根系活力的測(cè)定(TTC法)

植物生理生化教研室曾漢來(lái)

2012.03.12一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康睦斫庵参锔祷盍Φ膬?nèi)涵掌握TTC法測(cè)根系活力的原理與方法H2O無(wú)機(jī)鹽提供合成所需能量;合成氨基酸和植物激素（ABA、CTK、GA等）根的生長(zhǎng)情況和活力水平直接影響地上部的生長(zhǎng)測(cè)定根系活力，為植物生長(zhǎng)狀況、營(yíng)養(yǎng)供應(yīng)研究提供依據(jù)。二、實(shí)驗(yàn)原理氯化三苯基四氮唑（TTC）的標(biāo)準(zhǔn)氧化電位為80mV的氧化還原物質(zhì)，獲得H的能力強(qiáng)。溶于水為無(wú)色溶液，還原后即生成紅色而不溶于水的三苯基甲腙（TTF）。生成的TTF比較穩(wěn)定，不會(huì)被空氣中的氧自動(dòng)氧化，可用分光光度法定量測(cè)定?！猅TCTTF根系活力脫氫酶活性丙二酸碘乙酸琥珀酸延胡索酸蘋(píng)果酸促進(jìn)抑制（無(wú)色，溶于水）（紅色，不溶于水）三、實(shí)驗(yàn)材料水培或砂培小麥、玉米等植物根系。四、實(shí)驗(yàn)步驟—制作TTC標(biāo)準(zhǔn)曲線吸取不同量的TTC加入10mL容量瓶Na2S2O4TTC全部還原乙酸乙酯乙酸乙酯定容0.25mL0.50mL1.00mL1.50mL2.00mLTTC含量（μg）2550100150200乙酸乙酯作參比，測(cè)定485nm下光密度值，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線四、實(shí)驗(yàn)步驟—測(cè)定根系活力0.2-0.3g根尖樣品(2-3cm長(zhǎng))0.4％TTC、磷酸緩沖液各5ml

根充分浸沒(méi)于溶液中37℃下暗保溫40-60min加入1mol/L硫酸2ml取出根吸干水分與3～4ml乙酸乙酯在研缽內(nèi)磨碎紅色提取液移入試管且用乙酸乙酯定容到10ml空白試驗(yàn)作參比測(cè)485nm下吸光度空白實(shí)驗(yàn)：根樣品先加硫酸，其他操作相同。查標(biāo)準(zhǔn)曲線，TTC還原量(mg)五、實(shí)驗(yàn)結(jié)果＝TTC還原能力（mg/g(根鮮重)/h）四氮唑還原量（mg）[根重（g）×?xí)r間(h)]六、思考題1.植物的根系活力與地上部分的關(guān)系?2.本實(shí)驗(yàn)中為什么要用磷酸緩沖液和37℃處理？3.測(cè)定根系活力時(shí)最好選擇根的哪個(gè)部位？為什么？4.本實(shí)驗(yàn)的根系活力指標(biāo)的實(shí)質(zhì)是什么？5.對(duì)TTC的特性及顯色反應(yīng)原理要清楚。環(huán)境因素對(duì)光合作用的影響

植物生理生化教研室曾漢來(lái)

2012.03.12實(shí)驗(yàn)?zāi)康挠^察體驗(yàn)光照強(qiáng)度、溫度和二氧化碳濃度對(duì)光合作用強(qiáng)度（速率）的影響。實(shí)驗(yàn)原理多種酶參與上表皮下表皮植物本身：光合器官發(fā)育狀況、發(fā)育時(shí)期外因：光照強(qiáng)度、光質(zhì)等CO2濃度溫度水影響光合作用的因素礦質(zhì)元素病蟲(chóng)、污染等實(shí)驗(yàn)原理植物光合作用強(qiáng)度受光強(qiáng)、二氧化碳濃度、溫度等環(huán)境條件的影響；以植物葉片為材料時(shí)利用減壓滲入法排除細(xì)胞間隙空氣，充以水分，可使葉片沉于水中；光合作用放出氧氣，O2在水中溶解度很小，而在細(xì)胞間和葉表面積累，結(jié)果使原來(lái)下沉的葉片上浮，根據(jù)上浮時(shí)間長(zhǎng)短即能比較光合作用強(qiáng)弱。實(shí)驗(yàn)材料和試劑材料:小白菜健壯、葉齡相同的新鮮成熟葉片無(wú)CO2水：冷開(kāi)水（少CO2）飽和CO2水：0.5%NaHCO3水制備二氧化碳飽和水還可以這樣作：實(shí)驗(yàn)步驟1.選取健壯、葉齡相同的新鮮成熟葉片,用直徑為1cm的打孔器(避開(kāi)葉脈)打下小圓片50片。置于注射器中,加水減壓，至圓片全部下沉為止,在燒杯中用水進(jìn)行檢查，選下沉葉圓片放在暗處備用。？減壓減壓取理效果2.取4只錐形瓶編號(hào),其中1號(hào)加40ml冷開(kāi)水,2、3、4號(hào)加入40mlNaHCO3水。各放入10個(gè)葉圓片（快速！）。按如下處理：

瓶號(hào)

光照

溫度

二氧化碳

放置位置1

強(qiáng)

室溫-

燈光下2

弱

室溫+

室內(nèi)避光3

強(qiáng)

低溫+

燈光下冰盤中4

強(qiáng)

室溫+

燈光下實(shí)驗(yàn)結(jié)果小圓片開(kāi)始上浮結(jié)果記錄：

4號(hào)瓶中小圓片全部上浮時(shí)（約