細(xì)胞生物學(xué)實驗課程教學(xué)大綱課程編號：10021570課程名稱：細(xì)胞生物學(xué)/CellBiology課程式屬性：必修實驗屬性：非獨立設(shè)課開課學(xué)期：4學(xué)時：16適用專業(yè)：生物工程學(xué)分：0.5開課部門：化學(xué)與生物工程學(xué)院考核要求：考查課程簡介：細(xì)胞生物學(xué)是一切生命科學(xué)的最為重要的基礎(chǔ)科學(xué)之一。同時又是生命科學(xué)的生長點，反映了生物科學(xué)發(fā)展的最新成就，所以細(xì)胞生物學(xué)的教學(xué)受到各方面的高度重視，是生命科學(xué)最重要的基礎(chǔ)課之一。本課程的教學(xué)以真核細(xì)胞結(jié)構(gòu)、功能為主要內(nèi)容，強調(diào)細(xì)胞是生命活動的基本單位，突出生物膜，細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)，細(xì)胞增殖調(diào)控，細(xì)胞分化、衰老與凋亡等熱點問題。一、實驗項目設(shè)置及學(xué)時分配細(xì)胞生物學(xué)實驗項目一覽表項目編號實驗項目名稱實驗類型開出要求學(xué)時分配細(xì)胞膜的通透性綜合性必做3細(xì)胞核與線粒體的分級分離驗證性必做4細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)與幾種細(xì)胞器的觀察驗證性必做3細(xì)胞的無絲分裂與有絲分裂的觀察驗證性必做3雞血細(xì)胞的體外融合綜合性必做3學(xué)時總計16二、實驗內(nèi)容及教學(xué)要求實驗項目1：細(xì)胞膜的通透性觀察1、教學(xué)內(nèi)容由于各種溶質(zhì)進(jìn)入細(xì)胞的速度不同，所以不同的溶質(zhì)誘導(dǎo)紅細(xì)胞融血的時間不同?？梢酝ㄟ^測量溶血的時間來粗略比較細(xì)胞膜對相對分子質(zhì)量、脂溶性大小、電解質(zhì)和非電解質(zhì)溶液通透能力的強弱觀察紅細(xì)胞溶血現(xiàn)象以及發(fā)生的過程及其原理。2、教學(xué)目標(biāo)（1）了解紅細(xì)胞溶血現(xiàn)象發(fā)生的原理（2）熟悉紅細(xì)胞溶血現(xiàn)象發(fā)生的過程（3）掌握相對分子質(zhì)量的大小、脂溶性大小、電解質(zhì)和非電解質(zhì)等因素對細(xì)胞膜通透性影響的強弱，細(xì)胞膜通透性的實驗方法。實驗項目2：細(xì)胞核與線粒體的分級分離1、教學(xué)內(nèi)容通過頸椎脫位的方法處死小白鼠，取其肝組織并通過勻漿破碎細(xì)胞，使用差速離心法分離哺乳動物的細(xì)胞核與線粒體，進(jìn)行甲苯胺蘭染色和詹納斯綠B染色后觀察。2、教學(xué)目標(biāo)（1）了解差速離心法分離細(xì)胞器的原理。（2）熟悉用頸椎脫位的方法處死小白鼠，使用差速離心法分離細(xì)胞器的過程。（3）掌握分離哺乳動物的細(xì)胞核與線粒體方法和對細(xì)胞器的染色方法。實驗項目3：細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)與幾種細(xì)胞器的觀察1、教學(xué)內(nèi)容在普通光學(xué)顯微鏡下識別細(xì)胞和細(xì)胞器的形態(tài)結(jié)構(gòu)，掌握生物繪圖的方法。2、教學(xué)目標(biāo)（1）了解在普通光學(xué)顯微鏡下找到細(xì)胞和細(xì)胞器。（2）熟悉細(xì)胞和細(xì)胞器的形態(tài)結(jié)構(gòu)。（3）掌握生物繪圖的方法。實驗項目4：細(xì)胞分裂的形態(tài)觀察1、教學(xué)內(nèi)容在普通光學(xué)顯微鏡下觀察草履蟲無絲分裂裝片、洋蔥根尖切片、馬蛔蟲裝片的有絲分裂的基本過程，掌握細(xì)胞有絲分裂前、中、后、末期的染色體形態(tài)變化特點。2、教學(xué)目標(biāo)（1）了解草履蟲無絲分裂基本過程。（2）熟悉有絲分裂的基本過程和無絲分裂和有絲分裂異同。（3）掌握細(xì)胞有絲分裂前、中、后、末期的染色體形態(tài)變化特點。實驗項目5：雞血細(xì)胞的體外融合1、教學(xué)內(nèi)容從家雞的翼根靜脈采血，制備雞血細(xì)胞懸液，用50%乙二醇（PEG）誘導(dǎo)雞血細(xì)胞體外細(xì)胞融合，觀察融合后細(xì)胞的形態(tài)變化，并計算細(xì)胞融合率。通過PEG誘導(dǎo)雞血細(xì)胞之間的融合實驗，初步掌握細(xì)胞融合的基本方法。2、教學(xué)目標(biāo)（1）了解乙二醇（PEG）誘導(dǎo)體外細(xì)胞融合的基本原理。（2）熟悉融合后細(xì)胞的形態(tài)變化和細(xì)胞融合率的計算。（3）掌握雞血細(xì)胞懸液的制備和細(xì)胞融合的基本方法。三、考核方式及要求實驗課成績滿分為100分，以20%記入細(xì)胞生物學(xué)總成績。由實驗操作、實驗報告及平時（出勤等）成績?nèi)糠纸M成，實驗操作占30%，實驗報告占50%，平時（出勤等）成績占20%。四、主要儀器設(shè)備及實驗材料項目編號實驗項目名稱主要儀器設(shè)備及臺（套）數(shù)實驗材料備注1細(xì)胞核與線粒體的分級分離顯微鏡30臺，勻漿器15套，移液器5套，冷凍離心機2臺小白鼠、冰塊,0.25mol／L蔗糖一0.003mol／L氯化鈣溶液、1％甲苯胺蘭染液、0.02％詹納斯綠B染液、0.9％NaCl溶液2細(xì)胞膜的通透性顯微鏡30臺，移液器5套含適量盰素的兔血或雞血、乙二醇水溶液、丙三醇水溶液、葡萄糖水溶液、甲醇、乙醇、丙醇、氯化鈉3細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)與幾種細(xì)胞器的觀察顯微鏡30臺細(xì)胞器切片4細(xì)胞的無絲分裂與有絲分裂的觀察顯微鏡30臺洋蔥根尖切片、草履蟲切片5雞血細(xì)胞的體外融合顯微鏡30臺，移液器5套，冷凍離心機2臺雞紅細(xì)胞,50％PEG4000、Hanks液(pH7.4)五、教材及參考書1、王金發(fā)主編，《細(xì)胞生物學(xué)實驗教程》第二版，科學(xué)出版社，2013年；六、教改說明及其他通過本課程（實驗）的教學(xué)，使學(xué)生掌握細(xì)胞生物學(xué)實驗的基本操作及實驗技術(shù)，掌握和了解細(xì)胞生物學(xué)基本原理的驗證性實驗，本實驗課內(nèi)容包括驗證性實驗、綜合實驗兩個部分，驗證性實驗主要通過老師示教后有學(xué)生完成，綜合實驗在教師指導(dǎo)下由學(xué)生自己動手完成，同時，要求學(xué)生根據(jù)所掌握的理論基礎(chǔ)和實驗技能。并培養(yǎng)學(xué)生實事求是的科學(xué)態(tài)度，良