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文檔簡介

藥學(xué)指講

藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)中藥教學(xué)部OO四年六月

藥理實(shí)驗(yàn)教學(xué)目的,不是驗(yàn)證藥學(xué)理論,還培養(yǎng)學(xué)生本操作技,觀察和析解決問的能力,及體驗(yàn)科研究的基原則和基本序從而提高生實(shí)驗(yàn)研能力和嚴(yán)的科學(xué)維方法。了使各專的學(xué)生能入理解藥理的基本理和基本知,特編寫這本《藥學(xué)實(shí)驗(yàn)實(shí)指導(dǎo)》。本實(shí)指導(dǎo)選擇實(shí)驗(yàn)內(nèi)容典、實(shí)做到既與論課有密聯(lián)系,又實(shí)驗(yàn)課的特體系;有整體動(包括清動物和麻動物)實(shí)驗(yàn)又有器官平實(shí)驗(yàn);有驗(yàn)證性驗(yàn),又有設(shè)性實(shí)驗(yàn),還有綜合實(shí)驗(yàn)。從使學(xué)生初1

步具對客觀事進(jìn)行觀察比較、分、綜合和解問題的能并證、固和加深解基本理從而初步握藥學(xué)驗(yàn)的本方法。為了到上述目,要求同們做到下事項(xiàng):一、遵紀(jì)律,前分到達(dá)驗(yàn)室,因外出或退應(yīng)向老請假進(jìn)入實(shí)驗(yàn)必須身穿大衣不許穿拖,衣著整干凈。實(shí)時應(yīng)嚴(yán)肅認(rèn)不高聲談進(jìn)實(shí)驗(yàn)無關(guān)的活。違者給予一定處罰。二、驗(yàn)前1.細(xì)閱讀實(shí)指導(dǎo),了實(shí)驗(yàn)?zāi)康?、求、方法操作步驟領(lǐng)會其設(shè)原理;2.合實(shí)驗(yàn)內(nèi),復(fù)有藥理和生理學(xué)生化學(xué)方面理論識做到充理解;3.預(yù)測驗(yàn)2

中各步驟可能現(xiàn)的情況4.意實(shí)驗(yàn)中能發(fā)生問題。三、驗(yàn)時1.驗(yàn)者須熟悉器的使用點(diǎn),后運(yùn)用。器損壞或靈,應(yīng)請師修理或調(diào)。違章操使儀器損者,要進(jìn)賠償。各小實(shí)驗(yàn)器材得調(diào)換。公用物品用完放回原處。2.實(shí)時將實(shí)驗(yàn)材妥善安好,確置;嚴(yán)按照實(shí)驗(yàn)導(dǎo)上的步進(jìn)行操作準(zhǔn)確計算藥量,防出現(xiàn)差錯外;真細(xì)地觀察驗(yàn)過程中現(xiàn)的現(xiàn)象,時記錄藥反應(yīng)出現(xiàn)時間表現(xiàn)及后轉(zhuǎn),聯(lián)系課講授內(nèi)容行思考。注意節(jié)實(shí)驗(yàn)料四、驗(yàn)后:1.整實(shí)驗(yàn)結(jié)果經(jīng)過分析考,寫出驗(yàn)報告(①.名、級、別、日期操作者.目、目的簡要法(包括器,藥品等).③實(shí)驗(yàn)結(jié)是實(shí)驗(yàn)中重要的部,應(yīng)該忠實(shí)正確地記實(shí)驗(yàn)過程所觀察到現(xiàn)象。3

一定時記錄,可單憑記,否則容發(fā)生錯誤或漏。時給導(dǎo)教;整理驗(yàn)器材,洗凈干,妥為好,放回處。將用的動物進(jìn)行死動物及他廢物丟指定處所。有班長安排組進(jìn)行輪打掃清潔,好實(shí)驗(yàn)室清潔衛(wèi)生(桌凳地、拾凈擺放整齊,離開關(guān)閉所有水、電、關(guān)好門窗生物息學(xué)院中學(xué)教學(xué)部劉圣毅編著二00四年月4

………

實(shí)驗(yàn)一

實(shí)驗(yàn)物的捉持和給藥法3….8實(shí)驗(yàn)二8

不同藥途徑對物作用的響傳出經(jīng)系統(tǒng)藥對麻醉兔壓的作用9…11

氯丙的安定和激怒反應(yīng)用嗎啡鎮(zhèn)痛作用12135

………

有機(jī)藥物的中及其解救14

……1516錄

強(qiáng)心對在體蛙的作用常用生理溶液的成分和配制17186

實(shí)驗(yàn)動物一、用實(shí)驗(yàn)動的捉持法1小鼠)雙法右手鼠尾,放鼠籠蓋或他粗糙上,向方輕拉鼠,使小鼠肢固定在粗糙上迅速用左拇指和食捏其雙耳頸背部膚,無指、指掌心其背部皮和尾部便可將小牢固捉持圖1)7

圖1小鼠手捉持法)單法小鼠于籠蓋上先用左手指和拇抓住鼠尾后手掌尺和小指夾鼠尾,然左手拇指食指捏住部皮膚圖2)。圖2小鼠手捉持法2.大鼠大鼠易激怒咬捉時應(yīng)防護(hù)手套先用右手住鼠尾,用左手拇和食指握頭部,其余指與掌部住背部和部注意要捏其頸部以防用力大、過久窒息死亡3家兔8

一只抓住兔頸部皮膚將兔輕提起,一只手住臀部,兔呈蹲坐勢(圖3)。不可用握持雙耳起兔子。圖3家兔捉法4豚鼠豚鼠情溫和,咬人,用輕輕握住體即可抓起5.貓應(yīng)戴防護(hù)手套輕聲喚慢將手伸貓籠,輕撫頭、頸和部,一只抓住頸背皮膚,另一手抓住腰部性兇暴貓可用布或9

網(wǎng)套持,操作應(yīng)防其利和牙齒傷。6.狗馴服狗可戴上制嘴套,用繩帶固定于后頸部;兇的狗可用柄捕狗夾住狗的頸,然后套嘴套狗嘴可繩帶定,操作先將繩帶過狗嘴的頜打結(jié),繞到頸后打結(jié),以防帶滑落。麻醉后四固定于手臺上,取下套或繩帶,一屬棒兩側(cè)嘴角穿過口腔于舌上,用繩帶繞金屬棒綁狗嘴,并固于手術(shù)臺應(yīng)狗舌出口腔以防窒息。二、用實(shí)驗(yàn)動給藥法1.經(jīng)口給藥此法口服與灌兩種方法適用于小鼠、10

豚鼠兔、犬等物??诜蓪⑺幬锶腼暳匣蛉茱嬎辛钗镒杂蓴z若為保證量準(zhǔn)確,應(yīng)用灌胃。)灌法小鼠左手捉持鼠,腹部上,右手灌胃管經(jīng)口插入口腔,灌管與管成一直,再沿上壁緩慢插食管,稍有阻力時(大約胃管入1/2),如物安靜,吸無異常即可注藥液。如阻力應(yīng)抽灌胃管重插入,若藥誤注氣管,鼠立即亡。一次注藥量體重。操宜柔防止傷食(圖4)。胃管可用大的注射頭制作,鈍針尖制,管長4-5cm,直,連接1-2ml射器上即。11

圖4小鼠灌法大鼠左手捉持鼠,右手灌胃器,胃方法與小相同若兩合時,由助手協(xié)固定后肢尾巴。但胃管必須6,徑尖端呈球,并裝在的注射器。注藥前回抽注射,證明未入氣管(無氣逆流)可注入藥。一次投量1—2ml重。家兔:兩人合作,人好將軀體夾于腿之間,手緊握雙固定頭部右手抓住前肢固定身,使頭稍向后;另一人木或竹制開口橫放于兔中將舌壓,以8號導(dǎo)尿12

管經(jīng)口器中央孔,沿上壁慢慢插食管15為避免誤氣管,可導(dǎo)尿管外端放清水杯中,氣逸出可注入藥,并應(yīng)再入少量清以保證管藥液全部入胃內(nèi)。灌,慢慢出導(dǎo)尿管出開口器(圖。圖5家兔灌法豚鼠如用灌胃,灌胃法大鼠相同如用開口器導(dǎo)尿管,作方法與灌胃法相。貓和:灌胃方與兔相似將導(dǎo)尿管鼻腔或口腔食管插入內(nèi)給藥。操時應(yīng)防止物咬傷與傷。13

)口法片劑物可在扒動物上下列后,用鑷夾住物放在舌部迅合起下頜即可下藥物藥前若先水濕潤口內(nèi)部更易咽下液體物可在輕固定動物部后,從口齒列注入藥液,物能自咽下。溶水的藥物可加入飲中口服,不溶于水的藥可加入飼中給藥。這兩種給法必須是味的藥物,難以保證量準(zhǔn)確。2.注射給藥)皮注法:小鼠:般需兩人作,一把鼠頭鼠尾牽向兩并固定,一人左手起背部皮,右手持注器刺入皮若針頭容向左右擺即可注入液。拔時左手捏針刺部位,防藥液14

外漏(一人操作把小放金屬上,左手鼠尾小鼠其性向移動,此右手持注器從頭端尾部刺入部皮下。藥量0.1-0.3ml/10g重。圖6小鼠下注射法大鼠:捉持法握大鼠于背部或腿拉起皮膚,注射針刺皮下。一注射藥量于1.0ml/100g體重家兔左手將兔部皮膚提,右手持射器,針尖人皮下松左手,進(jìn)注射。15

豚鼠注射部位選用大腿側(cè)面、背、肩部等皮脂肪少的位。通常大腿內(nèi)側(cè)注射。一般兩人合作一人定鼠一人行注射。貓:將部皮膚拉將射針入皮膚與肉之間注入藥液犬:將的頸部或部皮膚拉,注射針入皮下進(jìn)注射。)皮注法:先將射部位剪毛左手繃緊膚,右持注射器小于15°角刺皮,注藥液,注處出現(xiàn)白色小皮。)腹注法:小鼠左手捉持鼠,腹部上,右手注射器針頭入皮膚,部位是距下腹部腹線稍向左或的位置。前推進(jìn)3,接著使注16

射器頭與皮膚角刺入腹,續(xù)向前刺人,通腹肌進(jìn)入腔后抵抗失,這時可輕輕注藥液。小的一次注量為重圖)。圖7小鼠腔注射法大鼠腹腔注射小鼠相同注射量為1—體。豚鼠貓、免豚、腹注射位同小鼠兔在腹部近腹線左右兩約處,在臍后白線側(cè)邊處注射為宜。17

)靜注法:大鼠小鼠一般用靜脈射,事先小鼠和大置于固定筒內(nèi)或鐵罩內(nèi)或扣于燒內(nèi),尾巴露出于45溫水中浸、或用60-100電燈烘、或75%酒棉球擦之血管擴(kuò)張選擇巴左右兩靜脈注射注射若出現(xiàn)隆的白色皮,說明未入血管,應(yīng)新向尾根移動注射。一注射量小為0.05—0.1ml/10g體(8)注完畢后用球按壓止。18

圖8鼠尾靜脈射法家兔:般采用耳靜脈注射可用酒精球涂擦耳邊緣靜脈或用電燈烘烤兔耳血管擴(kuò)張。左手指在耳下作墊右手持注器,針頭經(jīng)下進(jìn)入血注射若阻力無發(fā)生隆起現(xiàn),說明針在血管內(nèi)注射完畢壓住針眼,去針頭,續(xù)壓迫數(shù)鐘止血(9)。圖9家兔耳緣脈注法豚鼠:般用前肢下頭靜脈射,后肢隱靜脈注也可以。近下部比容易刺入脈。注19

射量般不超過。貓:一采用前肢下頭靜脈射。注射先將貓裝固定袋或內(nèi)左手抓住肢,酒棉球涂擦,從前肢末稍端將射器針頭入靜脈。實(shí)針在靜內(nèi)后,即注射。犬:選用前肢下頭靜脈后肢小隱脈注射。以或橡皮帶靜脈向心扎緊,使管充血。精棉球涂后,針頭近心端刺靜脈,回抽栓,倘有血即可推藥液(圖10)圖10犬后外側(cè)小隱靜脈(左)和肢背側(cè)皮頭靜脈右)射法20

[目的]觀察同給途對尼剎米作用影響。[器材]注射1ml×l)、鼠胃器玻璃鐘罩。[藥品]5%尼剎米溶液[動物]小鼠[方法]小鼠3只,重,編號、乙和丙先觀察正活動如呼吸、動度和運(yùn)協(xié)調(diào)程度。然后將甲丙鼠以5尼可剎米液0.2m1/10g體重分別灌胃皮下和腹注射,觀給藥后各鼠否出現(xiàn)興驚等癥,并記錄現(xiàn)癥狀的間和小鼠最終結(jié)局21

[結(jié)果]將觀結(jié)果表較。[思考題]不同藥途徑為么會影響物效應(yīng)?[目的]觀察出神藥對心管系統(tǒng)的用,根據(jù)受體說初步分其作用機(jī)。[器材]號采集系、壓力換器、手術(shù)、動脈套、動脈夾手術(shù)刀,剪刀、22

普通刀、止血、頭皮針紗布、彈夾、螺旋夾三通管lml注射器(2)、20ml注射器(1支)。[藥品]肝素生理水3戊巴妥鈉、腎腺素去甲腎上素、異丙上腺素、黃堿、酚妥明、普萘爾、氯化酰膽堿、托品。[動物]家兔[方法步驟]1儀器調(diào)試將壓換器上接的三通用肝素充,并排里面的空,關(guān)閉三管與壓力換能的連同。23

)壓換器輸插頭接到生物信號集系統(tǒng)的通道上,:三通道2.動物實(shí)驗(yàn)驟1.取兔一只稱重,以1m/kg劑量脈射3戊巴比妥麻醉兔,將兔仰縛兔板上。2.將壓力換器上連接三通管用素溶液充滿,并除里面的氣,關(guān)三管與力換能器的通。3.分離一側(cè)總動脈,動脈下穿根線,遠(yuǎn)心端扎,近端用動脈夾住,用科剪在動脈上一“V”形,將連有力換能器動脈套管入“V”形中,用線扎。檢查,打開三管與壓力能器的連,以備描血壓。4.兔耳緣靜置入頭皮,固定以給藥,每24

次給后用生理水將藥液入靜脈內(nèi)描記段正常血后開始給藥經(jīng)頭皮針耳緣靜依次注射列藥物藥物應(yīng)指標(biāo):壓變化升至最高或降至最點(diǎn)的高度其時間),心率變(率快或慢及其時)。待前一個藥物用基本消后再注下一個藥物(一)作用于α與β受體的物(1)腎上素(1:10,000液,(2)去甲上腺素(1:10,000溶液(3)麻黃(1:200溶液(4)酚妥明(10mg/ml,25

(5)腎上素μg/kg溶液,(二)作用于β受藥物著重察心率變化(6)異丙上腺素1(1:100,000液,(7)普萘爾(1mg/ml,(8)異丙上腺素1(1:100,000液,(三)作用于體物(9)氯化酰膽堿1(1:100,000液,(10)阿托(1:200溶液26

(11)氯化酰膽堿1(1:100,000溶液,[結(jié)果]多媒描記壓化的線,注明用藥物[思考題]從受理論分析解釋各藥兔血壓的響。27

28

[

目的]察氯丙嗪中樞安定用。[器材]理生理多儀、電刺盒、小鐘罩、盤、lml注器粗天、膠布少。[藥品]0.06%鹽氯丙嗪注液、生理水。[動物]性小鼠[方法]29

1.儀器準(zhǔn)備將藥生理多用前面刺激方”置“連B”“A頻率2或4HZ(即次刺激持時間為1/21/4秒時間”置0.51秒即每兩次激間的間時間為1/2或秒)。將面板開關(guān)向“電驚激怒側(cè)(切勿向恒溫光電”側(cè)。將面板電調(diào)至適當(dāng)度140-160V),固定之將與刺激盒相的導(dǎo)線插“交流輸”的兩孔插內(nèi)。2.動物準(zhǔn)備將準(zhǔn)好只性小鼠分別進(jìn)稱重、編。以體重近兩只配,分成對照和用藥組3.測定兩組鼠產(chǎn)斗對恃應(yīng)所需的刺激數(shù)。30

4.對照組給理鹽體重;用藥給0.075%酸氯丙嗪體重重)分鐘后重步驟獲用后產(chǎn)生斗對恃所需激次數(shù)。5.對照組及藥組鼠尾部上膠布并頭向作懸垂?fàn)钣^察各鼠應(yīng)。[結(jié)果]實(shí)驗(yàn)結(jié)果入下表。表

氯丙對電刺激鼠激怒反的影響鼠號1

組別鹽酸丙

產(chǎn)生咬反應(yīng)所刺激次給藥給藥31

234

嗪組生理水組[思考]氯丙對小鼠產(chǎn)安定作用機(jī)理?有何臨床義嗎啡的鎮(zhèn)[目的]觀察啡的痛應(yīng),握鎮(zhèn)痛實(shí)方法(板法。[器材]熱板痛實(shí)儀、粗平、平口1ml注射、棉花少。[藥品]0.15%鹽酸啡、生理水。32

[動物]雌性鼠[方法]1.每組取雌小鼠(18-22g只全分為十組依次測定痛閾值。2.調(diào)節(jié)熱板痛實(shí)驗(yàn)儀溫度,使保持在55土1℃。3.測定時,小鼠分別入盒內(nèi),察并記錄小鼠放入盒內(nèi)出現(xiàn)舔后所需時間秒以此為該鼠的閾值,將鼠取出。在30秒內(nèi)出現(xiàn)添后,或逃避躍者應(yīng)棄不用。4.將篩選合的小鼠4只,稱重號,隨機(jī)成兩,每隔分鐘定各鼠正痛閾共2次,平均值作給藥前的閾值。5.給藥組只小鼠腹腔射鹽酸嗎啡重對照2小鼠腹腔射等33

容量理鹽水。給藥后5、10、20、40、80分鐘測痛閾值2次,取平均值如果60秒反應(yīng),立即將小取出以免時間長把足燙傷,閾值計為秒。[結(jié)果]1.統(tǒng)計全班果,填入表,并計痛閾提高百分。表嗎啡的鎮(zhèn)作用(熱法)記錄痛閾

痛閾提高百藥編

劑分率物號

量給

給藥

給藥34

藥510前2060

藥510前4060嗎啡生理鹽水2.以時間為坐標(biāo),閾高百率為縱坐畫出組時-效曲,以分析物的作用度,作用始時間和持時間。[注意項(xiàng)1.選用雌性鼠較好,雄性小鼠熱后陰囊35

松馳與熱板接易致反應(yīng)敏。2.室溫對此驗(yàn)有一定響以15-20℃為宜過低小鼠反應(yīng)鈍過高時則于敏感,引起跳,均影響驗(yàn)結(jié)果的確性。3.正常小鼠般放在熱上10-15秒鐘內(nèi)出不安舉前肢、前足、踢肢、跳躍現(xiàn)象,但這動作均不為疼痛指只有舔后才作為疼的指標(biāo)。4.物的體重結(jié)果影,一用克左的體為宜。[思考題]闡明啡鎮(zhèn)痛作原理及鎮(zhèn)的時效關(guān)。36

37

[目的]察有機(jī)磷物中毒的狀及對血膽堿酶的抑制況根阿托和解磷啶有機(jī)磷毒的解救果分和比兩藥解毒用的特和原理。38

[器材]1ml、2ml注射器剪刀試管架、溫水浴儀試管1ml2ml吸、小杯、漏斗濾紙等。[藥品]5%敵蟲%硫阿托品%解磷、磷酸緩液PH7.2),0.007M酰膽堿、鹽酸羥胺、14%氫化鈉、鹽酸10%三氯鐵溶、素300u/ml)[動物]家兔[方法]1.家兔兩只以甲乙號,體重后分觀察列各項(xiàng)指;活動情、呼吸、孔、唾液、小便、以有無肌震等,分別錄于表1內(nèi)。39

2.將兔頭固,用酒精球反復(fù)擦殼,使血管張,當(dāng)充明顯時,甲、兩兔耳靜注射5%敵蟲溶液2ml/Kg(100mg/Kg)密切察表的項(xiàng)指并作錄待中毒癥狀顯時,然甲兔靜脈0.1%酸托品,兔靜脈注射解磷啶100mg/Kg,密注意甲、兔中癥的改變,至中毒癥明顯消失,加以記。[注意項(xiàng)]1.靜脈給敵蟲后應(yīng)阿托溶液吸好并作隨時注射備。2.個別家兔脈給磷后癥加重(藥慢)嚴(yán)重者可阿托品控癥狀。40

活動情活動情表1

有機(jī)農(nóng)藥中毒狀及解救察指標(biāo)血膽兔體察

堿小

震號重段

便

酯酶活力用藥前敵百甲蟲后阿托品后用藥乙前41

敵百蟲后解磷啶后[思考題]簡述有機(jī)磷農(nóng)藥的中毒原理、中毒癥狀、解毒原理。42

[目的]習(xí)在體蛙的制備,察強(qiáng)心苷在體心的作用43

[器材]計算機(jī)多體記儀蛙板張力換能、探針、通剪刀、科剪、眼鑷、鐵支架雙凹夾、杯、滴管蛙心夾、釘、棉線。[藥品]任氏液、鈣任液,:8000毒毛旋子甙%氯鈣溶液。[動物]或蟾蜍[方法]1.取蟾蜍搗腦和髓,仰固定于蛙上,開胸腹部膚,打開腔和胸腔充分暴露出壁靜脈和臟將蛙心夾在心尖上有線端心垂直系張力換能上蛙心面每隔10分鐘滴管加氏液保護(hù)蛙心44

2.描記一段常心收曲線記錄正常收縮度和頻率次/分后依次從壁靜脈加入下藥物,觀察縮曲線有變化。)生鹽水)洋黃:1000)洋黃:5000)1%氯化,0.4ml)2%氯化,0.4ml[結(jié)果]繪曲線,錄每次給后心肌收強(qiáng)度心率、節(jié)的變化。[思考]1.試述強(qiáng)心對心的用特及原理。45

2.為什么應(yīng)強(qiáng)心時禁用劑(iv)?附錄一、配制生溶液的要

常用生理溶液的成分和配制1.滲壓生理溶液要等滲但不同動要求不同如生理鹽溶液,冷血動物所用NaCl為一0.75,溫血動所用為0.6—0.9%。2.各離子生理溶液中含一定比的不同電質(zhì)(或稱機(jī)鹽類的子N

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