授課時(shí)間：兩個(gè)學(xué)時(shí)目的與要求：

1.掌握補(bǔ)體系統(tǒng)的基本概念、命名和成份2.熟悉補(bǔ)體系統(tǒng)激活的兩條途徑的激活物質(zhì)、激活過(guò)程；掌握兩條激活途徑的主要不同點(diǎn)3.熟悉補(bǔ)體的性質(zhì)、補(bǔ)體合成的部位4.了解補(bǔ)體激活過(guò)程的調(diào)節(jié)，掌握體液中重要滅活物質(zhì)如C1抑制物，C4結(jié)合蛋白、I因子，H因子等的調(diào)節(jié)作用。5．掌握補(bǔ)體的生物學(xué)活性當(dāng)前1頁(yè)，總共38頁(yè)。重點(diǎn)：1.補(bǔ)體系統(tǒng)的組成2.補(bǔ)體系統(tǒng)的激活途徑3.補(bǔ)體的生物學(xué)功能及意義難點(diǎn)：1.補(bǔ)體系統(tǒng)的激活途徑當(dāng)前2頁(yè)，總共38頁(yè)。一、概述19世紀(jì)末，在發(fā)現(xiàn)體液免疫后不久，Bordet即證明，新鮮血清中存在不耐熱的成分，可輔助特異性抗體介導(dǎo)的溶菌作用。因其是抗體發(fā)揮溶細(xì)胞作用的必要補(bǔ)充條件，故被稱為補(bǔ)體。當(dāng)前3頁(yè)，總共38頁(yè)。概念：補(bǔ)體（complement）：由30余種廣泛存在于血清、組織液和細(xì)胞膜表面蛋白質(zhì)組成的、具有精密調(diào)控機(jī)制的蛋白質(zhì)反應(yīng)系統(tǒng)，其活化過(guò)程表現(xiàn)為一系列絲氨酸蛋白酶的級(jí)聯(lián)酶解反應(yīng)。當(dāng)前4頁(yè)，總共38頁(yè)。（一）補(bǔ)體系統(tǒng)的組成1．補(bǔ)體的固有成分*經(jīng)典途徑的C1q、C1r、C1s、C4、C2；*旁路途徑的B因子、D因子、備解素（P因子）；*MBL途徑的MBL、MBL相關(guān)絲氨酸（MASP）；*三條途徑的共同末端通路C3、C5~C9。當(dāng)前5頁(yè)，總共38頁(yè)。2．調(diào)節(jié)蛋白：C1抑制物、I因子、H因子、C4結(jié)合蛋白、DAF等。3．補(bǔ)體受體：CR1~CR5、C3aR、C4aR、C5aR等。當(dāng)前6頁(yè)，總共38頁(yè)。（二）補(bǔ)體的命名（1）.參與經(jīng)典途徑的固有成分C1~C9;（2）.替代途徑的補(bǔ)體成分B因子，（3）.補(bǔ)體調(diào)節(jié)蛋白C1抑制因子、（4）.補(bǔ)體受體CR1、CR2（5）.補(bǔ)體活化的裂解片段C3a、C3b(a為小片段；b為大片段)（6）.具有酶活性的成分或復(fù)合物C3bBb（7）.已失活的補(bǔ)體成分iC3b/C3bi當(dāng)前7頁(yè)，總共38頁(yè)。（三）補(bǔ)體的理化性質(zhì)（1）.均為糖蛋白，對(duì)溫度、酸、堿、紫外線、震蕩、蛋白酶、乙醇等敏感。常用滅活條件為56℃30分鐘。（2）血清中含量相對(duì)穩(wěn)定；各組分含量不一（C3最高，D因子最低）；分子量大小不一（C1q最大，D因子最?。＃?）不同種屬動(dòng)物血清補(bǔ)體含量存在差異。（4）由肝細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、脾細(xì)胞等合成。

當(dāng)前8頁(yè)，總共38頁(yè)。二、補(bǔ)體系統(tǒng)的激活*補(bǔ)體系統(tǒng)各成分通常以非活性狀態(tài)存在于血漿中,在活化物質(zhì)作用下,補(bǔ)體發(fā)生復(fù)雜的級(jí)聯(lián)反應(yīng),表現(xiàn)出生物學(xué)活性,此為補(bǔ)體的激活。當(dāng)前9頁(yè)，總共38頁(yè)。*補(bǔ)體級(jí)聯(lián)(complementcascade)反應(yīng)：在某些激活物質(zhì)的作用下，各補(bǔ)體成分按一定順序，以連鎖的酶促反應(yīng)方式活化，并表現(xiàn)出各種生物學(xué)活性的過(guò)程。當(dāng)前10頁(yè)，總共38頁(yè)。補(bǔ)體級(jí)聯(lián)反應(yīng)按其起始順序的不同，可分為3條途徑，即：經(jīng)典途徑(classicalpathway):抗感染后期產(chǎn)生效應(yīng)旁路途徑(alternativepathway)):抗感染初期產(chǎn)生效應(yīng)

MBL途徑(MBLpathway)):抗感染初期產(chǎn)生效應(yīng)當(dāng)前11頁(yè)，總共38頁(yè)。1、經(jīng)典激活途徑immunecomplex，IC參與成分：C1(C1q、C1r、C1s)、C4、C2、C3、C5-C9、Ca2+、Mg2＋主要激活物質(zhì)：特異性抗體(IgG或IgM)與相應(yīng)抗原結(jié)合所形成的免疫復(fù)合物(IC)激活過(guò)程:識(shí)別階段、活化階段、膜攻擊階段當(dāng)前12頁(yè)，總共38頁(yè)。（1）識(shí)別階段

即C1識(shí)別免疫復(fù)合物（IC）而活化形成C1酯酶的階段。C1結(jié)構(gòu)：

河南工業(yè)大學(xué)生物工程學(xué)院生物技術(shù)系當(dāng)前13頁(yè)，總共38頁(yè)。當(dāng)前14頁(yè)，總共38頁(yè)。C1活化

（1）Ca存在（2）同時(shí)與兩個(gè)或兩個(gè)以上補(bǔ)體結(jié)合位點(diǎn)結(jié)合（3）C1q對(duì)Ig的親和力不同:IgM>IgG3>IgG1>IgG2

河南工業(yè)大學(xué)生物工程學(xué)院生物技術(shù)系2+當(dāng)前15頁(yè)，總共38頁(yè)。（2）活化階段

C1s作用于后續(xù)成分,形成C3轉(zhuǎn)化酶（C4b2b）和

C5轉(zhuǎn)化酶（C4b2b3b）。當(dāng)前16頁(yè)，總共38頁(yè)。（3）膜攻擊階段

→C5轉(zhuǎn)化酶裂解C5→系列的連接反應(yīng)→形成C5b6789膜攻擊復(fù)合物（MAC）→損傷靶細(xì)胞膜→細(xì)胞崩解membraneattackcomplex，MAC當(dāng)前17頁(yè)，總共38頁(yè)。當(dāng)前18頁(yè)，總共38頁(yè)。C4bC2C2bC4b2bC3C3bC4b2b3bC5免疫復(fù)合物C1C1C4C5bC6C7C8C9C5b6789——MAC+識(shí)別階段C1酯酶形成活化階段C3及C5轉(zhuǎn)化酶形成攻膜階段MAC形成當(dāng)前19頁(yè)，總共38頁(yè)。2、旁路途徑（alternativepathway）替代激活途徑*不經(jīng)C1、C4、C2，由C3、B、D因子參與的激活過(guò)程。激活物質(zhì)乃為細(xì)菌、內(nèi)毒素、酵母多糖、葡聚糖等，為補(bǔ)體激活提供接觸面（保護(hù)面，保護(hù)中間產(chǎn)物不被調(diào)節(jié)因子滅活）。當(dāng)前20頁(yè)，總共38頁(yè)。旁路途徑的特點(diǎn):識(shí)別自己與非己；效應(yīng)的放大機(jī)制；參與早期非特異抗感染。當(dāng)前21頁(yè)，總共38頁(yè)。C5C5bMACC6C7C8C9當(dāng)前22頁(yè)，總共38頁(yè)。3、MBL激活途徑主要激活物：病原體甘露糖殘基主要參與成分:甘露糖結(jié)合凝集素(MBL)、絲氨酸蛋白酶(SP)、C4、C2、C3、C5-9、Ca2+、Mg2＋當(dāng)前23頁(yè)，總共38頁(yè)。MBL是一種鈣依賴結(jié)合蛋白，在結(jié)構(gòu)上與C1q相似，MBL首先與細(xì)菌的甘露糖殘基結(jié)合，然后與絲氨酸蛋白酶結(jié)合，形成MBL相關(guān)絲氨酸蛋白酶（MASP）。MASP具有與活化的C1相似的生物學(xué)活性，之后的反應(yīng)過(guò)程與經(jīng)典途徑相似。當(dāng)前24頁(yè)，總共38頁(yè)。C5C5bC5aC6C7C8C9MAC當(dāng)前25頁(yè)，總共38頁(yè)。

經(jīng)典途徑

ICC1C1C4+C2C4b2bC4b2b3bMBL+病原體甘露糖殘基絲氨酸蛋白酶MASPMBL途徑旁路途徑C3C3bC3bBbB因子D因子C3bnBbC3C3bC5C5bMACC6C7C8C9河南工業(yè)大學(xué)生物工程學(xué)院生物技術(shù)系當(dāng)前26頁(yè)，總共38頁(yè)。四、補(bǔ)體活化的調(diào)控（一）補(bǔ)體的自身調(diào)控補(bǔ)體激活產(chǎn)生的中間產(chǎn)物極不穩(wěn)定，限制級(jí)聯(lián)反應(yīng)。當(dāng)前27頁(yè)，總共38頁(yè)。(二)補(bǔ)體調(diào)節(jié)因子的作用1．C1抑制物(C1inhibitor,C1INH)：可與活化的C1q、C1r結(jié)合成穩(wěn)定的復(fù)合物，使C1r、C1s失去酶活性。2．C4結(jié)合蛋白(C4bindingprotein,C4bp)：競(jìng)爭(zhēng)性抑制C4b與C2結(jié)合，阻止C3轉(zhuǎn)化酶形成。當(dāng)前28頁(yè)，總共38頁(yè)。3．I因子：具有絲氨酸蛋白酶活性，可裂解C4b和C3b。4．膜輔助蛋白（membranecofactorprotein,MCP）：促進(jìn)I因子裂解C4b和C3b，干擾C4b2b和C3bBb形成。5．衰變加速因子（decay-acceleratingfactor,DAF）：抑制C4b2a形成；干擾C3bBb形成（B與C3b結(jié)合↓；C3bBb解離↑）。6.H因子：與B或Bb競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合C3b→促使C3b被I因子酶解失活。當(dāng)前29頁(yè)，總共38頁(yè)。同源限制因子（homologousrestrictionfactor,HRF）：若靶細(xì)胞與補(bǔ)體來(lái)源于同一種屬時(shí)，補(bǔ)體的溶細(xì)胞效應(yīng)受抑制，從而保護(hù)組織細(xì)胞免自身補(bǔ)體的損傷，此現(xiàn)象稱為同源限制性。參與同源限制性效應(yīng)的補(bǔ)體調(diào)節(jié)蛋白稱為同源限制因子，包括DAF、MCP、CR1、CD59。當(dāng)前30頁(yè)，總共38頁(yè)。當(dāng)前31頁(yè)，總共38頁(yè)。五、補(bǔ)體受體（一）補(bǔ)體受體I型（CR1、C3bR、CD35）１．分布：分布于多種免疫細(xì)胞表面，血液中85%CR1表達(dá)于紅細(xì)胞表面。２．配體：其親和力依次為C3b、C4b、iC3b。3．功能：*吞噬調(diào)理作用*抑制C3轉(zhuǎn)化酶活性，調(diào)節(jié)補(bǔ)體活化*清除免疫復(fù)合物*參與免疫記憶當(dāng)前32頁(yè)，總共38頁(yè)。當(dāng)前33頁(yè)，總共38頁(yè)。（二）補(bǔ)體受體II型（CR2、C3bR、CD21）1．分布：表達(dá)在B細(xì)胞、活化的T細(xì)胞、上皮細(xì)胞和FDC。2．配體：其親和力依次為iC3b、C3d、C3dg、C3b3．功能：*CR2與CD19、CD81結(jié)合，形成B細(xì)胞結(jié)合抗原的共受體，參與B細(xì)胞活化；*參與免疫記憶；*EB病毒的受體。當(dāng)前34頁(yè)，總共38頁(yè)。(三)、其他1．CR3與CR4主要分布于吞噬細(xì)胞表面，其配體主要是iC3b，參與吞噬調(diào)理作用。2．C3aR與C5aR廣泛表達(dá)于肥大細(xì)胞、嗜堿粒細(xì)胞等細(xì)胞的表面，介導(dǎo)炎癥反應(yīng)。當(dāng)前35頁(yè)，總共38頁(yè)。六、補(bǔ)體的生物學(xué)功能（一）細(xì)胞毒溶菌、溶解病毒作用溶解各種靶細(xì)胞→抗微生物補(bǔ)體激活→形成MAC溶解自身細(xì)胞→組織損傷與疾病

（二）調(diào)理作用（opsonization）C3b、C4b、iC3b與靶細(xì)胞結(jié)合，通過(guò)與吞噬細(xì)胞表面CR1、CR3、CR4的結(jié)合，促進(jìn)吞噬。當(dāng)前36頁(yè)，總共38頁(yè)。當(dāng)前3