眼科微生物診室患者接診眼科微生物診室患者接診眼科微生物診室患者接診眼科微生物診室患者接診及各檢查項(xiàng)目操作流程濮陽市第二人民醫(yī)院（市眼科醫(yī)院）查驗(yàn)科2017年2月眼科微生物診室患者接診及各檢查項(xiàng)目流程注意事項(xiàng)：1、門診進(jìn)門，接身份證或就診卡，刷卡，查察檢查項(xiàng)目及余額后，交還給患者。2、在不一樣登記本上登記患者信息：姓名，性別，年紀(jì)，檢查項(xiàng)目，眼別，開單醫(yī)生，保存。一角膜刮片患者1、流程：2、適應(yīng)癥：角膜潰瘍，及角膜外傷思疑細(xì)菌感染時(shí)。3、信息登記及準(zhǔn)備：登記一般信息后，開始給患者連續(xù)點(diǎn)0.5%丁卡因滴眼液局部麻醉。共滴眼3次。同時(shí)咨詢患者病程，病因，治療過程，聯(lián)系方式，登記身份證信息及地址，固話或手機(jī)號(hào)（2個(gè)）。時(shí)期準(zhǔn)備真菌培育基，細(xì)菌培育基（增菌肉湯），血平皿，載玻片，并一一進(jìn)行標(biāo)記。注意：標(biāo)記號(hào)碼與登記真相比較。4、取材：裂隙燈下，刮取角膜潰瘍組織，以11號(hào)尖刀片，刀刃垂直于角膜面，輕輕刮取角膜潰瘍組織。涂片：涂二個(gè)片，一個(gè)做Giemsa染色，一個(gè)做10%KOH濕片，顯微鏡下察看。5、染色:先滴加甲醇，而后加入Giemsa染液工作液，染色3-5min，自來水沖洗，烘干或晾干顯微鏡油鏡下察看。6、Giemsa工作液配置：將工作液瓶及吸管沖洗潔凈，濾過水沖刷2遍，然后以儲(chǔ)存液：水（1：10）比率配置，混淆均勻。7、10%KOH濕片載玻片滴加10%KOH溶液，用棉簽無棉花端輕輕按壓，顯微鏡暗視線10-40倍察看。8、分別培育注意事項(xiàng)：嚴(yán)格履行無菌操作規(guī)程；用無菌棉拭子（濕）擦抹潰瘍面或傷口處往返擦抹2次取材；放無菌試管內(nèi)送檢實(shí)驗(yàn)室。9、真菌分別標(biāo)本留?。汗稳〗悄兘M織，用無菌棉簽擦抹刀刃及尖部，以無菌流程放入培育管：即酒精燈火焰上輕輕燒培育管口四周，將手無接觸部分棉簽頭部放入試管，折斷棉簽，并將棉簽頭部按壓接觸培育基。10、細(xì)菌分別標(biāo)本留?。簾o菌棉簽擦抹刮后角膜潰瘍組織面，先在血平皿上擦抹接種，而后以同上相像的無菌方法將棉簽頭部放入增菌肉湯。11、觀片：察看全部已取組織，查找病原體（真菌，細(xì)菌，棘阿米巴等）12、報(bào)結(jié)果：角膜刮片鏡檢，看見真菌菌絲或許細(xì)菌，或許未見真菌菌絲和細(xì)菌13、特別注意：在觀片過程中，關(guān)于所看到的典型圖片照相保存。如真菌菌絲，細(xì)菌。每個(gè)角膜刮片患者都一定保存真菌培育和細(xì)菌培育的標(biāo)本，除非病灶很小或者極不配合的患者。14、詳細(xì)操作：①先開電腦，再開攝像機(jī)器開關(guān)。②等攝像機(jī)器綠燈不再閃耀，單擊電腦屏幕NIS-ElemBR3.0，界面打開，③單擊屏幕上方綠色＞，設(shè)定倍數(shù)x10,x20,x40,或x100，圖像調(diào)整清楚后，單擊相機(jī)標(biāo)記，保存。④文件夾選擇和登記本患者同樣的編號(hào)，可增添姓名和診療。編號(hào)一定有。二．患者培育登記信息1、角膜潰瘍患者，取材自角膜，其真菌培育+藥敏和細(xì)菌培育+藥敏，要登記患者姓名，性別，年紀(jì)，住院號(hào)，病床號(hào)，眼別，門診刮片序號(hào)，開單醫(yī)生，最好加聯(lián)系電話。取材同上。2、結(jié)膜囊細(xì)菌培育+藥敏，門診患者，要登記患者姓名，性別，年齡，眼別，臨床診療，開單醫(yī)生。3、結(jié)膜囊細(xì)菌培育+藥敏，住院患者要登記患者姓名，性別，年紀(jì)，臨床診療，眼別，開單醫(yī)生，住院號(hào)。三.結(jié)膜細(xì)胞學(xué)檢查1、適應(yīng)癥：眼睛干澀、眼結(jié)膜充血腫脹、各種結(jié)膜炎癥、眼分泌物過多時(shí)以及結(jié)膜外傷思疑細(xì)菌感染時(shí)。2、登記：姓名，性別，年紀(jì)，眼別，檢查項(xiàng)目，聯(lián)系電話，開單醫(yī)生3、取材：給患者連續(xù)點(diǎn)0.5%丁卡因滴眼液起碼2次，打開上瞼，刀刃垂直于結(jié)膜面取材，而后轉(zhuǎn)移至載玻片，甲醇固定，Giemsa染色；鏡檢以后，登記檢查結(jié)果，并出查驗(yàn)報(bào)告，報(bào)上皮細(xì)胞狀況，所見最多細(xì)胞，許多細(xì)胞，嗜酸性細(xì)胞要報(bào)，有細(xì)菌或真菌孢子要報(bào)出。4、取材注意事項(xiàng)：嚴(yán)格履行無菌操作規(guī)程；用無菌棉拭子（濕）擦抹潰瘍面或傷口處往返擦抹2次取材；放無菌試管內(nèi)送檢實(shí)驗(yàn)室。四．免疫組織化學(xué)標(biāo)本采納登記、局部麻醉和取材同結(jié)膜細(xì)胞學(xué)，轉(zhuǎn)移至載玻片后，福爾馬林固定，而后送實(shí)驗(yàn)室進(jìn)一步染色。五.淚液浸透壓檢查1、檢測(cè)：患者取坐位，囑眼球向上看，以無菌移液器槍頭輕輕放進(jìn)下結(jié)膜囊，汲取淚液?？啥啻渭橙I液，起碼6ul用來檢查。2、檢查：打開浸透壓儀開關(guān)，拉出丈量孔，將干燥濾紙片放孔正中，加入6ul淚液，推入丈量孔，關(guān)上開關(guān)，80s后讀取浸透壓值。3、結(jié)果報(bào)告：淚液浸透壓：右眼左眼參照范圍：296-318mmol/kg4、儀器校準(zhǔn)：浸透壓儀進(jìn)行校正，用290mmol/kg標(biāo)準(zhǔn)液取濾紙片于浸透壓儀丈量孔，加入290mmol/kg標(biāo)準(zhǔn)液6ul,關(guān)上機(jī)器，丈量，80s后察看數(shù)值；②按壓select，出現(xiàn)界面，不動(dòng)；③按壓ENTER鍵，出現(xiàn)290mmol/kg；④打開開關(guān)，沖洗丈量孔，持續(xù)放入濾紙片，進(jìn)入下一個(gè)丈量；⑤校正4-5次，直至數(shù)值在290mmol/kg鄰近顛簸。六.淚液蕨樣變?cè)囼?yàn)1、汲取淚液，操作同淚液浸透壓。2、取少許淚液，1-3ul滴至載玻片上，干燥后顯微鏡下察看，物鏡10-20倍察看。3、結(jié)果報(bào)告結(jié)晶樣的分枝蕨樣表現(xiàn)分為4級(jí)：級(jí)為較大，一致密切的連續(xù)樹枝狀散布；級(jí)為稀小，稀少分別的樹枝狀散布；級(jí)很罕有樹枝狀散布，同時(shí)伴有大批空泡；級(jí)則完整喪失蕨樣表現(xiàn)，只有成簇的黏液。一般以為1、2級(jí)為正常淚液結(jié)晶表現(xiàn)，3、4級(jí)為淚液異樣。七.淚液溶菌酶檢查汲取淚液，操作同淚液浸透壓，起碼汲取8ul，以12ul為佳在微球菌平皿中先擱置2-3個(gè)無菌濾紙片，每個(gè)濾紙片滴加淚液4ul，35℃擱置24h，丈量抑菌環(huán)直徑，取均勻數(shù)值后套入標(biāo)準(zhǔn)公式，計(jì)算淚液溶菌酶（mg/ml）標(biāo)準(zhǔn)范圍4-10mg/ml。注意：在制作溶菌酶培育皿時(shí)，每批均需制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。將標(biāo)準(zhǔn)品配置多個(gè)濃度，每個(gè)濃度需測(cè)3個(gè)值，即滴加3個(gè)紙片，每片加標(biāo)準(zhǔn)液4ul，丈量抑菌環(huán)直徑，制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。八.瞼緣螨蟲檢查1、患者坐于裂隙燈顯微鏡前，前額下額貼緊頭托，雙目微閉。2、以無菌睫毛鑷選用睫毛根部油膩，鱗屑，病變睫毛，帶根拔出，擱置于載玻片，記著眼別（一般右眼近磨砂端），每個(gè)眼拔睫毛6-8根。3、滴加甘油，加蓋玻片，顯微鏡10-20倍察看，并數(shù)螨蟲數(shù)目。4、報(bào)告時(shí)報(bào)左右眼各有毛囊蠕形螨或皮脂蠕形螨數(shù)目。九.結(jié)膜印跡細(xì)胞學(xué)取材1、患者取坐位，登記一般信息2、0.5%丁卡因局部麻醉，5分鐘內(nèi)連續(xù)滴眼3次3、無菌濾紙條吸干結(jié)膜囊淚液4、分別取滅菌、干燥的6mm硝酸纖維素濾膜放下瞼結(jié)膜中央、顳側(cè)球結(jié)膜距角膜緣2mm處，以玻棒平頭按壓濾膜10s，拿出放有孔蠟片盒內(nèi)，快速放福爾馬林固定。并做好左、右眼標(biāo)記。5、送實(shí)驗(yàn)室PAS染色。十.實(shí)驗(yàn)用過物件辦理不論是真