能力驗(yàn)收評(píng)價(jià)（三十六）微生物的培養(yǎng)技術(shù)及應(yīng)用（共3頁(yè)）一、選擇題1．下列有關(guān)微生物營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的敘述，正確的是()A．是碳源的物質(zhì)不可能同時(shí)是氮源B．微生物的培養(yǎng)都需要提供碳源、氮源、水、無(wú)機(jī)鹽，缺一不可C．蛋白胨來(lái)源于植物，營(yíng)養(yǎng)全面D．液體培養(yǎng)基有利于營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收，可用于微生物的擴(kuò)增培養(yǎng)解析：選D是碳源的物質(zhì)同時(shí)也可以是氮源，如牛肉膏和蛋白胨均可作為碳源和氮源，同時(shí)還提供維生素，A錯(cuò)誤；并非所有微生物的培養(yǎng)基中都必須含有碳源、氮源，自養(yǎng)的微生物不需要碳源，固氮微生物不需要氮源，B錯(cuò)誤；蛋白胨來(lái)源于動(dòng)物，含有糖、維生素和有機(jī)氮等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，C錯(cuò)誤；液體培養(yǎng)基中不加任何凝固劑，這種培養(yǎng)基的成分均勻，微生物能充分接觸和利用培養(yǎng)基中的養(yǎng)料，利于微生物擴(kuò)增培養(yǎng)，D正確。2．下列有關(guān)制備培養(yǎng)基和倒平板的具體描述，正確的是()①待培養(yǎng)基冷卻至40℃左右時(shí)，在酒精燈火焰附近倒平板②將滅過(guò)菌的培養(yǎng)皿蓋放在桌面上，左手拔出棉塞③右手拿錐形瓶，使瓶口迅速通過(guò)火焰④用左手的拇指和食指完全打開(kāi)皿蓋⑤右手將錐形瓶中培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿，左手立即蓋上培養(yǎng)皿的皿蓋⑥等待平板冷卻5～10s，將平板倒過(guò)來(lái)放置，使皿蓋在下，皿底在上A．①③④⑤ B．④⑤⑥C．①②④⑥ D．③⑤解析：選D待培養(yǎng)基冷卻至50℃左右時(shí)，在酒精燈火焰附近倒平板，防止雜菌污染，①錯(cuò)誤；不能將滅過(guò)菌的培養(yǎng)皿蓋放在桌面上，因?yàn)樽烂嫔峡赡苡须s菌，②錯(cuò)誤；右手拿錐形瓶，使瓶口迅速通過(guò)火焰，高溫可防止雜菌污染，③正確；倒平板時(shí)培養(yǎng)皿只需要打開(kāi)一條稍大于瓶口的縫隙，④錯(cuò)誤；右手將錐形瓶中培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿，左手立即蓋上皿蓋，⑤正確；等待平板冷卻5～10min，待培養(yǎng)基冷卻凝固后，將平板倒過(guò)來(lái)放置，使皿蓋在下，皿底在上，⑥錯(cuò)誤。3．在微生物培養(yǎng)和現(xiàn)代生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中的許多方面都要進(jìn)行無(wú)菌操作，防止雜菌污染。下列操作錯(cuò)誤的是()①煮沸消毒可以殺死微生物的營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞和部分芽孢②接種操作要在酒精燈火焰附近進(jìn)行③無(wú)菌繁殖脫毒苗時(shí)，植物的外植體要進(jìn)行消毒④家庭制作葡萄酒時(shí)要將容器和葡萄進(jìn)行滅菌⑤培養(yǎng)基要進(jìn)行濕熱滅菌⑥加入培養(yǎng)基中的指示劑和染料不需要滅菌A．①③B．②④C．③⑤D．④⑥解析：選D無(wú)菌操作包括消毒和滅菌。需進(jìn)行消毒處理的有植物的外植體、操作的空間、操作者的衣著和手等；需進(jìn)行滅菌的有用于微生物培養(yǎng)的器皿、接種工具、培養(yǎng)基、添加劑(指示劑或染料)等。家庭制作葡萄酒時(shí)所利用的微生物是葡萄表面的酵母菌，故不能滅菌。4．下列有關(guān)土壤中尿素分解菌的分離和培養(yǎng)的敘述，正確的是()A．培養(yǎng)基中加入尿素作為唯一碳源，該培養(yǎng)基是鑒別培養(yǎng)基B．測(cè)定土壤中分解尿素的細(xì)菌數(shù)量和測(cè)定土壤中放線菌的數(shù)量可采用相同的稀釋度C．細(xì)菌合成的脲酶能將尿素分解成氨，氨會(huì)使培養(yǎng)基的堿性增強(qiáng)，pH升高D．利用稀釋涂布平板法可以直接完成土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離計(jì)數(shù)和純化鑒定解析：選C培養(yǎng)基中加入尿素作為唯一氮源，該培養(yǎng)基是選擇培養(yǎng)基，A錯(cuò)誤；因?yàn)橥寥乐懈黝?lèi)微生物的數(shù)量不同，故為獲得不同類(lèi)型的微生物，要按不同的稀釋倍數(shù)進(jìn)行分離，B錯(cuò)誤；細(xì)菌合成的脲酶能將尿素分解成氨，氨會(huì)使培養(yǎng)基的堿性增強(qiáng)，pH升高，可加入酚紅指示劑進(jìn)行檢測(cè)，C正確；只用稀釋涂布平板法不能鑒定分解尿素的細(xì)菌，鑒定分解尿素的細(xì)菌應(yīng)該用加酚紅的鑒別培養(yǎng)基，D錯(cuò)誤。5．下列關(guān)于“檢測(cè)土壤中某種微生物總數(shù)”實(shí)驗(yàn)操作的敘述，錯(cuò)誤的是()A．一般選擇距地表約3～8cm的土壤層進(jìn)行取樣B．不同微生物均可取104、105、106倍的土壤稀釋液進(jìn)行接種操作C．將實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組平板倒置，一般在適宜且恒溫條件下培養(yǎng)1～2dD．確定對(duì)照組無(wú)菌后，選擇菌落數(shù)在30～300之間的實(shí)驗(yàn)組平板進(jìn)行計(jì)數(shù)解析：選B絕大多數(shù)細(xì)菌分布在距地表3～8cm的土壤層，所以土壤取樣時(shí)應(yīng)選取距地表約3～8cm的土壤層，A正確；不同微生物在土壤中的含量不同，計(jì)數(shù)時(shí)，所選用的土壤稀釋度也不同，B錯(cuò)誤；將實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組平板倒置，一般在適宜且恒溫條件下培養(yǎng)1～2d，使培養(yǎng)基上的菌落數(shù)穩(wěn)定，避免計(jì)數(shù)時(shí)遺漏，使數(shù)據(jù)更準(zhǔn)確，C正確；確定對(duì)照組無(wú)菌后，為了保證結(jié)果準(zhǔn)確，一般選擇菌落數(shù)在30～300之間的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)，D正確。6．(2022·棗莊模擬)篩選是分離和培養(yǎng)微生物新類(lèi)型常用的手段。下列有關(guān)技術(shù)中不能篩選成功的是()A．在全營(yíng)養(yǎng)的LB培養(yǎng)基(普通培養(yǎng)基)中，篩選大腸桿菌B．在尿素固體培養(yǎng)基中，篩選能夠分解尿素的微生物C．用纖維素為唯一碳源的培養(yǎng)基，篩選能分解纖維素的微生物D．在培養(yǎng)基中加入不同濃度的氯化鈉，篩選抗鹽突變體的微生物解析：選A在全營(yíng)養(yǎng)的LB培養(yǎng)基中，幾乎所有細(xì)菌都能生長(zhǎng)，不能篩選出大腸桿菌；在尿素固體培養(yǎng)基中，只有能分解尿素的微生物才能生長(zhǎng)，不能分解尿素的微生物因缺乏氮源不能生長(zhǎng)，能夠篩選分解尿素的微生物；在纖維素為唯一碳源的培養(yǎng)基上，只有能分解纖維素的微生物才能生長(zhǎng)，不能分解纖維素的微生物因缺乏碳源不能生長(zhǎng)，能篩選分解纖維素的微生物；在培養(yǎng)基中加入不同濃度的氯化鈉，能篩選抗鹽突變體微生物。7．下表是某同學(xué)配制的一種培養(yǎng)基的配方。下列有關(guān)敘述正確的是()成分蛋白胨乳糖K2HPO4伊紅亞甲藍(lán)瓊脂含量/g10.05.02.00.40.06512.0將上述物質(zhì)溶解后，用蒸餾水定容到1000mLA.若根據(jù)用途劃分，該培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基B．若用該培養(yǎng)基篩選土壤中的尿素分解菌，應(yīng)將蛋白胨改成尿素C．在該培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的大腸桿菌，其菌落顏色呈紅色D．該培養(yǎng)基中含有維生素，若培養(yǎng)霉菌需將pH調(diào)至堿性解析：選B從用途看此培養(yǎng)基屬于鑒別培養(yǎng)基，伊紅和亞甲藍(lán)可用來(lái)鑒別大腸桿菌，A錯(cuò)誤；用該培養(yǎng)基篩選土壤中的尿素分解菌，需要將蛋白胨去掉，用尿素作為唯一的氮源，B正確；在該培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的大腸桿菌，其菌落顏色為具有金屬光澤的深紫色，C錯(cuò)誤；該培養(yǎng)基中的蛋白胨含有維生素，若培養(yǎng)霉菌需將pH調(diào)至酸性，D錯(cuò)誤。8．(2022·濟(jì)南模擬)幽門(mén)螺桿菌(Hp)感染是急慢性胃炎和消化性潰瘍的主要致病因素。在患者體內(nèi)采集樣本并制成菌液后，進(jìn)行分離培養(yǎng)，實(shí)驗(yàn)基本步驟如下。下列敘述錯(cuò)誤的是()eq\x(\a\al(配制,培養(yǎng)基))→eq\x(\a\al(滅菌、,倒平板))→eq\x(X)→eq\x(培養(yǎng))→eq\x(觀察)A．在培養(yǎng)時(shí)，需將培養(yǎng)皿倒置，若不倒置培養(yǎng)，將導(dǎo)致無(wú)法形成單菌落B．在配制培養(yǎng)基時(shí)，要加入尿素和酚紅指示劑，這是因?yàn)镠p含有脲酶，它能以尿素作為氮源；若有Hp，則菌落變黑C．臨床上用14C呼氣試驗(yàn)檢測(cè)人體是否感染Hp，其基本原理是Hp能將14C標(biāo)記的尿素分解為NH3和14CO2D．步驟X表示接種，在無(wú)菌條件下操作時(shí)，先將菌液稀釋，然后將菌液涂布到培養(yǎng)基平面上，菌液稀釋的目的是獲得單菌落解析：選B在培養(yǎng)時(shí)，需將培養(yǎng)皿倒置并放在恒溫培養(yǎng)箱中，若不倒置培養(yǎng)，將導(dǎo)致無(wú)法形成單菌落，A正確；在配制培養(yǎng)基時(shí)，要加入尿素和酚紅指示劑，這是因?yàn)镠p可產(chǎn)生脲酶，它能以尿素作為氮源，若有Hp存在會(huì)分解尿素，培養(yǎng)基pH會(huì)升高，酚紅指示劑將變紅，B錯(cuò)誤；臨床上用14C呼氣試驗(yàn)檢測(cè)人體是否感染Hp，幽門(mén)螺桿菌可產(chǎn)生脲酶，能分解尿素為菌體提供氮源，故Hp能將14C標(biāo)記的尿素分解為NH3和14CO2，C正確；步驟X表示接種，在無(wú)菌條件下操作時(shí)，先將菌液稀釋，然后將菌液涂布到培養(yǎng)基平面上，菌液稀釋的目的是獲得單菌落，D正確。9．在微生物培養(yǎng)過(guò)程中，由單一個(gè)體繁殖所獲得的微生物群體稱為純培養(yǎng)物。平板劃線法和稀釋涂布平板法是常用的獲取純培養(yǎng)物的方法。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是()A．兩種純化方法的核心都是要防止雜菌污染，保證培養(yǎng)物的純度B．用稀釋涂布平板法進(jìn)行微生物計(jì)數(shù)時(shí)，所得數(shù)據(jù)往往比實(shí)際值偏小C．獲取純培養(yǎng)物的過(guò)程中，應(yīng)根據(jù)微生物的種類(lèi)調(diào)整培養(yǎng)基的pHD．對(duì)10mL土樣樣液稀釋106倍后，取0.1mL稀釋液涂布，測(cè)得的菌落數(shù)分別為218、266、305，則該10mL土樣中目的菌數(shù)為2.63×1010個(gè)解析：選D獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止外來(lái)雜菌的入侵，因此兩種純化方法的核心都是要防止雜菌污染，保證培養(yǎng)物的純度，A正確；因?yàn)楫?dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落，因此用稀釋涂布平板法進(jìn)行微生物的計(jì)數(shù)時(shí)，所得數(shù)據(jù)往往比實(shí)際數(shù)據(jù)偏小，B正確；因?yàn)椴煌奈⑸锼璧淖钸mpH條件不同，因此，在獲取純培養(yǎng)物的過(guò)程中，應(yīng)根據(jù)微生物的種類(lèi)調(diào)整培養(yǎng)基的pH，C正確；用稀釋涂布平板法統(tǒng)計(jì)微生物的數(shù)量時(shí)，一般選擇菌落數(shù)在30～300的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)，D錯(cuò)誤。10.生長(zhǎng)圖形法是一種測(cè)定微生物營(yíng)養(yǎng)需求的簡(jiǎn)便方法。為探究某嗜熱菌所需生長(zhǎng)因子的種類(lèi)，研究小組將該菌的懸浮液在不含任何生長(zhǎng)因子但含有其他必需營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的平板培養(yǎng)基上涂布均勻，然后在平板上劃分?jǐn)?shù)區(qū)，將甲、乙、丙三種生長(zhǎng)因子分別添加到不同區(qū)域，培養(yǎng)結(jié)果如圖所示。下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是()A．倒平板后不接種，直接培養(yǎng)可判斷培養(yǎng)基是否被污染B．倒平板后需要進(jìn)行滅菌處理C．圖示結(jié)果表明該菌需要生長(zhǎng)因子乙和丙D．生長(zhǎng)圖形法還可用于某些菌種的篩選解析：選B可通過(guò)培養(yǎng)空白培養(yǎng)基判斷培養(yǎng)基是否被污染，A正確。應(yīng)該先將培養(yǎng)基滅菌再倒平板，B錯(cuò)誤。圖中菌落生活在乙、丙區(qū)域之間，說(shuō)明需要生長(zhǎng)因子乙和丙，C正確。不同菌種所需生長(zhǎng)因子不同，可利用生長(zhǎng)圖形法篩選某些菌種，D正確。11．(2022·天津一模)為了分離和純化高效分解石油的細(xì)菌，科研人員用被石油污染過(guò)的土壤進(jìn)行如圖A所示的實(shí)驗(yàn)。同學(xué)甲進(jìn)行過(guò)程④的操作，其中一個(gè)平板經(jīng)培養(yǎng)后的菌落分布如圖B所示。下列敘述錯(cuò)誤的是()A．步驟③與步驟②中培養(yǎng)基成分的最大區(qū)別是步驟③的培養(yǎng)基中石油是唯一碳源B．步驟⑤振蕩培養(yǎng)的目的是提高培養(yǎng)液溶氧量，同時(shí)使菌體與培養(yǎng)液充分接觸C．圖B培養(yǎng)基的結(jié)果可能是由于涂布不均勻造成的D．步驟⑤后取樣測(cè)定石油含量的目的是篩選出能分解石油的細(xì)菌解析：選D該實(shí)驗(yàn)的目的是分離和純化高效分解石油的細(xì)菌，因此步驟③與步驟②中培養(yǎng)基成分相比，最大的區(qū)別是步驟③的培養(yǎng)基中石油是唯一碳源，A正確；步驟⑤需要振蕩培養(yǎng)，原因是提高培養(yǎng)液中(溶解)氧的含量，通過(guò)振蕩可使菌體與培養(yǎng)液充分接觸，提高營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的利用率，B正確；圖B采用的接種方法是稀釋涂布平板法，出現(xiàn)圖B結(jié)果(菌落分布不均勻)可能的操作失誤是涂布不均勻，C正確；步驟⑤后取樣測(cè)定石油含量的目的是篩選出分解石油能力最強(qiáng)的細(xì)菌，D錯(cuò)誤。12．(多選)飼養(yǎng)動(dòng)物常用的植物飼料中含有難溶的植酸鈣等物質(zhì)，若在飼料中添加植酸酶，則能催化其水解為可以吸收利用的磷酸鹽等。如圖是從作物根部土壤中分離產(chǎn)植酸酶的菌株的過(guò)程，圖中①～⑤表示操作過(guò)程。下列說(shuō)法正確的是()A．通過(guò)圖中①～④逐漸稀釋，目的是獲得單個(gè)菌落B．圖中培養(yǎng)基從功能上講屬于選擇培養(yǎng)基C．高壓蒸汽滅菌鍋滅菌的要求是100℃D．實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示產(chǎn)植酸酶的理想菌株是A菌株解析：選AB分析題圖可知，①～④過(guò)程是梯度稀釋過(guò)程，目的是對(duì)菌液進(jìn)行稀釋，涂布后在平板上可獲得單個(gè)細(xì)菌繁殖而來(lái)的菌落，A正確；由題意可知，該實(shí)驗(yàn)的目的是從作物根部土壤中分離產(chǎn)植酸酶的菌株，因此圖中的培養(yǎng)基應(yīng)該是選擇培養(yǎng)基，B正確；高壓蒸汽滅菌鍋滅菌的要求是壓力為100kPa，溫度為121℃的條件下，維持15～30min，C錯(cuò)誤；實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，E的透明圈最大，因此產(chǎn)植酸酶的理想菌株是E菌株，D錯(cuò)誤。13．(多選)硝化細(xì)菌是化能自養(yǎng)菌，通過(guò)NHeq\o\al(＋,4)→NOeq\o\al(－,2)→NOeq\o\al(－,3)的氧化過(guò)程獲取菌體生長(zhǎng)繁殖所需的能量，在水產(chǎn)養(yǎng)殖中具有重要作用，下表是分離硝化細(xì)菌的培養(yǎng)基配方。下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是()組分含量組分含量(NH4)2SO40.5gNaH2PO40.25gNaCl0.3gNa2CO31gFeSO40.03g瓊脂15gMgSO40.03gH2O定容至1000mLK2HPO40.75g——A.(NH4)2SO4只能作為硝化細(xì)菌的氮源B．培養(yǎng)基中的Na2CO3是硝化細(xì)菌的主要碳源C．K2HPO4和NaH2PO4能維持培養(yǎng)基的pHD．硝化細(xì)菌能清除水體中的銨態(tài)氮及亞硝態(tài)氮解析：選AB由題干信息可知，硝化細(xì)菌通過(guò)NHeq\o\al(＋,4)→NOeq\o\al(－,2)→NOeq\o\al(－,3)的氧化過(guò)程獲取能量，故通過(guò)分析培養(yǎng)基成分可知(NH4)2SO4可作為硝化細(xì)菌的氮源和能源，A錯(cuò)誤；硝化細(xì)菌為自養(yǎng)型生物，以培養(yǎng)基中的NHeq\o\al(＋,4)為氮源和能源，將CO2和水合成糖類(lèi)，故硝化細(xì)菌的主要碳源是CO2，B錯(cuò)誤；分析培養(yǎng)基成分，其中K2HPO4和NaH2PO4可維持培養(yǎng)基的pH，C正確；硝化細(xì)菌能將NHeq\o\al(＋,4)氧化成NOeq\o\al(－,2)，進(jìn)而將NOeq\o\al(－,2)氧化成NOeq\o\al(－,3)，故可用硝化細(xì)菌清除水體中的銨態(tài)氮及亞硝態(tài)氮，D正確。14．(多選)生物興趣小組的三位同學(xué)吃冰激凌后有兩人嚴(yán)重腹瀉，他們懷疑冰激凌中大腸桿菌超標(biāo)。于是他們?cè)O(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)對(duì)此冰激凌進(jìn)行檢測(cè)。下列實(shí)驗(yàn)操作不合理的是()A．再去小店買(mǎi)一個(gè)同樣品牌的同種冰激凌，然后配制伊紅—亞甲藍(lán)培養(yǎng)基(該培養(yǎng)基可用來(lái)鑒別大腸桿菌)，滅菌、倒平板B．取10mL剛?cè)诨谋ち枳鳛樵哼M(jìn)行梯度稀釋、稀釋倍數(shù)為1×10～1×105C．取各個(gè)稀釋濃度的冰激凌液各0.1mL，用涂布平板法進(jìn)行接種，每個(gè)濃度涂3個(gè)平板，共培養(yǎng)18個(gè)平板，在適宜溫度下培養(yǎng)48hD．統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目，以菌落數(shù)代表大腸桿菌數(shù)會(huì)導(dǎo)致統(tǒng)計(jì)結(jié)果比實(shí)際值偏小解析：選ABC正確的做法是再去小店隨機(jī)買(mǎi)多個(gè)同樣品牌的同種冰激凌，A錯(cuò)誤；測(cè)定細(xì)菌的數(shù)量，一般選用104、105、106倍的稀釋液進(jìn)行培養(yǎng)，B錯(cuò)誤；實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置對(duì)照，取各個(gè)稀釋濃度的冰激凌液各0.1mL，用涂布平板法進(jìn)行接種，每個(gè)濃度涂3個(gè)平板，再取一個(gè)平板接種等量無(wú)菌水(作為對(duì)照)，共培養(yǎng)19個(gè)平板，在適宜溫度下培養(yǎng)48h，當(dāng)對(duì)照組無(wú)菌落生長(zhǎng)時(shí)，選擇菌落數(shù)在30～300的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)，C錯(cuò)誤；因?yàn)楫?dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落，故以菌落數(shù)代表大腸桿菌數(shù)會(huì)導(dǎo)致統(tǒng)計(jì)結(jié)果比實(shí)際值偏小，D正確。二、非選擇題15．硅酸鹽細(xì)菌是一種耐堿、能分解原始巖石礦物的芽孢桿菌，該菌株的菌落具有透明、隆起、粘性強(qiáng)等特征。下表為硅酸鹽細(xì)菌的培養(yǎng)基配方。成分蔗糖Na2HPO4MgSO4·7H2OFeCl3CaCO3土壤礦物瓊脂含量/g520.50.0050.1120(1)該培養(yǎng)基從物理性質(zhì)劃分屬于________培養(yǎng)基，通過(guò)該培養(yǎng)基成分可知：硅酸鹽細(xì)菌具有________能力。(2)探究硅酸鹽細(xì)菌生長(zhǎng)的pH范圍和最適pH時(shí)，該培基中不需要添加________，倒平板前需用____________制備不同pH的平板，以pH＝7.0的平板作為對(duì)照，接種后置于28～30℃環(huán)境中培養(yǎng)，觀察記錄其生長(zhǎng)情況。(3)分離和純化硅酸鹽細(xì)菌時(shí)，由于該細(xì)菌在土壤中含量比較高，配制土壤懸浮液需進(jìn)行__________。為避免偶然因素的影響，還需________________。將處理過(guò)的菌液接種到培養(yǎng)基上培養(yǎng)一段時(shí)間后。可挑選________________的菌落進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)。解析：(1)由于該培養(yǎng)基中含有瓊脂，因此該培養(yǎng)基從物理性質(zhì)劃分屬于固體培養(yǎng)基，通過(guò)該培養(yǎng)基成分可知：培養(yǎng)基成分中沒(méi)有氮源，因此硅酸鹽細(xì)菌具有固氮能力。(2)根據(jù)題意可知，探究硅酸鹽細(xì)菌生長(zhǎng)的pH范圍和最適pH時(shí)，該培養(yǎng)基中不需要添加CaCO3，因?yàn)镃aCO3會(huì)影響培養(yǎng)基的pH。倒平板前需用滅菌的HCl或NaOH制備不同pH的平板，以pH＝7.0的平板作為對(duì)照，接種后置于28～30℃環(huán)境中培養(yǎng)，觀察記錄其生長(zhǎng)情況。(3)根據(jù)題意可知，分離和純化硅酸鹽細(xì)菌時(shí)，由于該細(xì)菌在土壤中含量比較高，配制土壤懸浮液需進(jìn)行一系列梯度稀釋。為避免偶然因素的影響，還需每個(gè)稀釋度設(shè)三個(gè)重復(fù)(或設(shè)置重復(fù)組)。將處理過(guò)的菌液接種到培養(yǎng)基上培養(yǎng)一段時(shí)間后，可挑選透明、隆起、粘性強(qiáng)的菌落進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)。答案：(1)固體固氮(2)CaCO3滅菌的HCl或NaOH(3)一系列梯度稀釋每個(gè)稀釋度設(shè)三個(gè)重復(fù)(或設(shè)置重復(fù)組)透明、隆起、粘性強(qiáng)16．某生物興趣小組，進(jìn)行土壤中尿素分解菌的分離和計(jì)數(shù)實(shí)驗(yàn)。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：(1)實(shí)驗(yàn)原理：尿素是一種重要的農(nóng)業(yè)氮肥，并不能直接被農(nóng)作物吸收，需要轉(zhuǎn)變成氨，才能被吸收，這個(gè)轉(zhuǎn)變依賴于土壤中能產(chǎn)生__________的微生物的作用。(2)實(shí)驗(yàn)步驟及結(jié)果分析：Ⅰ.配制培養(yǎng)基(成分：葡萄糖、Na2HPO4、KH2PO4、MgSO4·7H2O、尿素、Y、H2O、瓊脂)，并制作無(wú)菌平板；Ⅱ.設(shè)置__________組和若干實(shí)驗(yàn)組，進(jìn)行相關(guān)操作；Ⅲ.將各組平板置于恒溫箱中培養(yǎng)一段時(shí)間，統(tǒng)計(jì)各組平板上菌落的平均數(shù)。①為了更好地鑒別出此類(lèi)微生物，在培養(yǎng)基配方中加入了Y，Y是__________。②為了對(duì)實(shí)驗(yàn)的結(jié)果進(jìn)行進(jìn)一步統(tǒng)計(jì)，需要用________法進(jìn)行接種。具體情況如圖：③恒溫培養(yǎng)48小時(shí)后，在稀釋倍數(shù)為105下，平板上的菌落數(shù)目在30～300之間，小組成員進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，應(yīng)注意統(tǒng)計(jì)周?chē)鸀開(kāi)_________菌落進(jìn)行計(jì)數(shù)。統(tǒng)計(jì)三個(gè)平板的菌落數(shù)目，分別為68、73、87，則錐形瓶中每毫升稀釋液中，尿素分解菌的活菌數(shù)為_(kāi)_________個(gè)。Ⅳ.實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析：興趣小組的同學(xué)在統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目時(shí)，除了上述統(tǒng)計(jì)的菌落外，還發(fā)現(xiàn)有些菌落周?chē)呐囵B(yǎng)基沒(méi)有變化，試分析這些菌落產(chǎn)生的可能原因：______________________________________________________________________________________________(答出一點(diǎn)即可)。解析：(1)尿素分解菌能產(chǎn)生脲酶將尿素分解成氨，因此由尿素轉(zhuǎn)變成氨的過(guò)程依賴于土壤中能產(chǎn)生脲酶的微生物的作用。(2)Ⅱ.為檢驗(yàn)培養(yǎng)基是否受到雜菌污染，需要設(shè)置空白對(duì)照組。Ⅲ.①細(xì)菌合成的脲酶將尿素分解成氨，氨會(huì)使培養(yǎng)基的堿性增強(qiáng)，pH升高，因此可以通過(guò)檢查培養(yǎng)基的pH變化來(lái)鑒別尿素分解菌的存在，在培養(yǎng)基配方中加入的Y可以是酚紅指示劑。②分析圖示實(shí)驗(yàn)過(guò)程可知，該實(shí)驗(yàn)采用了稀釋涂布平板法進(jìn)行接種，用于計(jì)數(shù)土壤稀釋液中尿素分解菌的數(shù)量。③當(dāng)尿素分解菌產(chǎn)生的脲酶將尿素分解為氨后，使pH升高，酚紅指示劑會(huì)變紅，因此應(yīng)注意統(tǒng)計(jì)周?chē)鸀榧t色的菌落進(jìn)行計(jì)數(shù)。在稀釋倍數(shù)為105下，三個(gè)平板的菌落數(shù)目分別為68、73、87，因此錐形瓶中每毫升稀釋液中尿素分解菌的活菌數(shù)為(68＋73＋87)÷3÷0.1×105＝7.6×107(個(gè))。Ⅳ.有些菌落周?chē)呐囵B(yǎng)基沒(méi)有變化，說(shuō)明這些細(xì)菌不能產(chǎn)生脲酶進(jìn)而利用尿素作為氮源，而氮源為微生物生長(zhǎng)所必需的，因此可推測(cè)可能存在固氮微生物，它們能利用空氣中的氮?dú)庾鳛榈矗焕门囵B(yǎng)基中的尿素，不能將尿素分解成氨(不與指示劑作用)，所以看到有些菌落產(chǎn)生而菌落周?chē)呐囵B(yǎng)基沒(méi)有變化。答案：(1)脲酶(2)Ⅱ.空白對(duì)照Ⅲ.①酚紅指示劑②稀釋涂布平板③紅色的7.6×107Ⅳ.存在固氮微生物，它們能利用空氣中的氮?dú)庾鳛榈?，而不利用培養(yǎng)基中的尿素，不能將尿素分解成氨(不與指示劑作用)，所以看到有些菌落產(chǎn)生而菌落周?chē)呐囵B(yǎng)基沒(méi)有變化17．幽門(mén)螺桿菌是棲息在胃黏膜的螺旋形的細(xì)菌(該菌對(duì)萬(wàn)古霉素﹑兩性霉素B等抗生素不敏感，對(duì)青霉素高度敏感)，感染后可引起胃炎等疾病。幽門(mén)螺桿菌能產(chǎn)生有較強(qiáng)活性的脲酶，該酶能催化熱穩(wěn)定性低的尿素分解為NH3和CO2。體檢時(shí)可通過(guò)14C尿素呼氣試驗(yàn)來(lái)檢測(cè)幽門(mén)螺桿菌感染情況。受試者口服14C標(biāo)記的尿素膠囊后，定時(shí)收集受試者吹出的氣體并測(cè)定其中是否含有14CO2以及量的多少，作為診斷指標(biāo)。(1)下列關(guān)于幽門(mén)螺桿菌的說(shuō)法錯(cuò)誤的是________。A．具有核糖體，能獨(dú)立合成蛋白質(zhì)B．幽門(mén)螺桿菌生命系統(tǒng)的邊界是細(xì)胞壁C．幽門(mén)螺桿菌以二分裂方式進(jìn)行增殖D．幽門(mén)螺桿菌可以在酸性條件下生存(2)為研究培養(yǎng)幽門(mén)螺桿菌所需的氣體條件，某研究小組利用半固體培養(yǎng)基(瓊脂含量3.5g/L)對(duì)幽門(mén)螺桿菌進(jìn)行培養(yǎng)。下圖代表微生物可能出現(xiàn)的四種生長(zhǎng)狀態(tài)。結(jié)果顯示幽門(mén)螺桿菌的生長(zhǎng)狀態(tài)類(lèi)