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關(guān)于酵母菌種群數(shù)量的變化第1頁(yè),共18頁(yè),2023年,2月20日,星期六方案設(shè)計(jì)過(guò)程(一)提出問(wèn)題:培養(yǎng)一種酵母菌種群的數(shù)量是怎樣隨時(shí)間變化的?(二)作出假設(shè):環(huán)境中的資源和空間有限的條件下,酵母菌種群的數(shù)量呈S型增長(zhǎng)。(三)設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)①全班同學(xué)分成甲、乙、丙等若干實(shí)驗(yàn)組。②分別用等量培養(yǎng)液,在相同適宜環(huán)境中培養(yǎng)等量酵母菌。③每天用血球計(jì)數(shù)板,采用抽樣檢測(cè)的方法計(jì)數(shù)一個(gè)小方格內(nèi)的酵母菌數(shù)量并作記錄,連續(xù)7天。④7天后,各組向全班匯報(bào)本小組7天的數(shù)據(jù),算出每一天數(shù)據(jù)的全班平均值,根據(jù)平均值畫(huà)出酵母菌種群數(shù)量的增長(zhǎng)曲線。第2頁(yè),共18頁(yè),2023年,2月20日,星期六血細(xì)胞計(jì)數(shù)板第3頁(yè),共18頁(yè),2023年,2月20日,星期六血球計(jì)數(shù)板的結(jié)構(gòu)
血球計(jì)數(shù)板是一種專門(mén)用于計(jì)算較大單細(xì)胞微生物數(shù)量的儀器,由一塊比普通載玻片厚的特制玻片制成的玻片中有四條下凹的槽,構(gòu)成三個(gè)平臺(tái)。中間的平臺(tái)較寬,其中間又被一短橫槽隔為兩半,每半邊上面刻有一個(gè)方格網(wǎng)。
第4頁(yè),共18頁(yè),2023年,2月20日,星期六1mm1mm方格網(wǎng)上刻有9個(gè)大方格,其中只有中間的一個(gè)大方格為計(jì)數(shù)室,供微生物計(jì)數(shù)用。第5頁(yè),共18頁(yè),2023年,2月20日,星期六
方格網(wǎng)上刻有9個(gè)大方格,其中只有中間的一個(gè)大方格為計(jì)數(shù)室,供微生物計(jì)數(shù)用。
大方格的長(zhǎng)和寬各為1mm,深度為0.1mm,即1mm×1mm×0.1mm,其容積為0.1mm3;大方格的長(zhǎng)和寬各為2mm,深度為0.1mm,即2mm×2mm×0.1mm,其容積為0.4mm3第6頁(yè),共18頁(yè),2023年,2月20日,星期六計(jì)數(shù)室通常也有兩種規(guī)格:16×25型:即大方格內(nèi)分為16中格,每一中格又分為25小格25×16型:即大方格內(nèi)分為25中格,每一中格又分為16小格。
不管計(jì)數(shù)室是哪一種構(gòu)造,其每一大方格都是由16×25=25×16=400個(gè)小方格組成。第7頁(yè),共18頁(yè),2023年,2月20日,星期六計(jì)數(shù):16×25型:
一般取四角的四個(gè)中方格(100個(gè)小方格)計(jì)數(shù)25×16型:一般計(jì)數(shù)四個(gè)角和中央的五個(gè)中方格(80個(gè)小方格)的細(xì)胞數(shù)。
第8頁(yè),共18頁(yè),2023年,2月20日,星期六計(jì)算:
以1mm×1mm×0.1mm型為例:
計(jì)數(shù)室容積為0.1mm3,則每個(gè)小方格的容積為1/4000mm3
。每個(gè)個(gè)小方格細(xì)胞總數(shù)×400×10000×稀釋倍數(shù)
酵母細(xì)胞個(gè)數(shù)/1mL=第9頁(yè),共18頁(yè),2023年,2月20日,星期六例1:通常用血球計(jì)數(shù)板對(duì)培養(yǎng)液中酵母菌進(jìn)行計(jì)數(shù),若計(jì)數(shù)室為1mm×1mm×0.1mm方格,由400個(gè)小方格組成。若多次重復(fù)計(jì)數(shù)后,算得每個(gè)小方格中平均有5個(gè)酵母菌,則10mL該培養(yǎng)液中酵母菌總數(shù)有
個(gè)。2×108第10頁(yè),共18頁(yè),2023年,2月20日,星期六1.加樣品:將清潔干燥的血球計(jì)數(shù)板的計(jì)數(shù)室上加蓋專用的蓋玻片,用吸管吸取稀釋后的酵母菌懸液,滴于蓋玻片邊緣,讓培養(yǎng)液自行緩緩滲入,一次性充滿計(jì)數(shù)室,防止產(chǎn)生氣泡。多余培養(yǎng)液可用濾紙吸去。操作注意事項(xiàng):第11頁(yè),共18頁(yè),2023年,2月20日,星期六第12頁(yè),共18頁(yè),2023年,2月20日,星期六第13頁(yè),共18頁(yè),2023年,2月20日,星期六2.計(jì)數(shù):
稍待片刻(約5min),待酵母菌細(xì)胞全部沉降到計(jì)數(shù)室底部后,將計(jì)數(shù)板放在載物臺(tái)的中央,先在低倍鏡下找到計(jì)數(shù)室所在位置后,再轉(zhuǎn)換高倍鏡觀察、計(jì)數(shù)并記錄。對(duì)于壓在方格界線上的酵母菌應(yīng)當(dāng)計(jì)數(shù)同側(cè)相鄰兩邊上的菌體數(shù),一般可采取“數(shù)上線不數(shù)下線,數(shù)左線不數(shù)右線”的原則處理,另兩邊不計(jì)數(shù)。第14頁(yè),共18頁(yè),2023年,2月20日,星期六實(shí)驗(yàn)討論:從試管中吸出培養(yǎng)液進(jìn)行計(jì)數(shù)之前,建議你將試管輕輕震蕩幾次。這是為什么?使酵母菌在試管里分布均勻,提高計(jì)數(shù)的代表性和準(zhǔn)確性。本探究需要設(shè)置對(duì)照嗎?如果需要,請(qǐng)討論說(shuō)明怎樣設(shè)計(jì);如不需要,請(qǐng)說(shuō)明理由。不需要。本實(shí)驗(yàn)?zāi)康闹荚谔骄颗囵B(yǎng)液中酵母菌在一定條件下的種群數(shù)量變化,只要分組重復(fù)實(shí)驗(yàn),獲得平均數(shù)值,求得準(zhǔn)確即可。并且該實(shí)驗(yàn)在時(shí)間上形成前后對(duì)照。需要做重復(fù)實(shí)驗(yàn)嗎?需要,提高數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性。第15頁(yè),共18頁(yè),2023年,2月20日,星期六怎樣記錄結(jié)果?記錄表怎樣設(shè)計(jì)?每天同一時(shí)間,各組取出本組的試管,用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)酵母菌個(gè)數(shù),并作記錄,連續(xù)觀察7天。
第16頁(yè),共18頁(yè),2023年,2月20日,星期六培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量7天中的變化記錄表
(2.5×104個(gè))(天)組別起
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