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關(guān)于微生物驗證自發(fā)突變?nèi)齻€經(jīng)典實驗第一頁,共十七頁,編輯于2023年,星期一基因突變一、基因突變簡稱突變,指細胞內(nèi)(或病毒粒內(nèi))遺傳物質(zhì)的分子結(jié)構(gòu)或數(shù)量突然發(fā)生的可遺傳的變化。(一)類型1、根據(jù)表型劃分第二頁,共十七頁,編輯于2023年,星期一突變類型自發(fā)突變
誘發(fā)突變低劑量多因素突變互變異構(gòu)效應(yīng)物理誘變化學(xué)誘變定向培育和馴化第三頁,共十七頁,編輯于2023年,星期一微生物基因突變的特點自發(fā)性:沒有人為誘變因素可自發(fā)產(chǎn)生稀有性:突變率比較低,范圍10-6~10-9獨立性:某基因突變率不受別的基因影響。多基因同時突變幾率極低。可誘變性:誘變劑可提高突變率穩(wěn)定性:突變后新性狀是穩(wěn)定的、可遺傳的。規(guī)律性:特定性狀具有較穩(wěn)定的突變率的規(guī)律??赡嫘裕阂吧屯蛔冃驼蛲蛔兓貜?fù)突變第四頁,共十七頁,編輯于2023年,星期一不對應(yīng)性:突變的性狀與引起突變的原因(環(huán)境)之間無直接的關(guān)系。兩種觀點:抗生素、紫外線或高溫誘變產(chǎn)生相對應(yīng)的突變性狀(非自發(fā)性)。認為突變是通過生物對某特定環(huán)境(例如化學(xué)藥物、抗生素和高溫等)的適應(yīng)而產(chǎn)生的,這種環(huán)境正是突變的誘因,所產(chǎn)生的抗性性狀是與該環(huán)境因素相對應(yīng)的,并認為這就是環(huán)境因素對生物體的“馴化”、“馴養(yǎng)”、“蒙導(dǎo)”或“定向變異”??股亍⒆贤饩€或高溫淘汰原有非突變個體(自發(fā)性)。抗性突變是可以自發(fā)產(chǎn)生的,即使誘發(fā)產(chǎn)生,其產(chǎn)生的性狀與誘變因素間也是不對應(yīng)的,即最終適應(yīng)了的化學(xué)藥物等不良因素并非誘變因素,而僅僅是一種用于篩選的環(huán)境而已。
第五頁,共十七頁,編輯于2023年,星期一基因突變的自發(fā)性和不對應(yīng)性的證明突變是通過適應(yīng)而產(chǎn)生的,突變的原因與性狀間是相對應(yīng)的。
突變是自發(fā)的,與環(huán)境是不相對應(yīng)的。
PK第六頁,共十七頁,編輯于2023年,星期一微生物突變的自發(fā)性和不對應(yīng)性證明取敏感于噬菌體的E.coli指數(shù)期的肉湯培養(yǎng)物,用新鮮培養(yǎng)稀釋成濃度為103/mL的細菌懸液,然后在甲、乙兩試管各裝10mL。
1、變量實驗(1)實驗內(nèi)容:E.coli對于phageT1的抗性變異波動實驗。第七頁,共十七頁,編輯于2023年,星期一接著把甲管中的菌液先分裝在50支小試管中(每管0.2mL),保溫24-36h。
微生物突變的自發(fā)性和不對應(yīng)性證明第八頁,共十七頁,編輯于2023年,星期一把各小管的菌液分別倒在50個預(yù)先涂滿噬菌體T1的平板上,經(jīng)培養(yǎng)后分別計算各皿上所產(chǎn)生的抗噬菌體的菌落數(shù)。
微生物突變的自發(fā)性和不對應(yīng)性證明第九頁,共十七頁,編輯于2023年,星期一乙管中的10mL菌不經(jīng)分裝先整管保溫24—36h,然后分成50份分別倒在同樣涂滿T1的平板上,經(jīng)同樣培養(yǎng)后,也分別計算各皿上所產(chǎn)生的抗噬菌體菌落數(shù)
。
微生物突變的自發(fā)性和不對應(yīng)性證明第十頁,共十七頁,編輯于2023年,星期一結(jié)果:在來自甲管的50皿中,各皿出現(xiàn)的抗性菌落數(shù)相差極大,而來自乙管的則各皿上抗性菌落數(shù)基本相同
。
微生物突變的自發(fā)性和不對應(yīng)性證明第十一頁,共十七頁,編輯于2023年,星期一結(jié)論:E.coli抗噬菌體性狀的產(chǎn)生,并非由所抗的環(huán)境因素(即噬菌體T1)誘導(dǎo)出來的,而是在它接觸T1前,在某次細胞分裂過程中自發(fā)產(chǎn)生的
。
微生物突變的自發(fā)性和不對應(yīng)性證明第十二頁,共十七頁,編輯于2023年,星期一2、涂布實驗(1)實驗內(nèi)容:第十三頁,共十七頁,編輯于2023年,星期一(2)實驗原理:若抗性是在接觸噬菌體以后產(chǎn)生的,那么噴噬菌體以前的重新涂布無非使細菌所處的位置發(fā)生改變,而不會因為涂布大大地改變細菌對于噬菌體的反應(yīng),因此兩組培養(yǎng)皿上出現(xiàn)的抗性菌落數(shù)應(yīng)相等;若抗性發(fā)生在接觸噬菌體以前,那么在噴上噬菌體以前某些菌落中的抗性突變型細菌已經(jīng)分裂若干次,在不經(jīng)重新涂布的培養(yǎng)皿上形成一個菌落,在重新涂布的培養(yǎng)皿上出現(xiàn)若干菌落。(3)結(jié)果:重新涂布的培養(yǎng)皿上出現(xiàn)的抗性菌落多余未經(jīng)重新涂布的。(4)結(jié)論:抗性突變的發(fā)生在接觸噬菌體之前。第十四頁,共十七頁,編輯于2023年,星期一3、影印培養(yǎng)實驗(1)實驗內(nèi)容:第十五頁,共十七頁,編輯于2023年,星期一(2)實驗原理:通過蓋印章的方式,在未接觸抗性因素的條件下篩選出的抗性突變株。由于實驗過程中沒有接觸過抗性因素,所以直接證明了基因突變的自發(fā)性。(3)結(jié)果
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