第三章其他病原微生物演示文稿當(dāng)前1頁，總共75頁。優(yōu)選第三章其他病原微生物當(dāng)前2頁，總共75頁。概況

菌絲分支分隔，接觸培養(yǎng)基的菌絲分化出足細(xì)胞，其上生出直立的分生孢子柄，頂端膨大成球形頂囊，在頂囊處以輻射方式生出桿狀小梗（一排或兩排），頂端產(chǎn)生一連串分生孢子。

分生孢子柄、頂囊、小梗和分生孢子合成孢子頭，可用于產(chǎn)生淀粉酶、蛋白酶和磷酸二酯酶等，也是釀造工業(yè)中的常見菌種。當(dāng)前3頁，總共75頁。當(dāng)前4頁，總共75頁。分生孢子為單細(xì)胞，有黑、黃、白、綠等多種不同顏色，是鑒別不同菌種的依據(jù)。米曲霉、醬油曲霉是常用發(fā)酵菌種。黃曲霉、煙曲霉菌是常見禽畜致病菌。黃曲霉菌也是地球的早期生命。概況當(dāng)前5頁，總共75頁。當(dāng)前6頁，總共75頁。造成感染的曲霉菌當(dāng)前7頁，總共75頁。詳解黃曲霉菌煙曲霉菌當(dāng)前8頁，總共75頁。

煙曲霉菌可使雞鴨鵝鴿及鸚鵡發(fā)生曲霉菌病或霉菌性肺炎。也可在發(fā)霉的飼料中產(chǎn)生毒素，一起家畜中毒。是曲霉菌屬中致病性最強(qiáng)。煙曲霉菌當(dāng)前9頁，總共75頁。煙曲霉菌分生子孢頭當(dāng)前10頁，總共75頁。.形態(tài)特征孢子為圓形，呈藍(lán)綠色，直徑2.5~3.5um,呈連珠狀排列。分生孢子柄長250~300um，分布在有隔板的縱橫交織的氣中菌絲上。1、生物學(xué)特性當(dāng)前11頁，總共75頁。2.培養(yǎng)基特征在沙氏培養(yǎng)基上初形成白色、圓形、絨毛狀菌落，最后變成深綠色或者灰綠色。37~40℃當(dāng)前12頁，總共75頁。2、抵抗力抵抗力較弱，能被一般消毒劑或熱力消毒法所滅，但孢子的抵抗力強(qiáng)，120℃干熱1h或煮沸5MIN才能被殺死。對一般的抗生素均不敏感，制霉菌素、灰黃霉素及碘化鉀對煙曲霉素有抑制作用當(dāng)前13頁，總共75頁。3.致病性

可使雞鴨鵝等曲霉菌病或霉菌性肺炎，在幼禽多呈急性經(jīng)過；哺乳動物及人也可感染。在感染組織的過程中，還可產(chǎn)生一種蛋白毒素，可導(dǎo)致動物組織痙攣、麻痹、直至死亡。當(dāng)前14頁，總共75頁。4.微生物學(xué)檢查刮取少數(shù)肺臟病變等材料，置于玻片上，加一滴鹽水，蓋上蓋玻片，置高倍鏡下觀察形態(tài)特征，分生孢子柄不分支，菌絲分支分隔，頂端膨大，以及小梗、分生孢子的形態(tài)、排列和色澤等。當(dāng)前15頁，總共75頁。黃曲霉菌

分布廣泛，常生長于花生仁及玉米、花生餅、棉籽餅和秸稈等飼料上，還可以在各種食物及肉類制品上生長繁殖，并產(chǎn)生黃曲霉素散入各基質(zhì)中，引起人畜中毒。黃曲霉毒素是由黃曲霉和寄生曲霉產(chǎn)生的雜環(huán)化合物，它的代謝產(chǎn)物主要有B1、B2、G1、G2、M1和M2等類型。當(dāng)前16頁，總共75頁。顯微鏡下的黃曲霉當(dāng)前17頁，總共75頁。黃曲霉菌1.形態(tài)特征分生孢子梗多從基質(zhì)部生出，長度小于1mm,壁厚無色粗糙。頂囊早起較長，晚期呈燒瓶形或近似球形，直徑10~65mm。頂囊上產(chǎn)生小梗（單層或雙層），小梗頂端著生分生孢子，孢子呈球形、近似橘形。當(dāng)前18頁，總共75頁。當(dāng)前19頁，總共75頁。2.培養(yǎng)特征可以培養(yǎng)于沙氏培養(yǎng)基、2%麥芽糖及7.5%氯化鈉瓊脂培養(yǎng)基上。生長溫度為28~30°C，相對濕度在80%以上。菌落生長較快。呈扁平狀，也有褶皺呈腦回狀。最初帶黃色，后變黃綠色，老齡菌落呈暗色，反面帶褐色或無色。

當(dāng)前20頁，總共75頁。成份：蛋白胨、水、瓊脂、葡萄糖或麥芽糖制法：將上述物質(zhì)稱好，放入水中煮沸溶解分裝包扎，高壓后凝固備用。用途：作分離培養(yǎng)霉菌用。注意：1接種臨床新鮮標(biāo)本可先加1-2滴70%酒精讓干后再接種于含12．5%氯霉素沙氏斜面培養(yǎng)基上。當(dāng)前21頁，總共75頁。

實(shí)驗(yàn)室條件下接種黃曲霉菌當(dāng)前22頁，總共75頁。2、抵抗力黃曲霉菌的種類比較多，毒性大小也不同，但都易溶于脂溶性溶劑，耐熱，熔點(diǎn)為200~300℃，煮沸不能分解，但在PH9~10的強(qiáng)堿溶液中，毒素能迅速溶解當(dāng)前23頁，總共75頁。3.致病性黃曲霉菌的致病性主要是其所產(chǎn)生的毒素。在各類黃曲霉毒素中，黃曲霉毒素Ｂ1的毒性最大，其次是M1、G1、M2、B2和G2。因此，許多國家規(guī)定了黃曲霉毒素在食品中的極限值，即食品中的黃曲霉毒素含量不允許超過此值。當(dāng)前24頁，總共75頁。黃曲霉菌的毒性極強(qiáng)，遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于氰化物、砷化物和有機(jī)農(nóng)藥的毒性，其中以B1毒性最大。當(dāng)人攝入量大時，可發(fā)生急性中毒，出現(xiàn)急性肝炎、出血性壞死、肝細(xì)胞脂肪變性和膽管增生。當(dāng)微量持續(xù)攝人，可造成慢性中毒，生長障礙，引起纖維性病變，致使纖維組織增生。AFT的致癌力也居首位，是目前已知最強(qiáng)致癌物之一。當(dāng)前25頁，總共75頁。B1毒性分類當(dāng)前26頁，總共75頁。黃曲霉毒素是一種強(qiáng)烈的肝臟毒，可使牛、豬、馬、雞、鴨、綿羊等多種動物發(fā)生霉菌毒素中毒。當(dāng)前27頁，總共75頁。當(dāng)前28頁，總共75頁。當(dāng)前29頁，總共75頁。4.感染途徑

散布在空氣中的分生孢子在有利的條件下菌絲本身也可伸長增殖。菌絲形成隔壁即可產(chǎn)生兩個獨(dú)立的細(xì)胞。此外稱做子囊孢子的有性孢子也具有增殖的能力?？梢鹨苑螢橹鞯亩鄠€臟器的非壞死性肉芽腫性病變。在病變部位可見大量的嗜中性粒細(xì)胞浸潤，其中可見呈Y字型分歧的有隔壁的菌絲。當(dāng)前30頁，總共75頁。分為化學(xué)方法（薄層層析）、生物學(xué)方法和免疫學(xué)方法三大類。

5.微生物學(xué)診斷當(dāng)前31頁，總共75頁。1、生物學(xué)方法

1）抑菌試驗(yàn)黃曲霉菌有抑制某些微生物生長的作用，故用其抑菌作用來測定黃曲霉菌的存在和含量。已經(jīng)發(fā)現(xiàn)巨大芽胞桿菌和短芽胞桿菌對AFT最敏感。通過平皿中抑菌圈大小來衡量黃曲霉菌含量。

2）熒光測定法根據(jù)黃曲霉菌在紫外光照射下可發(fā)出熒光的原理，將待檢菌株接種于培養(yǎng)基中，28—30~C培養(yǎng)48～72小時，產(chǎn)生的毒素便浸入培養(yǎng)基中，在紫外燈光下照射培養(yǎng)基會呈現(xiàn)出特異的熒光。此法操作簡便。對AFT最低檢出量為5pg／ml?！ぎ?dāng)前32頁，總共75頁。3）大白鼠試驗(yàn)法黃曲霉菌對大白鼠毒性最早出現(xiàn)損害的是肝臟，其受損范圍廣，而幼鼠最敏感，雄性幼鼠比雌性幼鼠敏感性更高，用100－150g大白鼠作急性中毒試驗(yàn)，一般3—4天死亡。4）雞胚試驗(yàn)5）鴨雛試驗(yàn)鴨雛對黃曲霉菌非常敏感，致死性強(qiáng)，一般用一次劑量后72小時內(nèi)死亡。當(dāng)前33頁，總共75頁。

6）斑點(diǎn)試驗(yàn)

本法用于檢測真菌毒素致突變試驗(yàn)的一種有意義的方法。主要利用沙門氏菌/微粒體突變性來檢測某些樣品種AFT的存在與含量。

A先將鼠傷寒沙門氏菌組氨酸缺陷型變種的菌懸液，與一定量肝組織勻漿混合作傾注平板。

B待凝固后，再將一定量被檢物(含AFT)加在平板中央待黃曲霉菌往外圍瓊脂中擴(kuò)散時，圍繞中心點(diǎn)將出現(xiàn)密布的回復(fù)突變的菌落。本法作為一種生物學(xué)檢驗(yàn)法廣泛應(yīng)用于開發(fā)安全、有用的化學(xué)物質(zhì)和檢測食品或農(nóng)產(chǎn)品中黃曲霉菌。當(dāng)前34頁，總共75頁。2．免疫學(xué)方法

黃曲霉菌是分子量為312～346的二氫呋喃香豆素的衍生物，無免疫原性，不能引起抗體的產(chǎn)生，故必須與大分子化學(xué)基團(tuán)或蛋白質(zhì)偶聯(lián)，成為完全抗原，方能引起免疫動物的抗體形成，然后利用血清學(xué)方法檢測AFT由于黃曲霉菌的量一般都較低，因此，檢測方法主要是敏感性較高的放射免疫測定法(RIA)和酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)。當(dāng)前35頁，總共75頁。二、分枝桿菌分類分枝桿菌屬歸類于放線菌對人致病的放線菌可分含和不含分枝菌酸兩類。前者有諾卡菌屬、分枝桿菌屬、棒狀桿菌屬，后者有放線菌屬當(dāng)前36頁，總共75頁。生物學(xué)特性形態(tài)和染色形態(tài)：菌體細(xì)長略彎曲，呈單個或分枝狀排列。經(jīng)抗結(jié)核藥物治療，可轉(zhuǎn)為L型菌，呈現(xiàn)多形性(顆粒狀、絲狀等)結(jié)構(gòu)：莢膜染色性：抗酸染色陽性當(dāng)前37頁，總共75頁。當(dāng)前38頁，總共75頁。培養(yǎng)特點(diǎn)專性需氧生長緩慢(14～18h分裂1次)，培養(yǎng)3～4周出現(xiàn)菌落。營養(yǎng)要求高，常用羅氏培養(yǎng)基生長現(xiàn)象液體：表面生長（菌膜）固體：顆粒、結(jié)節(jié)、花菜狀菌落，乳白或米黃，不透明當(dāng)前39頁，總共75頁。當(dāng)前40頁，總共75頁。生化反應(yīng)不發(fā)酵糖類熱觸酶試驗(yàn)對區(qū)別結(jié)核分枝桿菌與非結(jié)核分枝桿菌有重要意義結(jié)核分枝桿菌大多數(shù)觸酶試驗(yàn)陽性，而熱觸酶試驗(yàn)陰性非結(jié)核分枝桿菌則大多數(shù)兩種試驗(yàn)均陽性當(dāng)前41頁，總共75頁。抵抗力（四怕）對乙醇敏感對濕熱敏感對紫外線敏感對鏈霉素、異煙肼、利福平、環(huán)絲氨酸、乙胺丁醇、卡那霉素、對氨基水楊酸等抗癆藥物敏感，但長期用藥容易出現(xiàn)耐藥性當(dāng)前42頁，總共75頁。抵抗力（四不怕）對干燥的抵抗力特別強(qiáng)結(jié)核分枝桿菌對酸（3%HCl或6%H2SO4)或堿（4%NaOH)有抵抗力，15min不受影響對堿性染料有抵抗力對青霉素等抗生素耐藥當(dāng)前43頁，總共75頁。二、致病性致病物質(zhì)莢膜脂質(zhì)蛋白質(zhì)當(dāng)前44頁，總共75頁。莢膜成分－－多糖、脂質(zhì)和蛋白質(zhì)有助于粘附與入侵可降解宿主組織中的大分子物質(zhì)，為細(xì)菌繁殖提供營養(yǎng)防止宿主的有害物質(zhì)進(jìn)入細(xì)菌可抑制吞噬體與溶酶體的融合當(dāng)前45頁，總共75頁。脂質(zhì)索狀因子若將其從細(xì)菌中提出，則細(xì)菌喪失毒力磷脂硫酸腦苷脂蠟質(zhì)D當(dāng)前46頁，總共75頁。

索狀因子由分枝菌酸和海藻糖結(jié)合的一種糖脂能使細(xì)菌在液體培養(yǎng)基中呈蜿蜒索狀排列能破壞細(xì)胞線粒體膜，影響細(xì)胞呼吸抑制白細(xì)胞游走和引起慢性肉芽腫當(dāng)前47頁，總共75頁。磷脂促使單核細(xì)胞增生,與結(jié)核結(jié)節(jié)的形成有關(guān)硫酸腦苷脂抑制吞噬細(xì)胞中吞噬體與溶酶體的結(jié)合使細(xì)菌能在吞噬細(xì)胞中長期存活當(dāng)前48頁，總共75頁。蠟質(zhì)D肽糖脂和分枝菌酸的復(fù)合物具有佐劑作用，可激發(fā)機(jī)體產(chǎn)生遲發(fā)型超敏反應(yīng)當(dāng)前49頁，總共75頁。蛋白質(zhì)有抗原性，和蠟質(zhì)D結(jié)合后能使機(jī)體發(fā)生超敏反應(yīng)在形成結(jié)核結(jié)節(jié)中發(fā)揮一定作用當(dāng)前50頁，總共75頁。致病物質(zhì)莢膜與細(xì)胞表面受體結(jié)合（粘附與入侵作用）含多種酶（分解利用營養(yǎng)物質(zhì)）保護(hù)（阻止有害物質(zhì)的進(jìn)入菌體）脂質(zhì)索狀因子（破壞細(xì)胞，引起肉芽腫）磷脂（形成結(jié)核結(jié)節(jié)）硫酸腦苷脂（抑制吞噬體與溶酶體結(jié)合）蠟質(zhì)D（引起遲發(fā)性過敏反應(yīng)）蛋白質(zhì)引起遲發(fā)性過敏反應(yīng)當(dāng)前51頁，總共75頁。

所致疾病結(jié)核桿菌可通過呼吸道、消化道和破損的皮膚粘膜進(jìn)入機(jī)體，侵犯多種組織器官，引起相應(yīng)器官的結(jié)核病，其中以肺結(jié)核最常見。人類肺結(jié)核有兩種表現(xiàn)類型。

原發(fā)感染、原發(fā)后感染當(dāng)前52頁，總共75頁。肺部感染原發(fā)感染多發(fā)生于兒童原發(fā)灶-原發(fā)綜合征-隱性菌血癥細(xì)胞免疫（超敏反應(yīng)）形成結(jié)核結(jié)節(jié)（即結(jié)核肉芽腫）轉(zhuǎn)歸原發(fā)后感染當(dāng)前53頁，總共75頁。1.纖維化或鈣化而自愈。長期潛伏少量結(jié)核桿菌2.極少數(shù)免疫力低下者，結(jié)核桿菌向全身擴(kuò)散，導(dǎo)致全身粟粒性結(jié)核或結(jié)核性腦膜炎。當(dāng)前54頁，總共75頁。多見于成年人。大多為內(nèi)源性感染，極少由外源性感染所致。感染的特點(diǎn)是病灶局限，一般不累及鄰近的淋巴結(jié)，主要表現(xiàn)為慢性肉芽腫炎癥，形成結(jié)核結(jié)節(jié)，發(fā)生纖維化或干酪樣壞死。當(dāng)前55頁，總共75頁。當(dāng)前56頁，總共75頁。原發(fā)感染感染源：結(jié)核桿菌--呼吸道--肺泡首次感染機(jī)體--外源性感染感染者：多見于兒童尚未建立特異性免疫功能1、巨噬細(xì)胞吞噬，胞內(nèi)寄生菌，繼續(xù)繁殖，巨噬細(xì)胞遭破壞，釋放大量細(xì)菌引起肺泡炎癥反應(yīng)------原發(fā)病灶。繼發(fā)感染感染源：外源性感染--呼吸道--再次進(jìn)入內(nèi)源性感染--潛伏原發(fā)病灶感染者：多見于成人或較大兒童已建立特異性免疫功能，

但同時處于致敏狀態(tài)。1、特異性免疫功能已建立，巨噬細(xì)胞發(fā)揮強(qiáng)大吞噬殺菌作用。當(dāng)前57頁，總共75頁。2、細(xì)菌常擴(kuò)散至附近淋巴管，并運(yùn)送至肺門淋巴結(jié)，引起肺門淋巴結(jié)腫大------原發(fā)綜合癥。3、病灶有擴(kuò)散傾向，多見于肺上葉底部，且靠近胸膜下通氣較好的部位（需氧菌）4、感染3--6周，機(jī)體出現(xiàn)特異性免疫，同時也伴有超敏反應(yīng)。結(jié)核桿菌----磷脂

巨噬細(xì)胞2、不引起肺門淋巴結(jié)腫大。3、病灶多局限、多見于肺尖。4、干酪樣壞死組織被纖維囊壁包圍，可鈣化而痊愈。5、若干酪樣壞死發(fā)生液化，細(xì)菌在液化灶中大量繁殖，形成空洞，釋放大量細(xì)菌于支氣管、氣管隨痰排出體外，形成開發(fā)性肺結(jié)核。當(dāng)前58頁，總共75頁。巨噬細(xì)胞

被破壞裂解未裂解、轉(zhuǎn)變?yōu)獒尫诺鞍酌?、但溶解組織不完全上皮樣細(xì)胞融合干酪樣壞死多核巨細(xì)胞以此為中心

外圍淋巴細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、成纖維細(xì)胞

結(jié)核結(jié)節(jié)

原發(fā)感染的典型病理特征

95%5%形成纖維化、鈣化，不治而愈活動性肺結(jié)核潛伏----成為今后內(nèi)源性感染少數(shù)人：的來源。其他部位結(jié)核病甚至全身粟粒性感染

當(dāng)前59頁，總共75頁。肺外感染部分患者結(jié)核分枝桿菌可進(jìn)入血液循環(huán)引起肺內(nèi)、外播散，如腦、腎結(jié)核，痰菌被咽入消化道或食入了消毒不嚴(yán)格的牛奶也可引起腸結(jié)核、結(jié)核性腹膜炎等大多與結(jié)核分枝桿菌L型有關(guān)當(dāng)前60頁，總共75頁。四、微生物學(xué)檢查法痰液等標(biāo)本處理：濃縮集菌(氫氧化鈉處理）直接鏡檢：抗酸染色分離培養(yǎng)：培養(yǎng)基、時間（2?4周后見結(jié)果）動物試驗(yàn)：豚鼠等快速診斷：PCR等當(dāng)前61頁，總共75頁。

標(biāo)本采集

根據(jù)感染部位，采集不同標(biāo)本。肺結(jié)核：痰液、支氣管灌洗液。結(jié)核性胸膜炎：胸水。其它：腦脊液、尿液。當(dāng)前62頁，總共75頁。直接涂片鏡檢標(biāo)本直接涂片或集菌后涂片，用抗酸染色若找到抗酸陽性菌即可初步診斷當(dāng)前63頁，總共75頁。

濃縮集菌

先集菌后檢查，可提高檢出率腦脊液和胸、腹水可直接離心沉淀集菌痰、支氣管灌洗液、尿、糞等污染標(biāo)本需經(jīng)4%NaOH處理后離心沉淀當(dāng)前64頁，總共75頁。分離培養(yǎng)結(jié)核分枝桿菌生長緩慢，一般需2～4周長成肉眼可見的落菌動物試驗(yàn)將集菌后的材料注射于豚鼠腹股溝皮下，3～4周后若局部淋巴結(jié)腫大，結(jié)核菌素試驗(yàn)陽轉(zhuǎn)，即可進(jìn)行解剖，觀察肺、肝、淋巴結(jié)等器官有無結(jié)核病變，并作形態(tài)、培養(yǎng)等檢查當(dāng)前65頁，總共75頁?？焖僭\斷多聚酶鏈反應(yīng)（PCR）擴(kuò)增技術(shù)應(yīng)用于結(jié)核分枝桿菌DNA鑒定，每ml中只需含幾個細(xì)菌即可獲得陽性，且12d得出結(jié)果操作中需注意實(shí)驗(yàn)器材的污染問題，以免出現(xiàn)假陽性當(dāng)前66頁，總共75頁。三、螺旋體細(xì)長、柔軟、彎曲呈螺旋狀、運(yùn)動活潑的原核細(xì)胞型微生物；基本結(jié)構(gòu)與細(xì)菌相似，如有細(xì)胞壁、原始核質(zhì)；以二分裂方式繁殖；對抗生素等藥物敏感；運(yùn)動有賴于菌體內(nèi)軸絲的屈曲與收縮。當(dāng)前67頁，總共75頁。當(dāng)前68頁