關于離子交換色譜展示第一頁，共二十一頁，編輯于2023年，星期三基本原理：離子交換色譜（ionexchangechromatography，IEC）

以離子交換樹脂作為固定相，樹脂上具有固定離子基團及可交換的離子基團。當流動相帶著組分電離生成的離子通過固定相時，組分離子與樹脂上可交換的離子基團進行可逆變換。根據(jù)組分離子對樹脂親合力不同而得到分離。第二頁，共二十一頁，編輯于2023年，星期三主要用于分離離子或可離解的化合物，包括氨基酸，多肽，核酸，核苷等各種生物大分子。離子交換色譜的運用：第三頁，共二十一頁，編輯于2023年，星期三分離純化生物大分子Po+ZDo=Pb+ZDb重視Po:流動相中溶質(zhì)的濃度；Pb:填料表面上被吸附的溶質(zhì)濃度;Do:流動相中洗脫劑的濃度；Db:填料表面上洗脫劑的濃度；Z:蛋白質(zhì)在吸附過程中從填料表面上被置換的洗脫劑的數(shù)目；第四頁，共二十一頁，編輯于2023年，星期三以離子交換色譜快速純化8一淀粉酶為例研究探討離子交換色譜第五頁，共二十一頁，編輯于2023年，星期三

本研究利用合成的強陰離子交換柱很好地分離了a-淀粉酶粗品,其活性回收率高達96%,比活性達388ug/mg蛋白質(zhì)純度提高30倍。此法的研究成功為大規(guī)模制備高純度a-淀粉酶提供了一個新工藝路線。

高純度的8一淀粉酶可作為酶試劑,研究生物作用的特性、酶反應機理,測定生化反應的平衡常數(shù)。1.0摘要：第六頁，共二十一頁，編輯于2023年，星期三2.0實驗部分

2.1標準酶液配制

用微量天平準確稱取5mg高純度的a-淀粉酶試劑,于小離心試管中,準確加1.0ml水,溶解后,在1300r/min的高速離心機上離心5min,小心轉(zhuǎn)移上部清液于另一離心試管中,此液相當于1062u/ml活力.第七頁，共二十一頁，編輯于2023年，星期三第八頁，共二十一頁，編輯于2023年，星期三第九頁，共二十一頁，編輯于2023年，星期三第十頁，共二十一頁，編輯于2023年，星期三3.0結(jié)果與討論

3.1洗脫劑為獲得高的洗脫效率,本實驗選用0.02mol/LTris-2mol/LNacl(PH6.0)體系作為洗脫劑.（Tris-指三羥甲基氨基甲烷）第十一頁，共二十一頁，編輯于2023年，星期三第十二頁，共二十一頁，編輯于2023年，星期三第十三頁，共二十一頁，編輯于2023年，星期三由圖2可知,在2.0mol/L以下,隨鹽濃度的增加,洗脫能力增大,活性回收率提高。洗脫液中離子強度對洗脫效率的影響可歸結(jié)為離子交換平衡的移動,這種色譜行為表明該固定相具有典型的陰離子交換特性,符合離子交換色譜的洗脫規(guī)律。但在2.0mol/L以上,隨鹽濃度增加洗脫能力下降。這種反常現(xiàn)象,可能是由于離子交換柱的多功能特性引起。第十四頁，共二十一頁，編輯于2023年，星期三實驗證明,離子交換柱不僅有離子交換的作用,而且還表現(xiàn)一定的疏水作用的。并且這種疏水作用,隨溶液離子強度發(fā)生變化。當洗脫劑濃度大于2.0mol/L時,由于溶液的表面張力過大,離子交換劑的疏水作用變得明顯,對蛋白質(zhì)疏水締合作用增強,故被吸附的蛋白質(zhì)難以洗脫,因而活性回收率下降。所以選擇抓Nacl濃度為2.0mol/L.第十五頁，共二十一頁，編輯于2023年，星期三3.3PH對活性回收率的影響第十六頁，共二十一頁，編輯于2023年，星期三第十七頁，共二十一頁，編輯于2023年，星期三第十八頁，共二十一頁，編輯于2023年，星期三第十九頁，共二十一頁，編輯于2023年，星期三總結(jié)凡在溶液中能夠電離的物質(zhì)通常都可以用離子交換色譜法進行分離。它不僅適用于無機離子混合物的分離，亦可用于有機物的分離，例如氨基酸、蛋白質(zhì)等生物