-232/RS-422/RS-485控制軟件包有有有軟件包功能//產品質量評價功能系統(tǒng)評價測試功能最小檢測限PPbPPbPPb樣品類型氣體、液體、半固體、固體氣體、液體、半固體、固體氣體、液體、半固體、固體溫度控制50℃—400℃控制精度：1℃50℃—200℃控制精度：1℃40℃—400℃控制精度：1℃連接方式通用可與任意品牌的GC或GC/MS相聯(lián)HP專用通用可與任意品牌的GC或GC/MS相聯(lián)。第三十二頁，共六十九頁。應用

吹掃—捕集技術主要用于氣相色譜和氣相色譜—質譜分析可(Ke)揮發(fā)性化合物，特別是分析水中有機揮發(fā)性化合物。該技術已列入美國EPA方法中水中有機揮發(fā)性化合物分析的標準方法。下面給出使用太極公司TJ-618樣品前處理裝置，結合氣相色譜來鑒定真假紅塔山煙和對茶葉中農藥殘留所作的分析。第三十三頁，共六十九頁。煙草數(shù)(Shu)據(jù)（固體樣品）真紅(Hong)塔山假紅塔山第三十四頁，共六十九頁。茶葉農藥殘留檢測(Ce)數(shù)據(jù)（固體樣品）檢測器：電(Dian)子捕獲檢測器第三十五頁，共六十九頁。固相微萃取技術

在樣品處理中的應(Ying)用工作原理

在一根很細的熔融石英纖維上，涂上吸附劑，用來吸附欲測組分，使其與干擾組分和基體分離，并得到富集。被吸附劑吸附的欲測組分，可通過(Guo)加熱或洗脫液洗脫的方法解吸下來，進入分析儀器（主要是氣相色譜和液相色譜）。第三十六頁，共六十九頁。裝置

涂敷吸附劑的熔融石英纖維（稱為萃取頭）接在一根細的不銹鋼鋼絲上，外套一根細的不銹鋼管（在取樣和進樣時保護萃取頭），萃取頭在細的不銹鋼管中可自由伸縮進出。在取樣和色譜進樣時，由細的不銹鋼管穿透密封墊，然后再將萃取頭伸出。在拔出細的不銹鋼管前，將萃取頭縮進。下圖給出了(Liao)固相微萃取裝置和色譜進樣的示意圖。第三十七頁，共六十九頁。隔墊穿孔(Kong)針頭手(Shou)柄外套活塞固定螺桿Z-溝槽連接器觀察窗口可調節(jié)針頭導軌/深度標記纖維固定管敷涂層的石英纖維彈簧密封墊固相微萃取裝置示意圖第三十八頁，共六十九頁。固相微萃取的采樣和(He)進樣操作方法穿透樣品瓶密封墊暴露/提取撤回萃(Cui)取頭插入GC注入口暴露/解吸撤回萃取頭插入進樣裝置到HPLC柱撤回萃取頭第三十九頁，共六十九頁。應用

主要應用于氣相色譜和液相色譜分(Fen)析時的樣品處理，具有操作時間短，樣品量小，無需萃取溶劑，易實現(xiàn)自動化，適于分(Fen)析揮發(fā)性與非揮發(fā)性物質，重現(xiàn)性好等優(yōu)點。很多研究結果表明，在樣品中加入適當?shù)膬葮诉M行定量分(Fen)析時，其重現(xiàn)性和精密度都非常好，是近年發(fā)展很快的一種樣品處理新技術。第四十頁，共六十九頁。根據(jù)欲測組分性質和樣品情況選用不同(Tong)萃取方式熔融(Rong)石英纖維膜樣品涂層樣品涂層(a)直接萃取(b)頂空萃取(c)膜保護萃取第四十一頁，共六十九頁。根據(jù)欲測組分的(De)揮發(fā)性和極性選擇涂層種類和涂層厚度Poly(dimethylsiloxane)Poly(acrylate)PDMS/DVBCarbowax/DVBCarbowaxTR/DVB第四十二頁，共六十九頁。吸煙婦女(Nv)乳汁的固相微萃取—氣相色譜/質譜分析1.苯胺(An)2.甲基苯胺3.二甲基苯胺4.三甲基苯胺5.尼古丁時間（分）第四十三頁，共六十九頁。毛細管固相(Xiang)微萃取器

在水樣預處理中的應用

毛細管固相微萃取器是中科院大化所關亞風研究員等人研制開發(fā)的、用于水中半揮發(fā)和不揮發(fā)有機污染物分析的一種水樣預處理(Li)裝置。被分析樣品從管壁交聯(lián)固定相的中空毛細管通過，欲測組分被固定相吸附，然后再通過熱解析將欲測組分解析下來，進入GC或GC－MS，進行分析。由于通過增加固定相的涂漬厚度和毛細管的長度和內徑，可以獲得比SPME固定相體積大十倍以上的固定相體積，使萃取富集倍數(shù)大大提高。第四十四頁，共六十九頁。裝置流程(Cheng)圖1.穩(wěn)壓閥2.壓力表3.水瓶4.水罐5.四通閥6.廢水容器7.六通閥8.微型兩通接頭9.微型三(San)通接頭10.萃取毛細管柱11.過濾器12./13.穩(wěn)流閥14.GC進樣器15.毛細管預柱16.毛細管分離柱17.FID檢測器第四十五頁，共六十九頁。應(Ying)用第四十六頁，共六十九頁。第四十七頁，共六十九頁。微波技術在樣品處理中(Zhong)的應用微波灰化

用微波高溫馬弗爐進行灰化，可不經(jīng)炭化而一次完成灰化，所需灰化時間極短。與(Yu)傳統(tǒng)馬弗爐相比，升溫速度極快，能在幾分鐘內迅速程序升溫至1000℃—1500℃，灰化時間也可減少數(shù)倍至數(shù)十倍。第四十八頁，共六十九頁。微波消解

密閉式微波消解（微波高壓消解）：將放有樣品和消解液的消解罐放入微波爐內，用微波加熱，在高溫、高壓和微波的作用下，難消解的化合物很快消解，由于消解罐是密閉的，故不會有任(Ren)何元素損失。使用試劑少，消解速度快，所有時間比電熱板消解可減少數(shù)倍至數(shù)十倍，污染也大大減少。第四十九頁，共六十九頁。微波萃取

在密閉的容器里，利用微波瞬間將萃取液加熱到常壓沸點以上，在微波的作用下，加快被萃取物從樣品中溶出。微波萃取所有的溶劑僅為常規(guī)萃取的數(shù)十分之一，而萃取速度為常規(guī)萃取的數(shù)十倍，萃取效(Xiao)率也要高。下表給出了微波萃?。∕AE）與超聲波萃取和索氏提取用于某些有機氯農藥殘留分析時結果的比較。

第五十頁，共六十九頁。

微波萃取（MAE）與超聲波萃取和索氏提取法用于某些有機氯農藥殘留(Liu)分析的比較有機氯農藥超聲波萃取法索氏提取法MAE法平均回收率(%)RSD（%）平均回收率(%)RSD（%）平均回收率(%)RSD（%）艾氏劑66.25.277.93.7872.1-六六六70.26.269.24.794.4461-六六六--68.22.796.42.84,4’-DDT1085.71283.6116566狄氏劑79.34.496.42.785.93.8硫丹-168.43.969.13.386.83.1硫丹-263.35.358.28.371.96.3異狄氏劑62.16.462.92.797.41.9七氯68.65.285.06.71101.4環(huán)氯七氯60.94.969.72.995.32.7六氯苯65.75.673.67.280.81.6六氯環(huán)戊二烯44.81121.99610712第五十一頁，共六十九頁。ASE快速溶劑萃(Cui)取工作原理

ASE快速溶劑萃取是使用常規(guī)溶劑，利用提高萃取壓力和(He)萃取溫度來提高萃取效率，縮短萃取時間，節(jié)省萃取溶劑。第五十二頁，共六十九頁。工(Gong)作原理圖第五十三頁，共六十九頁。第五十四頁，共六十九頁。生(Sheng)物樣品的處理技術（方法）

生物樣品通常是指植物的花、葉、莖、根(Gen)、種子等，動物(包括人)的體液(如：尿、血、唾液及生物體的分泌液)、毛發(fā)、肌肉和一些組織器官。欲分析的組分常有植物體內的微量元素、營養(yǎng)成分、農藥殘留等等；動物體內的微量元素、藥物及代謝產物、糖類及有關化合物、脂類及長鏈脂肪酸化合物、維生素及輔酶類化合物、核苷、核苷酸及其衍生物、磷酸酯類化合物、固醇類化合物、胺、酰胺、氨基酸、多肽、蛋白及其衍生物和某些生物大分子（分子量在數(shù)千到數(shù)百萬的生物大分子）。由于生物樣品及某些欲測組分的特殊性，生物樣品的處理，除可使用上述的樣品處理常用技術外，在采樣、欲測組分的分離提取方面需采用一些特殊技術，現(xiàn)對這些特殊技術作些簡要介紹。第五十五頁，共六十九頁。采樣

生物樣品一般采自動、植物活體，采樣方法與其他樣品有所不同，一般采用注射器吸取，手術刀、剪切割等方法采集。采樣時要注意采樣時機，因為生物活體總在新陳代謝；采樣后對采集的樣品要立即加以(Yi)處理，因為生物樣品一般都有生物活性，如不立即加以(Yi)處理，欲測組分就可能發(fā)生變化。如采集血樣后要立即加抗血凝劑；采集好某些器官組織后要立即加一些防腐劑，或立即進行速凍或脫水處理。生物樣品的采集最好在無菌條件下進行。第五十六頁，共六十九頁。細胞的破碎

當生物樣品中的欲測組(Zu)分（主要是各種多肽激素、各種酶以及各種基因工程的產物如干擾素、胰島素、生長激素等等）存在于生物體細胞內及多細胞生物組(Zu)織中時，需在分析測定它們之前將細胞和組(Zu)織破碎，使這些欲測組(Zu)分充分釋放到溶液中去。不同的生物體，或同一生物體的不同組(Zu)織，其細胞破碎的難易程度不一樣，使用的方法也不完全相同。如動物胰臟、肝臟、腦組(Zu)織一般比較柔軟，用普通的勻漿器研磨即可，肌肉及心臟組(Zu)織較韌，需預先鉸碎再作成勻漿。植物肉組(Zu)織可用一般研磨方法，含纖維較多組(Zu)織則必須在搗碎器內破碎或加砂研磨。許多微生物均具有堅韌的細胞壁，常用自溶、冷熱交替、加砂研磨、超聲波和加壓處理等方法?？傊?，破碎細胞的目的就是為了破壞細胞的外殼，使細胞內含物有效地釋放出來，獲得有效的提取。第五十七頁，共六十九頁。常(Chang)用細胞破碎方法細胞的破(Po)碎方法機械的

非機械的液體剪切固體剪切脫水溶胞作用超聲波機械攪拌壓力研磨壓力空氣干燥物理的化學的酶的溶菌桿和臼Hughes壓榨機真空干燥滲透沖擊陽離子和陰離子洗滌劑酶和有關的酶噬菌體溶胞球磨機“X”

壓榨機冷凍干燥壓力釋放溶劑干燥凍結和融化抗生素抗菌素甘氨酸第五十八頁，共六十九頁。生物大分子的提取

生物大分子是指分子量在數(shù)千到數(shù)百萬的大分子。主要包括多肽、蛋白質、酶、核酸、多糖等生物大分子。它們在細胞破碎時被充分釋放出來。為了將它們制備成儀器分析的樣品就要用一定的溶劑將它們抽提出來，與細胞殘渣分離。這些生物大分子大部分可溶于水或含有少量酸、堿、鹽的水溶液。有時也加入一些有機溶劑改善欲測組分的提取效率，并(Bing)使欲測組分與其他組分分離。影響提取的因素較多，要根據(jù)經(jīng)驗，結合具體實驗條件，特別是溶劑性質、pH值、離子強度、介電常數(shù)、提取溫度等主要因素靈活加以運用，選擇最佳條件和方法，達到提取的最佳效果。第五十九頁，共六十九頁。蛋白的沉淀

在用儀器分析生物樣品中的一些小分子化合物及一些多肽類化合物時，蛋白質的存在，常常嚴重干擾分析，需要在制(Zhi)備儀器分析樣品時將這些蛋白質除去，常用的除蛋白質方法有以下一些：

1.加熱

當欲測組分熱穩(wěn)定性好時，可采用加熱的方法將一些熱變性蛋白沉淀。加熱溫度視欲測組分的熱穩(wěn)定性而定，通常可加熱到90℃。蛋白沉淀后可用離心或過濾除去，這種方法最簡單，但只能除去熱變性蛋白。第六十頁，共六十九頁。

利用不同蛋白質在高濃度的鹽溶液中，溶解度不同程度的降低來沉淀除去蛋白質。在低鹽濃度下蛋白質溶解度隨著鹽濃度升高而增加，稱為鹽溶作用。當鹽濃度不斷升高時，不同蛋白質的溶解度不同程度下降，并先后析出沉淀，稱為鹽析作用。鹽析法的優(yōu)點是對設備和條件要求低，安全，應用范圍廣泛，一般可在室溫下操作。常用的中性(Xing)鹽有硫酸銨、硫酸鎂、硫酸鈉、氯化鈉、磷酸鈉等。硫酸銨的鹽析能力強，飽和液濃度大，溶解度受溫度影響小，一般不會使蛋白質變性(Xing)。缺點是緩沖能力差，pH值常在4.5～5.5間。2.鹽(Yan)析第六十一頁，共六十九頁。3.有機溶劑沉淀

蛋白質的(De)沉淀與溶解，與溶劑的(De)介電常數(shù)有關。降低溶液的(De)介電常數(shù)，能增加蛋白質分子上不同電荷的(De)引力，使其溶解度變小，同時還破壞蛋白質的(De)水化膜而使蛋白質沉淀析出。乙醇和丙酮是最常用的(De)有機溶劑，丙酮的(De)介電常數(shù)小于乙醇，故沉淀的(De)能力較強

4.等電點沉淀

利用蛋白質在等電點時溶解度最低，用酸、堿調pH，可使蛋白沉淀析出，但這時沉淀不完全，可與有機溶劑沉淀法、鹽析法聯(lián)合使用。第六十二頁，共六十九頁。5.膜分離

膜分離技術包括超濾、反滲透析、電滲析、微孔過濾、氣體滲析和超精密過濾等。利用膜分離技術可將欲測小分子化合物和大分子的蛋白質很好分離。

6.凝膠層析

利用分子大小不同的物質在流過凝膠固定相時的保留時間(Jian)不同，大分子首先流出，小分子最后